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基于NGF/ASK1/FoxO1與NGF/AKT/CREB通路研究RGCs凋亡機制及補腎活血法的干預(yù)效應(yīng)與作用機制

發(fā)布時間:2024-07-08 23:38
  背景和目的:青光眼不可逆的視神經(jīng)損害對人類視覺質(zhì)量構(gòu)成極大的威脅,深入了解青光眼視神經(jīng)損害發(fā)生發(fā)展機制及開發(fā)視神經(jīng)保護藥物的形式刻不容緩。研究發(fā)現(xiàn)由高眼壓(high intraocular pressure,HIOP)導(dǎo)致的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(retinal ganglion cells,RGCs)進行性凋亡是青光眼視神經(jīng)損害的根本原因。另外,抑凋亡和促凋亡信號因子的相對表達對RGCs凋亡具有重要調(diào)控作用,而NGF/ASK1/FoxO1通路與NGF/AKT/CREB通路與細胞凋亡密切相關(guān),因此NGF/ASK1/FoxO1通路與NGF/AKT/CREB通路可能參與RGCs凋亡相關(guān)機制。既往青光眼視神經(jīng)保護以活血通絡(luò)為主,滋養(yǎng)肝腎較少,滋養(yǎng)肝腎、活血通絡(luò)同用者罕見,系統(tǒng)研究更少。補精益視片為中醫(yī)眼科名家陳達夫教授經(jīng)驗方,具有滋養(yǎng)肝腎、活血通絡(luò)的作用,作為補腎活血法代表方,我們前期臨床及動物實驗均已明確其對青光眼具有較好的視神經(jīng)保護作用,其具體作用機制尚需進一步探索。本研究首先通過體外高壓誘導(dǎo)、成功構(gòu)建RGCs凋亡模型,觀察不同壓力梯度對RGCs凋亡的影響,從NGF/ASK1/FoxO1與NG...

【文章頁數(shù)】:103 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

圖1體外培養(yǎng)RGCs的鑒定和純度測試注:圖中綠色為Thy1.1免疫熒光染色,藍色為DAPI染色,100×,200×

圖1體外培養(yǎng)RGCs的鑒定和純度測試注:圖中綠色為Thy1.1免疫熒光染色,藍色為DAPI染色,100×,200×

圖1體外培養(yǎng)RGCs的鑒定和純度測試hy1.1免疫熒光染色,藍色為DAPI染色,100×,200×。力梯度對RGCs形態(tài)學(xué)變化的影響可誘導(dǎo)體外RGCs發(fā)生凋亡相關(guān)的形態(tài)學(xué)改變。在本研究中微鏡觀察了RGCs的形態(tài)學(xué)變化。在0mmHg組,細胞傾向神經(jīng)突....


圖2不同壓力梯度誘導(dǎo)RGCs體外凋亡形態(tài)學(xué)改變注:A:0mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);B:20mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);C:40mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);D:60mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);E:

圖2不同壓力梯度誘導(dǎo)RGCs體外凋亡形態(tài)學(xué)改變注:A:0mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);B:20mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);C:40mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);D:60mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);E:

圖2不同壓力梯度誘導(dǎo)RGCs體外凋亡形態(tài)學(xué)改變A:0mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);B:20mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×40mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×);D:60mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×....


圖3不同壓力對體外純化培養(yǎng)RGCs細胞活性的影響(xs,n=3)

圖3不同壓力對體外純化培養(yǎng)RGCs細胞活性的影響(xs,n=3)

80mmHg組的RGCs形態(tài)學(xué)改變(100×)。1.4.3不同壓力梯度對RGCs活性的影響選取CCK-8法檢測RGCs的活性,由表2及圖3可見:0mmHg組(100.00±2.94)與20mmHg組(96.22±1.65)在細胞活性方面無顯著差異(P>0....


圖4不同壓力對體外純化培養(yǎng)RGCs細胞凋亡率的影響(xs,n=3)

圖4不同壓力對體外純化培養(yǎng)RGCs細胞凋亡率的影響(xs,n=3)

圖4不同壓力對體外純化培養(yǎng)RGCs細胞凋亡率的影響(xs,n=3)注:(A)不同壓力值(0mmHg、20mmHg、40mmHg、60mmHg、80mmHg)下AnnexinV/PI流式細胞術(shù)的照片。(B)細胞凋亡率的量化比較(,n=3),與0mmH....



本文編號:4004049

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