發(fā)布時間：2022-01-15 08:51

　　第一部分LSD1通過促進PTEN泛素化降解抑制成肌細胞自噬的實驗研究賴氨酸特異性去甲基化酶LSD1能夠脫去組蛋白H3第4位賴氨酸（H3K4）和第9位賴氨酸（H3K9）的單甲基或二甲基發(fā)揮轉錄調控功能。除組蛋白底物外,越來越多的研究表明LSD1也能夠調控非組蛋白底物發(fā)揮生物學功能。在成肌細胞生長以及分化過程中,除通過調控組蛋白底物發(fā)揮轉錄調控功能外,LSD1是否通過調控非組蛋白底物調控成肌細胞的自噬還未見報道。本研究通過使用LSD1的特異性抑制劑以及si RNA證明,LSD1負向調控成肌細胞C2C12的自噬水平;相關信號轉導分子的檢測以及回復實驗表明,LSD1通過AKT/m TORC1通路作用于自噬的起始階段;進一步的機制研究發(fā)現(xiàn),LSD1的活性抑制導致AKT主要的負向調控分子PTEN的蛋白質水平升高。LSD1對PTEN蛋白質水平的調控不依賴其轉錄調控功能,LSD1與PTEN相互結合并促進PTEN蛋白質分子的泛素化修飾,導致PTEN的蛋白質穩(wěn)定性降低。以上研究結果表明,PTEN可能是LSD1新的非組蛋白底物,LSD1通過調控PTEN的蛋白質水平抑制成肌細胞C2C12自噬的發(fā)生,并在成肌分... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

1LSD1抑制劑SP2509對C2C12細胞增殖的影響

重慶醫(yī)科學博研究學位論23圖1.1.2SP2509處理C2C12細胞后的免疫印記與qRT-PCR結果Fig1.1.2WesternblottingandqRT-PCRofC2C12cellsaftertreatmentwithSP2509(*p<0.05,**p<0.01,comparedwithcontrol)2.1.3GSK-LSD1與GSK2879552對LC3B與p62蛋白質水平的影響為了排除SP2509脫靶效應的可能性，我們應用了另外兩種不可逆的抑制劑，GSK-LSD1與GSK2879552（圖1.1.3A）。用不同濃度的GSK-LSD1與GSK2879552處理細胞48h，結果顯示GSK-LSD1與GSK2879552對自噬的調控作用與SP2509類似（圖1.1.3B-C）。表明抑制LSD1去甲基化酶活性能促進自噬的產生。圖1.1.3GSK-LSD1與GSK2879552作用后LC3B及p62蛋白質水平的變化Fig1.1.3TheproteinlevelsofLC3Bandp62ofC2C12cellsaftertreatmentwithLSD1inhibitorGSK-LSD1andGSK28795522.1.4敲減LSD1增加C2C12細胞LC3B-II的水平為了進一步驗證LSD1與自噬的調控關系，我們在C2C12細胞中應用了兩種

重慶醫(yī)科學博研究學位論23圖1.1.2SP2509處理C2C12細胞后的免疫印記與qRT-PCR結果Fig1.1.2WesternblottingandqRT-PCRofC2C12cellsaftertreatmentwithSP2509(*p<0.05,**p<0.01,comparedwithcontrol)2.1.3GSK-LSD1與GSK2879552對LC3B與p62蛋白質水平的影響為了排除SP2509脫靶效應的可能性，我們應用了另外兩種不可逆的抑制劑，GSK-LSD1與GSK2879552（圖1.1.3A）。用不同濃度的GSK-LSD1與GSK2879552處理細胞48h，結果顯示GSK-LSD1與GSK2879552對自噬的調控作用與SP2509類似（圖1.1.3B-C）。表明抑制LSD1去甲基化酶活性能促進自噬的產生。圖1.1.3GSK-LSD1與GSK2879552作用后LC3B及p62蛋白質水平的變化Fig1.1.3TheproteinlevelsofLC3Bandp62ofC2C12cellsaftertreatmentwithLSD1inhibitorGSK-LSD1andGSK28795522.1.4敲減LSD1增加C2C12細胞LC3B-II的水平為了進一步驗證LSD1與自噬的調控關系，我們在C2C12細胞中應用了兩種

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3590311