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LncRNA EPIC1保護(hù)成骨細(xì)胞免受地塞米松損傷

發(fā)布時(shí)間:2024-12-21 02:56
  背景和目的:骨質(zhì)疏松癥是代謝性骨病變,主要特征是骨組織量減少及骨微結(jié)構(gòu)退化,骨質(zhì)疏松可增加骨脆性和骨折。然而,骨質(zhì)疏松癥的分子機(jī)制仍不明確。糖皮質(zhì)激素直接作用于成骨細(xì)胞,導(dǎo)致成骨細(xì)胞產(chǎn)生量減少,并引起成骨細(xì)胞凋亡。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(LncRNA)已成為控制基因表達(dá)和影響多種生物過程的重要表觀遺傳調(diào)節(jié)因子。越來越多的證據(jù)表明LncRNA參與骨重塑,與骨質(zhì)疏松的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。人成骨細(xì)胞中,地塞米松(Dex)處理導(dǎo)致顯著的細(xì)胞毒性。LncRNA EPIC1(Lnc-EPIC1)是與Myc直接作用的LncRNA。本論文主要檢測(cè)了 Lnc-EPIC1對(duì)Dex誘導(dǎo)的人成骨細(xì)胞損傷的潛在影響及機(jī)制研究。研究方法和內(nèi)容:在OB-6人成骨細(xì)胞株和原代人成骨細(xì)胞中,通過慢病毒包裹Lnc-EPIC1 載體(“LV-EPIC1”)過表達(dá) Lnc-EPIC1;并通過 siRNA 手段沉默 Lnc-EPIC1的表達(dá)。上述細(xì)胞用Dex處理后,用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)檢測(cè)Lnc-EPIC1的表達(dá);通過MTT(3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2H-四唑溴化物)法、乳酸脫氫酶(LDH)法...

【文章頁數(shù)】:106 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

圖1.?OB-6成骨細(xì)胞中地塞米松處理增加LncRNA?EPIC1的表達(dá)??用慢病毒包裹的?Lnc-EPICl?表達(dá)載體(pLenti6-puro-GFP-Lnc-EPICl,??

圖1.?OB-6成骨細(xì)胞中地塞米松處理增加LncRNA?EPIC1的表達(dá)??用慢病毒包裹的?Lnc-EPICl?表達(dá)載體(pLenti6-puro-GFP-Lnc-EPICl,??

LncRNA?EPIC1保護(hù)成骨細(xì)胞免受地塞米松損傷?第一部分??本課題中,我們首先檢測(cè)了地塞米松(Dex)對(duì)Lnc-EPICl表達(dá)的潛在影響。在??OB-6[19,28-30]人成骨細(xì)胞株中,Dex處理(lfiM,?24小時(shí))后,Lnc-EPICl表達(dá)增??加超過一倍(圖1)。....


圖2.?LncRNA?EPICl過表達(dá)顯著抑制地塞米松誘導(dǎo)的OB-6成骨細(xì)胞死亡??用慢病毒包裹的?Lnc-EPICl?表達(dá)載體(pLenti6-puro-GFP-Lnc-EPICl,??

圖2.?LncRNA?EPICl過表達(dá)顯著抑制地塞米松誘導(dǎo)的OB-6成骨細(xì)胞死亡??用慢病毒包裹的?Lnc-EPICl?表達(dá)載體(pLenti6-puro-GFP-Lnc-EPICl,??

第一部分?LncRNAEPICl保護(hù)成骨細(xì)胞免受地塞米松損傷??胞存活率(MTTOD,圖2A)顯著下降,而細(xì)胞死亡(LDH釋放,圖2B)顯著增加;??而兩株LV-EPIC1過表達(dá)的0B-6成骨細(xì)胞中(見圖1),Dex?(l|iM,24小時(shí))誘導(dǎo)??的存活率下降(圖2A)和死亡(圖....


圖3.?OB-6成骨細(xì)胞屮,LncRNA?EPIC1過及達(dá)V著抑制地寒米松誘導(dǎo)的??Caspase-3??

圖3.?OB-6成骨細(xì)胞屮,LncRNA?EPIC1過及達(dá)V著抑制地寒米松誘導(dǎo)的??Caspase-3??

LncRNA?EPIC1保護(hù)成骨細(xì)胞免受地塞米松損傷?第一部分??LV-EPIC1對(duì)0B-6細(xì)胞Caspase-3的活化無顯著作用(圖3A和B)。因此,0B-6成??骨細(xì)胞中,LncRNAEPICl過表達(dá)顯著抑制Dex誘導(dǎo)的Caspase-3活化。??A.?B.??OB-6?ce....


圖4.?OB-6成骨細(xì)胞中,LncRNAEPIC1過表達(dá)顯著抑制地塞米松誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡-1??用慢病毒包裹的Lnc-EPICl表達(dá)載體(pLenti6-puro-GFP-Lnc-EP丨C1,??

圖4.?OB-6成骨細(xì)胞中,LncRNAEPIC1過表達(dá)顯著抑制地塞米松誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡-1??用慢病毒包裹的Lnc-EPICl表達(dá)載體(pLenti6-puro-GFP-Lnc-EP丨C1,??

受地塞米松損傷??A.?OB-6?cells?B.?OB-6?cells?#??Q?1?2]ciVector?—-—?°'5]a?Vector?f?^??〇?S?圈?lv-ePIC1(L1)?1??<?BLV-hHIUT?(L2)?^?O?Q4?bLV-EPICI?(L2)??§....



本文編號(hào):4018284

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