巨噬細(xì)胞是一種多功能免疫細(xì)胞,在機(jī)體的特異性和非特異性免疫反應(yīng)中均發(fā)揮重要作用。除了吞噬異物、提呈抗原以及炎癥反應(yīng)等全身效應(yīng),巨噬細(xì)胞在局部組織的浸潤(rùn)情況與多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。尤其是腫瘤組織局部浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞,可通過(guò)調(diào)控腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移影響患者預(yù)后,但相關(guān)機(jī)制尚未明確。研究調(diào)控巨噬細(xì)胞的增殖、分化以及功能極化的分子機(jī)制,將有助于闡明其與腫瘤發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性,并為靶向腫瘤巨噬細(xì)胞相關(guān)的腫瘤免疫治療提供新靶點(diǎn)。RIOK3（RIO Kinase 3）是一種非典型絲蘇氨酸蛋白激酶,與RIOK1、RIOK2一起同屬于RIO（right open reading frame）家族的一員。有研究表明,RIOK3與Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生、NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、Hedgehog信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路以及Akt/mTOR通路的活化有關(guān),并參與調(diào)控細(xì)胞免疫功能和細(xì)胞增殖。mRNA表達(dá)譜分析結(jié)果表明RIOK3在髓系細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá),提示該蛋白可能參與了巨噬細(xì)胞的相關(guān)功能。利用我們已經(jīng)建立的巨噬細(xì)胞RIOK3特異性敲除小鼠（LysM Cre RIOK3 LoxP/LoxP,以下簡(jiǎn)寫為RIOK3-/-）、惡性黑色素瘤原... 

【文章來(lái)源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２巨噬細(xì)胞增殖相關(guān)基因表達(dá)

正文第一部分結(jié)果??對(duì)照組密集，用ＩｍａｇｅＪ計(jì)數(shù)細(xì)胞提示單位面積內(nèi)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞所占總面積的比例高??于對(duì)照組（圖１．３?Ａ－Ｂ）。??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＲＪＯＫ３７－??ＣｅＵ＿ｔｅｒｑ＿－Ｕｏｎ?鱗．濟(jì)＇興：??Ｉ］?＊??ｆａ?■＿??＾?瞧曬??ｉ?－〇－?ｉｒｉ：ｘｒ??ｒ?＾?＿雜．，趕纖＿｜｜??乂?＃?＃?＃??圖１．３細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)。Ａ．ＩｍａｇｅＪ定量Ｂ中紫色染色的細(xì)胞面積占比（ｎ?＝?６）；?Ｂ．與??ＣＣＫ８結(jié)果對(duì)應(yīng)的光鏡下結(jié)晶紫染色細(xì)胞分布（４０Ｘ）；Ｃ．巨噬細(xì)胞在Ｍ－ＣＳＦ?１０ｎｇ／??ｍｌ?體外培養(yǎng)?７?天中?ＣＣＫ８?吸光度值（ｎ?＝?６，?＊?ｐ＜０＿０５，?＊＊?ｐ＜０．０１，＊＊＊?ｐ＜０．００１）??隨后為了進(jìn)一步了解巨噬細(xì)胞在體外培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞分裂的情況，采用ＣＦＳＥ??染色提取后的骨髓細(xì)胞，記錄時(shí)間為ＤａｙＯ，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)Ｄａｙｌ、３、５、７時(shí)??４８８ｍｎ激發(fā)光下發(fā)射的信號(hào)。結(jié)果提示，敲除ＲＩＯＫ３的巨噬細(xì)胞其發(fā)生分裂的比??例與平均每個(gè)細(xì)胞分裂的次數(shù)均高于對(duì)照組（圖１．４），在Ｄａｙ３時(shí)ＲＩＯＫ３－／－組的細(xì)??胞幾乎都已分裂（ｍｅａｎＤｉｖｓｉｏｎｒａｔｅ?＝?９８．４３％），且每個(gè)細(xì)胞平均分裂達(dá)１．４６次（ｍｅａｎ??２８??

用流式細(xì)胞儀檢測(cè)信號(hào)結(jié)果提示ＲＩ〇Ｋ３＾組Ｄａｙ４、５、６、７培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞處于??Ｇ０／Ｇ１期的細(xì)胞均低于對(duì)照組，相對(duì)的Ｓ期和Ｇ２期細(xì)胞比例總和則高于對(duì)照組??（圖１．５），說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組處于活躍分裂的細(xì)胞比例要高于對(duì)照組。Ｄａｙ５的細(xì)胞處于活??２９??


本文編號(hào)：3402540