胰腺癌是高度惡性的消化道腫瘤,被發(fā)現(xiàn)時患者往往處于癌癥晚期,只有極少部分患者早期能得到診斷,并進行下一步的根治性手術(shù)治療。在臨床上目前還沒有敏感性高特異性強的診斷標(biāo)志物來對胰腺癌進行早期診斷,同時也沒有一個有效的手段來延長胰腺癌患者的生存期。胰腺癌患者僅不到20%可行手術(shù),對于無法手術(shù)的患者,介入與常規(guī)的細胞毒性化學(xué)治療效果不佳,尋找新的治療手段已迫在眉睫。在人類的惡性疾病中,microRNA出現(xiàn)了不同程度的表達的異常,這些結(jié)果顯示其在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中可能起著重要作用。本研究擬采用相關(guān)的生物學(xué)技術(shù)及方法來初步探討miR-539在胰腺癌中的表達及其對胰腺癌生物學(xué)行為影響的調(diào)控機制。第一部分microRNA-539表達下調(diào)提示胰腺癌患者預(yù)后不良本研究擬分析miR-539表達水平與胰腺癌患者臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性。我們用RT-qPCR技術(shù)檢測了 56例胰腺癌患者中miR-539的表達水平,并將它與癌旁組織進行比較,我們發(fā)現(xiàn),胰腺癌患者中miR-539表達水平顯著下調(diào)。miR-539的表達水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（有VS無）、臨床分期（Ⅲ-Ⅳ與Ⅰ-Ⅱ）、CA 199（≥200與<200）和... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：150 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－４?ＣＹ３轉(zhuǎn)染胰腺癌細胞熒光顯微鏡圖片??

（ＨＰＤＥ６－Ｃ７）檢測值作為對照，結(jié)果表明：ｍｉＲＮＡ－５３９在ＡＳＰＣ－１、ＢＸＰＣ－３??和ＰＡＮＣ－１這３株人胰腺癌細胞中的表達水平均顯著下調(diào)，同對照細胞相比，??其結(jié)果有顯著性差異（Ｐ?＜０．０５）。（圖２－３）??１．４－??議＋…??Ｉ－?＿幽Ａ幽??ｉ－ｉｙ?■?■?ｉｌｌ??ＨＰＤＥ６－Ｃ７?ＡＳＰＣ－１?ＢＸＰＣ－３?ＰＡＮＣ－１??圖２－３?ｍｉＲ－５３９在胰腺癌細胞系和正常人胰腺細胞系ＨＰＤＥ６－Ｃ７中的相對表達水平。??Ｆｉｇｕｒｅ．２－３?Ｔｈｅ?ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｍｉＲ－５３９?ｉｎ?ＰＣ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ?ａｎｄ?ｎｏｒｍａｌ?ｈｕｍａｎ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ??ｄｕｃｔ?ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?ｌｉｎｅ?ＨＰＤＥ６－Ｃ７．??３．４?ＣＹ３轉(zhuǎn)染胰腺癌細胞的最佳轉(zhuǎn)染條件??胰腺癌細胞在ｌ〇ｎＭ，?２０ｎＭ，?３０ｎＭ，?５０ｎＭ，ｌＯＯｎＭ下梯度配制轉(zhuǎn)染Ｍｉｘ，??轉(zhuǎn)染２４小時后，用熒光顯微鏡觀察細胞情況，進行拍照，并做相關(guān)記錄分析。??最后確定最佳轉(zhuǎn)染條件，從結(jié)果可以看出，其２４小時轉(zhuǎn)染后，用熒光顯微鏡圖??片見圖２－４，于轉(zhuǎn)染前圖片對比分析，胰腺癌細胞轉(zhuǎn)染ＣＹ３最佳梯度為３０ｎＭ。??１０ｎｍ?２０ｎｍ?３０ｎｍ?５０ｎｍ?ｌＯＯｎｍ??■■■■■??圖２－４?ＣＹ３轉(zhuǎn)染胰腺癌細胞熒光顯微鏡圖片??Ｆｉｇｕｒｅ．２－４?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ?ｐｉｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＣＹ３?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ??３４??

示：成功轉(zhuǎn)染ｍｉＲＮＡ－５３９?ｍｉｍｉｃｓ?４８ｈ后人胰腺癌ＰＡＮＣ－１、ＢＸＰＣ－３細胞中??ｍｉＲＮＡ－５３９的表達水平明顯高于空白、陰性兩個對照組，統(tǒng)計學(xué)有顯著性差異??（Ｆ?＜０．０５）（圖２－５）；該結(jié)果表明：ｍｉＲＮＡ－５３９?ｍｉｍｉｃｓ已經(jīng)成功轉(zhuǎn)染入胰腺癌細??胞，可用于后續(xù)的細胞實驗研究。??＾３?Ｃｏｎｔｒｏｌ??■?ｍｉＲ－５３９?ＮＣ??ｒ－?Ｉ?Ｉ?ｍｉＲ－５３９?ｍｉｍｉｃｓ??〇?２５－??１￥）?＊＊＊??〇＞?２〇－?＊＊＊?ｊｒ??＆?ｒｈ?廣??＾?１５－?Ｉ?Ｉ??Ｓ？?｜??＾?１０－??Ｉ??＞?５－??｜?ｏ?ｒ＾Ｊ＿＿??ＰＡＮＣ－１?ＢｘＰＣ－３??圖２－５在轉(zhuǎn)染ｍｉＲ－５３９后，通過ＲＴ－ｑＰＣＲ證實胰腺癌細胞系ＰＡＮＣ－ｌ和ＢＸＰＣ－３中ｍｉＲ－５３９??的表達顯著升高。??Ｆｉｇｕｒｅ．２－５?Ｅｃｔｏｐｉｃ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－５３９?ｉｎ?ＰＣ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ?ＰＡＮＣ－１?ａｎｄ?ＢＸＰＣ－３?ｗｅｒｅ?ｅｖｉｄｅｎｃｅ??ｂｙ?ＲＴ－ｑＰＣＲ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－５３９．??３．６?ＭＴＴ增值實驗：ｍｉＲＮＡ－５３９過表達對人胰腺癌細胞株ＰＡＮＣ－１、ＢＸＰＣ－３??細胞増殖的影響。??３５??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Long term oncological outcome of laparoscopic techniques in pancreatic cancer[J]. Trond Buanes,Bj?rn Edwin.  World Journal of Gastrointestinal Endoscopy. 2018(12)
[2]Pancreatic cancer: A review of clinical diagnosis, epidemiology, treatment and outcomes[J]. Andrew McGuigan,Paul Kelly,Richard C Turkington,Claire Jones,Helen G Coleman,R Stephen McCain.  World Journal of Gastroenterology. 2018(43)
[3]Nano albumin bound-paclitaxel in pancreatic cancer: Current evidences and future directions[J]. Guido Giordano,Massimo Pancione,Nunzio Olivieri,Pietro Parcesepe,Marianna Velocci,Tania Di Raimo,Luigi Coppola,Giuseppe Toffoli,Mario Rosario D’Andrea.  World Journal of Gastroenterology. 2017(32)
[4]MicroRNA in pancreatic ductal adenocarcinoma and its precursor lesions[J]. Yasmin G Hernandez,Aimee L Lucas.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(01)



本文編號：3413749