本文關(guān)鍵詞：神經(jīng)源性炎癥在變應(yīng)性鼻結(jié)膜炎發(fā)病中的作用機制探討，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：變態(tài)反應(yīng)性鼻結(jié)膜炎是常見的臨床病癥,變應(yīng)性鼻炎伴發(fā)眼部癥狀的情況非常普遍。但國內(nèi)尚缺乏確切的流行病學(xué)數(shù)據(jù)。其發(fā)病除了經(jīng)典的免疫學(xué)機制外,國外學(xué)者認為鼻-鼻,鼻-眼之間還存在神經(jīng)反射作用機制,但目前尚不清楚該反射機制的作用方式。本課題期望通過對太原地區(qū)變應(yīng)性鼻炎患者問卷調(diào)查及相應(yīng)實驗室檢查以了解太原地區(qū)變應(yīng)性鼻炎患者合并變應(yīng)性結(jié)膜炎的情況,計算太原地區(qū)變應(yīng)性鼻炎患者中變應(yīng)性結(jié)膜炎的發(fā)生率,并分析變應(yīng)性鼻炎與變應(yīng)性結(jié)膜炎在臨床表現(xiàn)方面的相關(guān)性,同時經(jīng)過動物實驗探討神經(jīng)因素在同時性變應(yīng)性鼻炎-結(jié)膜炎發(fā)病中的作用機制,以期為探索此類疾病的治療提供新的視角。方法：一：臨床流行病學(xué)調(diào)查問卷調(diào)查太原地區(qū)變應(yīng)性鼻炎的患者80例,男38例,女42例,男女之比為0.9：1。變應(yīng)性鼻炎的診斷標準參照2009年“武夷山會議”的修訂標準,并結(jié)合實際情況制定調(diào)查問卷,設(shè)定評分標準,鼻部出現(xiàn)以下癥狀如鼻塞、流涕、打噴嚏、鼻癢、鼻后滴漏、鼻出血時,每種癥狀按照輕、中、重分別記為1-3分,最多18分；眼部出現(xiàn)流淚、眼瞼紅腫、球結(jié)膜充血、眶周水腫等癥狀時,每種癥狀分別按輕、中、重記為1-3分,最多12分。調(diào)查此80例變應(yīng)性鼻炎患者,詳細了解其臨床表現(xiàn),建立相應(yīng)的個人數(shù)據(jù)庫檔案。所有調(diào)查結(jié)果經(jīng)SPSS 17.0統(tǒng)計軟件分析處理。二：動物實驗1.鼻-鼻反射及神經(jīng)源性炎癥：40只雄性豚鼠隨機分為5組,對照組/1組(一側(cè)鼻腔滴注生理鹽水50u1)、組胺組/2組(一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50u1)、阿托品處理組/3組(頸動脈給予阿托品lmg/kg 30 min后一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50u1)、阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾處理組/4組(頸動脈給予阿托品lmg/kg/、酚妥拉明lmg /k、艾司洛爾1mg/kg30 min后一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50u1)、阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾+D-SP處理組/5組(頸動脈給予阿托品1mg/kg、酚妥拉明1mg/kg、艾司洛爾1mg/kg、D-SP 1×10-6 mol/1 1ul/kg 30 min后一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50u1)。分別進行以下處置：(1)一側(cè)鼻腔滴注生理鹽水或0.2%組胺50u1前30min,頸動脈注射3%伊文氏藍30mg/kg,30 min后進行心臟灌洗,處死動物后觀察雙側(cè)鼻黏膜微血管通透性的變化。(2)實驗動物按分組進行相應(yīng)處理后處死,取雙側(cè)鼻黏膜-80℃低溫保存,分別用HE染色觀察鼻黏膜組織中嗜酸性粒細胞形態(tài)學(xué)變化,Elisa法測定鼻黏膜組織中ECP含量,PCR法測定鼻黏膜組織中MBP1的表達來評定嗜酸性粒細胞功能的變化。甲苯胺藍染色觀察鼻黏膜組織中肥大細胞形態(tài)學(xué)變化,Elisa法測定鼻黏膜組織中TNF-α含量,PCR法測定鼻黏膜組織中Tryptase的表達來評定肥大細胞功能的變化。免疫熒光染色觀察鼻黏膜組織中SP形態(tài)學(xué)變化,Elisa法測定鼻黏膜組織中SP含量,PCR法測定鼻黏膜組織中SP的表達來評定SP功能的變化,結(jié)果應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析。2.鼻-眼反射及神經(jīng)源性炎癥：40只雄性豚鼠隨機分為5組,對照組/1組(一側(cè)鼻腔滴注生理鹽水50u1)、組胺組/2組(一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50u1)、阿托品處理組/3組(頸動脈給予阿托品1mg/kg 30 min后一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50u1)、阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾處理組/4組(頸動脈給予阿托品1mg/kg、酚妥拉明1mg /kg、艾司洛爾1mg/kg 30 min后一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50u1)、阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾+D-SP組/5組(頸動脈給予阿托品1mg/kg、酚妥拉明1mg/kg、艾司洛爾1mg/kg、D-SP 1×10-6 mol/ul/kg 30 min后一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50u1),分別進行處置：(1)一側(cè)鼻腔滴注生理鹽水或組胺前30min,頸動脈注射3%伊文氏藍30mg/kg,30 min后進行心臟灌洗,處死動物后觀察滴鼻側(cè)鼻黏膜、眼結(jié)膜組織微血管通透性的變化。(2)實驗動物按分組進行相應(yīng)處理后處死,取滴鼻側(cè)鼻黏膜、眼結(jié)膜組織-80℃低溫保存,分別用HE染色觀察鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中嗜酸性粒細胞形態(tài)學(xué)變化,Elisa法測定鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中ECP含量,PCR法測定鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中MBP1的表達來評定嗜酸性粒細胞功能的變化。甲苯胺藍染色觀察鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中肥大細胞形態(tài)學(xué)變化,Elisa法測定鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中TNF-α含量,PCR法測定鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中Tryptase的表達來評定肥大細胞功能的變化。免疫熒光染色觀察鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中SP形態(tài)學(xué)變化,Elisa法測定鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中SP含量,PCR法測定鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中SP的表達來評定SP功能的變化,結(jié)果應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析。結(jié)果：：臨床流行病學(xué)調(diào)查80例變應(yīng)性鼻炎患者中,66例(82.5%,66/80)并發(fā)變應(yīng)性結(jié)膜炎,發(fā)病年齡為11～64歲,平均(29.7±13.8)歲。男24例,女42例,男女之比為0.57：1。變應(yīng)性鼻炎和變應(yīng)性結(jié)膜炎患者發(fā)病年齡(p=0.11)及病程(p=0.43)間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。66例患者中,輕度變應(yīng)性鼻炎29例,中度29例,重度8例；變應(yīng)性結(jié)膜炎輕度44例,中度14例,重度8例。變應(yīng)性鼻炎與變應(yīng)性結(jié)膜炎病情嚴重程度密切相關(guān)(rs=0.75,p0.001)。二：動物實驗1鼻-鼻反射及神經(jīng)源性炎癥1)鼻黏膜血管通透性的變化：(1)一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50ul 30min后,同側(cè)鼻黏膜(91.90±28.98μg/ml)、對側(cè)鼻黏膜(69.94±9.77μg/ml)組織中Evans blue濃度明顯增大,與對照組(15.55±6.67μg/ml)、(16.18±5.29μg/ml)相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=-9.87,P0.01)、(t=-20.51,P0.01);(2)阿托品預(yù)處理后,同側(cè)鼻黏膜(70.76±12.44μg/ml)、對側(cè)鼻黏膜(38.73±6.24μg/ml)組織中Evans blue濃度降低,與組胺滴鼻組存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=2.61,P0.05)、(t=10.87,P0.01)；③阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾+D-SP預(yù)處理后,同側(cè)鼻黏膜(45.67±8.15μg/ml)、對側(cè)鼻黏膜(20.59±5.95μg/ml)組織中Evans blue濃度進一步降低,與阿托品預(yù)處理組相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=6.79,P0.01)、(t=8.33,P0.01)。2) Elisa法測定雙側(cè)鼻黏膜組織中SP、TNF-α、ECP含量：(1)各組雙側(cè)鼻黏膜組織中ECP、TNF-α含量未見明顯變化,兩兩比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(2)組胺滴鼻組,同側(cè)鼻黏膜組織SP含量(628.15±12.77pg/ml)、對側(cè)鼻黏膜SP含量(602.79±15.63pg/ml)增大,與對照組(518.36±11.57pg/ml), (516.23±10.36pg/ml)相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=-28.03,P0.01)、(t=18.63,P0.01)；阿托品預(yù)處理組,同側(cè)鼻黏膜(593.11±13.89pg/ml)、對側(cè)鼻黏膜(539.48±14.83pg/ml組織中SP含量降低,與組胺滴鼻組存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=6.36,P0.01)、(t=12.98,P0.01)；阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾+D-SP預(yù)處理組,同側(cè)鼻黏膜組織中SP含量(592.34±16.55pg/ml)與阿托品預(yù)處理組相比無明顯變化(t=0.16,P=0.88),對側(cè)鼻黏膜SP含量(519.26±14.29pg/ml)進一步降低,與阿托品預(yù)處理組相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=4.25,P0.01)。3)免疫組化觀察：組胺滴鼻后30min,雙側(cè)鼻黏膜出現(xiàn)不同程度鼻黏膜上皮層充血、水腫、部分纖毛融合、倒伏,基底膜增厚、水腫、破壞,固有層充血、水腫,血管擴張。阿托品、D-SP對鼻黏膜上皮層充血、水腫有抑制作用。在觀察時限內(nèi)(側(cè)鼻腔組胺或生理鹽水滴鼻后30min),1、2、3、4、5組雙側(cè)鼻黏膜均可見少許嗜酸性粒細胞,各組嗜酸性粒細胞數(shù)量及形態(tài)未見明顯變化；且各干預(yù)組雙側(cè)鼻黏膜組織中肥大細胞數(shù)量及形態(tài)無明顯變化。免疫熒光觀察組胺滴鼻后30min,雙側(cè)鼻黏膜組織中SP顆粒明顯增多；阿托品、D-SP預(yù)處理后對側(cè)鼻黏膜組織中SP顆粒明顯減少。4)PCR法測定各組雙側(cè)鼻黏膜組織中SP、Tryptase、MBP1的表達：(1)各組雙側(cè)鼻黏膜組織中MBP1及Tryptase表達兩兩比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(2)組胺滴鼻組,同側(cè)鼻黏膜組織SP表達(1.89±0.03)、對側(cè)鼻黏膜組織SP表達(1.76±0.10)增高,與對照組(1.05±0.07)、(1.01±±0.03)相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=-40.39,P0.01),(t=-26.28,P0.01)；阿托品預(yù)處理組,同側(cè)鼻黏膜組織SP表達(1.65±0.14)、對側(cè)鼻黏膜組織SP表達(1.38±±0.05)降低,與組胺滴鼻組存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=7.40,P0.01),(t=±12.26,P0.01)；阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾+D-SP預(yù)處理組,同側(cè)鼻黏膜組織SP表達(1.66±0.10)與阿托品預(yù)處理組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(t=-0.24,P=0.51)、對側(cè)鼻黏膜組織SP表達(1.19±±0.05),與阿托品預(yù)處理組相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=10.11,P0.01)。2鼻-眼反射及神經(jīng)源性炎癥1)鼻黏膜、眼結(jié)膜血管通透性的變化：(1)一側(cè)鼻腔滴注0.2%組胺50ul 30min后,同側(cè)鼻黏膜組織(91.90±28.98μg/ml)、同側(cè)結(jié)膜組織(28.94±11.35μg/ml) Evans blue濃度明顯增大,與對照組(15.55±6.67μg/ml)、(13.78±3.91μg/ml)相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=-9.87,P0.01)(t=-21.66,P0.01)；(2)阿托品預(yù)處理后,同側(cè)鼻黏膜組織(70.76±12.44μg/ml)\同側(cè)眼結(jié)膜組織(19.68±9.51μg/ml) Evans blue濃度降低,與組胺滴鼻組存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=±2.61,P0.05)(t±±11.97,P0.01)；(3)阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾+D-SP預(yù)處理后,同側(cè)鼻黏膜組織(45.67±8.15μg/ml)、同側(cè)眼結(jié)膜組織(14.65±8.92μg/ml) Evans blue濃度進一步降低,與阿托品預(yù)處理組相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(t=6.79,P0.01)(t=10.51, P0.01)。2)Elisa法測定鼻黏膜、結(jié)膜組織中SP、TNF-α、ECP含量：(1)各組同側(cè)鼻黏膜、眼結(jié)膜組織中ECP及TNF-α含量未見明顯變化,兩兩比較未見統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(2)組胺滴鼻組,同側(cè)鼻黏膜組織SP含量(628.15±12.77pg/ml)、同側(cè)結(jié)膜組織SP含量(568.98±11.59pg/ml)增大,與對照組(518.36±11.57pg/ml), (511.23±14.36pg/ml)相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)；阿托品預(yù)處理組,同側(cè)鼻黏膜組織SP含量(593.11±13.89pg/ml)、同側(cè)結(jié)膜組織SP含量(542.87±12.43pg/ml)降低,與組胺滴鼻組存在統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)；阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾+D-SP預(yù)處理組,同側(cè)結(jié)膜組織SP含量(527.61±11.39pg/ml)進一步降低,與阿托品預(yù)處理組相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。3)免疫組化觀察：組胺滴鼻后30min,同側(cè)鼻黏膜出現(xiàn)黏膜上皮層充血、水腫、部分纖毛融合、倒伏,基底膜增厚、水腫、破壞,固有層充血、水腫,血管擴張。同側(cè)結(jié)膜上皮細胞脹大,胞漿變淡,核漿比例增大,固有層水腫。阿托品、D-SP對鼻黏膜、結(jié)膜上皮層充血、水腫有抑制作用。在觀察時限內(nèi)(一側(cè)鼻腔組胺或生理鹽水滴鼻后30min),各組同側(cè)鼻黏膜均可見少許嗜酸性粒細胞,各組嗜酸性粒細胞數(shù)量及形態(tài)未見明顯變化；且各干預(yù)組同側(cè)鼻黏膜肥大細胞數(shù)量及形態(tài)無明顯變化。各組結(jié)膜未見明顯嗜酸性粒細胞聚集,僅在組胺滴鼻組觀察到少數(shù)肥大細胞脫顆粒。免疫熒光觀察組胺滴鼻后30min,同側(cè)鼻黏膜、結(jié)膜組織中SP顆粒明顯增多；阿托品、D-SP預(yù)處理后同側(cè)結(jié)膜組織中SP顆粒明顯減少。4)PCR法測定各組同側(cè)鼻黏膜、球結(jié)膜組織中SP、Tryptase、MBP1的表達：(1)各組同側(cè)鼻黏膜、同側(cè)結(jié)膜組織MBP1及Tryptase表達未見明顯變化,兩兩比較未見統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(2)組胺滴鼻組,同側(cè)鼻黏膜(1.89±0.03)、同側(cè)結(jié)膜SP表達(1.61±0.09)增高,與對照組(1.05±0.07)、(1.00±0.04)相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)；阿托品預(yù)處理組,同側(cè)鼻黏膜(1.65±0.14)、同側(cè)結(jié)膜(1.36±0.03)SP表達降低,與組胺滴鼻組存在統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)；阿托品+酚妥拉明+艾司洛爾+D-SP預(yù)處理組,同側(cè)鼻黏膜(1.66±0.10)與阿托品預(yù)處理組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(t=-0.24,P=0.51)、同側(cè)眼結(jié)膜(1.18±0.05)SP表達進一步降低,與阿托品預(yù)處理組相比存在統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論：1太原地區(qū)變應(yīng)性鼻炎合并變應(yīng)性結(jié)膜炎的發(fā)生率較高,兩者臨床表現(xiàn)相關(guān),分級具有高度一致性。2變應(yīng)性鼻結(jié)膜炎中,鼻-鼻,鼻-眼之間可通過神經(jīng)反射相互影響。3鼻-鼻、鼻-眼之間神經(jīng)通路具有膽堿能及肽能神經(jīng)雙重性質(zhì)。4該鼻-鼻、鼻-眼反射可能是變態(tài)反應(yīng)性鼻結(jié)膜炎發(fā)病的重要機制。
【關(guān)鍵詞】：變應(yīng)性鼻結(jié)膜炎 組胺 膽堿能神經(jīng) 非膽堿能非腎上腺素能神經(jīng) P物質(zhì)
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R765.21
【目錄】：

• 摘要6-12
• Abstract12-16
• 常用縮寫詞中英文對照表16-17
• 前言17-20
• 第一部分 變應(yīng)性鼻炎合并變應(yīng)性結(jié)膜炎的流行病學(xué)調(diào)查及相關(guān)性分析20-24
• 1 對象和方法20-22
• 1.1 研究對象20
• 1.2 統(tǒng)計方法20-22
• 2 結(jié)果22-23
• 3 討論23-24
• 第二部分 鼻-鼻反射及神經(jīng)源性炎癥24-55
• 1 材料和方法24-36
• 1.1 實驗對象24
• 1.2 主要儀器24-25
• 1.3 主要試劑25
• 1.4 藥品及試劑配制25-26
• 1.5 實驗方法26-36
• 2 結(jié)果36-50
• 2.1 豚鼠雙側(cè)鼻黏膜血管通透性的變化36-37
• 2.2 豚鼠雙側(cè)鼻黏膜的光鏡觀察37-41
• 2.3 熒光顯微鏡鏡觀察豚鼠雙側(cè)鼻黏膜SP表達41-43
• 2.4 各組雙側(cè)鼻黏膜組織炎性因子濃度測定43-46
• 2.5 各組雙側(cè)鼻黏膜組織中炎性因子的表達46-50
• 3 討論50-54
• 3.1 膽堿能神經(jīng)纖維51
• 3.2 腎上腺素能神經(jīng)51-52
• 3.3 NANC神經(jīng)52
• 3.4 肥大細胞的影響52-53
• 3.5 嗜酸性粒細胞的影響53
• 3.6 解剖結(jié)構(gòu)的影響53-54
• 4 結(jié)論54-55
• 第三部分 鼻-眼反射及神經(jīng)源性炎癥55-87
• 1 材料和方法56-67
• 1.1 實驗對象56
• 1.2 主要儀器56
• 1.3 主要試劑56-57
• 1.4 藥品及試劑配制57-58
• 1.5 實驗方法58-67
• 2 結(jié)果67-81
• 2.1 豚鼠滴鼻側(cè)鼻黏膜、眼結(jié)膜血管通透性的變化67-68
• 2.2 豚鼠滴鼻側(cè)鼻黏膜、眼結(jié)膜的光鏡觀察68-72
• 2.3 組胺滴鼻側(cè)鼻黏膜熒光顯微鏡觀察SP 表達72-74
• 2.4 組胺滴鼻側(cè)鼻黏膜、眼結(jié)膜組織炎性因子濃度測定74-77
• 2.5 組胺滴鼻側(cè)鼻黏膜、眼結(jié)膜組織炎性因子表達77-81
• 3 討論81-86
• 3.1 組胺的作用81-82
• 3.2 神經(jīng)因素的作用82-84
• 3.3 炎性細胞的影響84-86
• 4 結(jié)論86-87
• 參考文獻87-94
• 全文總結(jié)94-96
• 綜述96-109
• 參考文獻103-109
• 致謝109-110
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果110-111
• 個人簡歷111

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 趙長青,陶正德,肖健云,趙素萍,喬健天;Histochemical and immunohistochemical studies of distribution of acetylcholinesterase-positive fibers and peptidergic terminals in the nasal mucosa of rats[J];Chinese Medical Journal;1998年07期

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本文編號：320189