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超聲分子顯像評價腫瘤血管生成與監(jiān)測CA4P抗腫瘤療效的實驗研究

發(fā)布時間:2021-09-29 14:51
  載Tomato Lectin微泡對腫瘤血管超聲分子成像研究研究背景及目的形態(tài)與血流動力學(xué)上,新生腫瘤血管的主要表現(xiàn)為發(fā)育不成熟的血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管腔迂曲不規(guī)則,管腔內(nèi)血流緩慢不均一。組織學(xué)監(jiān)測上,廣泛運(yùn)用標(biāo)記熒光基團(tuán)的番茄屬植物血凝素(Tomato Lectin)標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞。因此,載有Tomato Lectin分子的微泡(Lectin-MB)或與血管的內(nèi)皮細(xì)胞相結(jié)合,同時,腫瘤血管內(nèi)緩慢的血流速度產(chǎn)生較低的血管切應(yīng)力,據(jù)此我們假設(shè),較之正常組織區(qū)域,LectinMB會特異性地聚集在腫瘤血管區(qū)域。本研究旨在通過體外及體內(nèi)實驗探討載Tomato Lectin微泡對腫瘤血管的超聲分子成像效果。方法按照2:2:0.1的質(zhì)量比,將膠束DSPC,PEG,PEG-PEG-Biotin溶解于生理鹽水中,制備生物素化微泡(Biotin-MB)。十氟丁烷氣體與成比例配置好的膠束混合后,在超聲儀聲震下形成Biotin-MB。通過生物素-親和素-生物素偶聯(lián)法將生物素化Tomato Lectin合成在Biotin-MB表面。采用生物素化的大鼠非特異性Ig G2制備對照組微泡(Ig G-MB)。Lectin... 

【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:89 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

超聲分子顯像評價腫瘤血管生成與監(jiān)測CA4P抗腫瘤療效的實驗研究


載Tomato-Lectin靶向微泡制備模式圖

粒徑分布,微泡,形態(tài)學(xué),粒徑分布


華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文22載Tomato-Lectin的微泡(Lectin-MB)均為不透明乳白色懸濁液,室溫靜置后分層,含氣微泡浮于上層。圖2(a)為光學(xué)顯微鏡下的Biotin-MB,微泡呈球形,形態(tài)規(guī)則,分散性較好,分布混勻,無聚集現(xiàn)象。合成制備好的Biotin-MB、Streptavidin-MB、Lectin-MB的濃度,浮選法去掉粒徑的微泡,其中粒徑<4μm的微泡占總數(shù)百分比見表7。由于在Lectin-MB制備的過程中,涉及孵化及九次離心過程,高速剪切力破壞會部分微泡,制備過程中會損失部分微泡,因此微泡濃度隨時間延長呈逐漸下降的趨勢。Biotin-MB與Streptavidin-MB平均粒徑分布之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.099,p<0.05)。圖2(b)為三種微泡的粒徑分布曲線圖,各組微泡粒徑均一,呈單峰分布,無明顯聚集現(xiàn)象。Lectin-MB的曲線相比Biotin-MB及Streptavidin-MB峰值略右移,平均粒徑增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.047,p<0.01;t=1.981,p<0.01)。圖2微泡形態(tài)學(xué)觀察及粒徑分布。(a)Biotin-MB光鏡圖,標(biāo)尺=10μm(b)分別為同批次制備過程中Biotin-MB(藍(lán)色曲線)、Streptavidin-MB(紅色曲線)、Lectin-MB(黃色曲線)粒徑分布圖曲線。

粒徑分布,粒徑分布,濃度,藍(lán)色


華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文25圖3Biotin-MB隨時間延長濃度的變化(a)及粒徑分布變化(b);Streptavidin-MB隨時間延長濃度的變化(c)及粒徑分布變化(d);Lectin-MB隨時間延長濃度的變化(e)及粒徑分布變化(f);0h為紅色,12h為黃色,24h為藍(lán)色,48h為紫色。*p<0.05相比0h差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。


本文編號:3413901

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