肺癌是對人類生命健康威脅最大的惡性腫瘤之一。肺腺癌是最常見的肺癌類型,其特征在于腺樣結(jié)構(gòu)的形成和/或大量黏液的產(chǎn)生。大規(guī)模高通量測序已鑒定出肺腺癌的部分潛在驅(qū)動基因,并且測序數(shù)據(jù)顯示肺腺癌與其他肺癌亞型基因組間存在顯著差異。目前,幾種針對肺腺癌驅(qū)動基因的分子靶向藥物已投入臨床試驗以評估其功效。然而,針對驅(qū)動基因陰性病例的靶向治療仍進展緩慢。因此,迫切需要發(fā)現(xiàn)更多對肺腺癌早期診斷及預后有意義的新生物標記（癌基因/抑癌基因）,研究并闡明其作用機制以推動肺腺癌靶向治療的進一步發(fā)展。大量研究證實,轉(zhuǎn)錄因子PR domain containing 16（PRDM16）是調(diào)控棕色和米色脂肪分化過程的關(guān)鍵作用因子。然而,關(guān)于PRDM16在腫瘤生物學中的研究還十分有限。我們發(fā)現(xiàn)PRDM16在肺腺癌及肺鱗癌組織中均低表達,但其表達水平僅與肺腺癌患者預后相關(guān)。體內(nèi)及體外實驗結(jié)果顯示,PRDM16不影響肺腺癌細胞增殖,但可明顯抑制其侵襲轉(zhuǎn)移能力。進一步探究其作用機制發(fā)現(xiàn):PRDM16可通過抑制其靶基因粘蛋白-4（Mucin-4,MUC4）的轉(zhuǎn)錄進而抑制肺腺癌細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-to-m... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

PRDM16低表達與肺腺癌患者預后不良有關(guān)

18圖 4 體內(nèi)條件下，PRDM16 對肺腺癌細胞增殖和侵襲能力的影響。向裸鼠皮下注射穩(wěn)定表達EV 或 PRDM16（G418 篩選）H1299 細胞，兩組裸鼠成瘤體積（P＝0.27）及瘤體重量（P＝0.19）相近（a，b 和 c）；兩組裸鼠皮下腫瘤組織的 HE 染色（d）(圖 I 和 IV 放大倍數(shù): ×40；圖 II，III，V，和 VI 放大倍數(shù): ×200)；兩組裸鼠皮下腫瘤組織的免疫組化染色（e）(放大倍數(shù): ×200)；經(jīng)裸鼠靜脈注射穩(wěn)定表達 EV 或 PRDM16（G418 篩選）的 H1299/Calu-1 細胞，HE 染色檢測裸

20圖 5 PRDM16 作為 MUC4 的轉(zhuǎn)錄抑制因子發(fā)揮作用。PCR 驗證 ChIP-Seq 分析獲得的 PRDM16靶基因（a）；MUC4 在肺腺癌組織中的轉(zhuǎn)錄水平高于正常肺組織（b）；隨機選擇八例肺腺癌，蛋白電泳檢測癌組織及對應癌旁正常組織中 MUC4 的表達水平（c）；免疫組化染色檢測人肺腺癌組織（d，I-MUC4 和 II-PRDM16）或裸鼠皮下腫瘤組織中 MUC4 和 PRDM16 的表達情況（d，III-EV-MUC4 和 IV-PRDM16-MUC4）(放大倍數(shù): ×200)；MUC4 表達與肺腺癌患者總生存率的關(guān)系分析（e）；下調(diào)（f）或上調(diào)（g）PRDM16，蛋白電泳檢測細胞中 MUC4 的表達；雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測 PRDM16 對 MUC4 轉(zhuǎn)錄活性的影響（h 和 i）。


本文編號：3405832