本文關(guān)鍵詞：NOD2對(duì)潘氏細(xì)胞系抗菌肽和白介素-23pl9表達(dá)的調(diào)節(jié)作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景和目的克羅恩病(Crohn's disease, CD)是炎癥性腸病(inflammatory bowel disease, IBD)的一種主要類型,是一種病因不明的慢性肉芽腫性炎癥性疾病。CD好發(fā)于回腸末端,空腸和上消化道少見(jiàn),研究顯示多達(dá)75%的CD病人有回腸末端炎癥�；啬c末端有兩個(gè)明顯的相關(guān)特征,即小腸在此部位的潘氏細(xì)胞數(shù)量和細(xì)菌濃度都是最高的,而且從近端小腸至遠(yuǎn)端小腸潘氏細(xì)胞數(shù)量和細(xì)菌濃度會(huì)越來(lái)越多。這些特征表明CD的發(fā)病同潘氏細(xì)胞和腸道菌群之間有著密不可分的關(guān)系。潘氏細(xì)胞在腸黏膜的固有免疫中起到了非常重要的作用,它不但同吸收腸上皮細(xì)胞、杯狀細(xì)胞和腸內(nèi)分泌細(xì)胞組成阻止腸道微生物入侵的防御性物理屏障,而且還通過(guò)分泌抗菌肽來(lái)維持腸道微生物和其宿主之間的腸道內(nèi)穩(wěn)態(tài)的平衡。關(guān)于CD的發(fā)病機(jī)制,主要觀點(diǎn)認(rèn)為減少的人類腸道抗菌肽不能有效清除腸道內(nèi)微生物而導(dǎo)致腸道微生物同宿主之間的腸道內(nèi)穩(wěn)態(tài)紊亂,而這種紊亂的腸道內(nèi)環(huán)境最終啟動(dòng)和維持了CD中的異常獲得性免疫反應(yīng)。人類腸道抗菌肽主要由腸道α-防御素及少量的溶菌酶(lysozyme)和分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2, sPLA2)組成。它們不僅對(duì)G-菌和G+菌有抗菌活性功能,而且對(duì)病毒、真菌和寄生蟲也有一定的抗活性功能。人類腸道α-防御素有兩種,即人類α-防御素5和6(human a-defensin 5和6,HD-5和HD-6),它們不但是人類腸道抗菌肽的主要組成成分,而且許多實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)它們?cè)谀c道的固有免疫中起到了非常重要的作用。例如,轉(zhuǎn)基因小鼠在促腸道α-防御素成熟的酶缺失后,它們不但容易被鼠傷寒沙門氏菌感染,而且它們的腸道微生物組成也會(huì)發(fā)生明顯的改變,而HD5轉(zhuǎn)基因小鼠則能增強(qiáng)他們的抗鼠傷寒沙門氏菌感染能力和有顯著的腸內(nèi)節(jié)絲狀菌的缺失,而HD6轉(zhuǎn)基因小鼠則能保護(hù)他們免受許多腸道病原菌的黏附侵入。白介素-23(Interleukin-23,IL-23)是一種由IL-23p19和IL-12p40組成的異二聚體類細(xì)胞因子。目前認(rèn)為IL-23p19是IL-23特異的的組成亞單位,而IL-12p40還是IL-12的組成亞單位。在IL-23被認(rèn)識(shí)之前,IL-12常被認(rèn)為是腸道炎癥反應(yīng)中至關(guān)重要的細(xì)胞因子。但是近年來(lái)許多研究表明IL-23才是在腸道炎癥反應(yīng)中起著至關(guān)重要作用的細(xì)胞因子,例如,利用IL-23敲除小鼠進(jìn)行的研究表明引起腸道內(nèi)炎癥因子聯(lián)級(jí)反應(yīng)的重要細(xì)胞因子是IL-23而不是IL-12,這類炎癥因子主要包括IL-17、TNFα、IFNy和IL-6等；利用IBD病人腸道黏膜組織進(jìn)行的研究表明IL-23通過(guò)啟動(dòng)兩條重要的促炎通路參與IBD的發(fā)病,它們就是CD中的IL-23/Thl通路和UC中的IL-23/Th1 7通路；利用轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行的研究表明IL-23p19過(guò)表達(dá)會(huì)導(dǎo)致包括腸道在內(nèi)的多器官的炎癥發(fā)生；利用封閉性抗IL-23p19的單克隆抗體進(jìn)行的研究表明封閉處理IL-23p19蛋白能顯著改善小鼠因IL-10缺失引起的自發(fā)性腸炎和菌感染引起的Thl7細(xì)胞介導(dǎo)的結(jié)腸炎。這些研究表明在腸道炎癥反應(yīng)中IL-23p19起到了至關(guān)重要的作用。NOD2是第一個(gè)被認(rèn)識(shí)的CD易感基因,研究表明在西方人群中超過(guò)50%的CD病人有NOD2突變體的存在。有研究表明在生理?xiàng)l件下潘氏細(xì)胞表達(dá)一定量的NOD2,而在CD這種病理?xiàng)l件下潘氏細(xì)胞過(guò)表達(dá)NOD2。也有研究表明這類細(xì)胞的IL-23p19基因表達(dá)也存在類似情況,即在生理?xiàng)l件下適度表達(dá)而在CD病理?xiàng)l件下過(guò)表達(dá)。目前還不清楚IL-23p19基因的這種類似的表達(dá)現(xiàn)象是否由于NOD2的表達(dá)異常而造成的。另有研究表明健康人回腸末段有一定量的抗菌肽表達(dá),而在CD病人回腸末段抗菌肽的表達(dá)量減少,特別是α-防御素的表達(dá)量減少更明顯,在NOD2有突變的CD病人中,此部位的α-防御素的表達(dá)量則進(jìn)一步減少。盡管這些研究結(jié)果提示NOD2可能同人類腸道抗菌肽的表達(dá)有某種關(guān)系,但是目前人們對(duì)NOD2在人類腸道抗菌肽表達(dá)中具體作用的認(rèn)知還非常有限。因?yàn)榕耸霞?xì)胞在體外培養(yǎng)條件下不能存活,所以體外實(shí)驗(yàn)探討潘氏細(xì)胞內(nèi)NOD2功能時(shí)就有必要找到一種合適的替代細(xì)胞系。有研究顯示Caco2腸上皮細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)有向小腸上皮分化的功能,這些研究表明這類細(xì)胞似乎有潛在的腸干細(xì)胞的功能。此外,這類細(xì)胞還表達(dá)豐富的纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(fibroblast growth factor receptor-3,FGFR-3),已證實(shí)在腸道發(fā)展過(guò)程中這種受體對(duì)潘氏細(xì)胞的分化起到了關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。更重要的是這類細(xì)胞還能表達(dá)一定量的NOD2。因此,它是一種比較合適的可替代潘氏細(xì)胞進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)探討NOD2功能的細(xì)胞�；谝陨系难芯勘尘�,本研究有以下目的：1、活化FGFR-3介導(dǎo)的信號(hào)能否體外誘導(dǎo)Caco2細(xì)胞向潘氏細(xì)胞系分化。2、在潘氏細(xì)胞系分化過(guò)程中NOD2是否調(diào)節(jié)人類腸道抗菌肽的表達(dá)。3、研究NOD2調(diào)節(jié)腸道α-防御素表達(dá)的作用及機(jī)制。4、研究NOD2調(diào)節(jié)IL-23p19表達(dá)的作用及機(jī)制。方法1、用傳代在15-30之間處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Caco2細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。為了更好地模擬腸上皮細(xì)胞在體內(nèi)腸道的空間位置條件,我們把Caco2細(xì)胞種植在置于六孔板內(nèi)的懸掛式培養(yǎng)小室的PET膜上(3 μm pore size),這種膜允許培養(yǎng)基自由通過(guò)而進(jìn)入膜的上下兩邊,而不允許細(xì)胞通過(guò)。2、為研究體外誘導(dǎo)Caco2細(xì)胞是否向潘氏細(xì)胞系分化,我們用10 ng/ml纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(fibroblast growth factor 9, FGF9)刺激Caco2細(xì)胞,FGF9是一種最有親和力的FGFR-3配體。每24 h換一次刺激液體,連續(xù)刺激72 h后終止刺激并收集細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SI和APOA1這兩種吸收腸上皮細(xì)胞分化特異基因的mRNA表達(dá)量和HD5、HD6、lysozyme和sPLA2這四種潘氏細(xì)胞分化特異基因的mRNA表達(dá)量。3、為研究NOD2是否調(diào)節(jié)人類腸道抗菌肽的表達(dá),我們用10μg/ml胞壁酰二肽(muramyl dipeptide, MDP)刺激Caco2細(xì)胞,MDP是NOD2的配體；用10 ng/ml FGF9刺激Caco2細(xì)胞；用10 μg/ml MDP+10 ng/ml FGF9刺激Caco2細(xì)胞,每24 h換一次相同的刺激液體,連續(xù)刺激72 h后終止刺激并收集細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HD5、HD6、lysozyme和sPLA2這四種潘氏細(xì)胞分化特異基因,也是人類腸道抗菌肽基因的mRNA表達(dá)量。為進(jìn)一步從反面證實(shí)NOD2在調(diào)節(jié)人類腸道抗菌肽表達(dá)中的作用,我們先向Caco2細(xì)胞轉(zhuǎn)染NOD2-siRNA以敲低細(xì)胞內(nèi)的NOD2蛋白,再分別用10 μg/ml MDP、10 ng/mlFGF9和10 μg/ml MDP+10 ng/ml FGF9刺激完成轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,每24 h換液一次,連續(xù)刺激72 h終止并收集細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HD5、HD6、 lysozyme和sPLA2的mRNA表達(dá)量和進(jìn)行Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HD5和HD6的蛋白表達(dá)量。4、為研究誘導(dǎo)分化過(guò)程中NOD2的表達(dá)是否受到影響,我們用10 ng/mlFGF9刺激Caco2細(xì)胞,每24 h換一次刺激液體,分別于刺激24 h、48 h和72h后終止刺激并收集細(xì)胞進(jìn)行Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)NOD2的蛋白表達(dá)量。5、為研究誘導(dǎo)人類腸道α-防御素表達(dá)過(guò)程中可能參與的信號(hào)通路,我們分別用10 μg/ml MDP和10 ng/ml FGF9刺激Caco2細(xì)胞,每24 h換一次相同的刺激液體,連續(xù)刺激72 h終止刺激。而在最后一次24 h刺激前,我們先用5μM、10μM和50μM三種濃度的信號(hào)通路抑制劑,即NF-κB通路抑制劑BAY117082、PI3K通路抑制劑LY294002、MAPK信號(hào)通路的p38抑制劑SB203580、ERK1/2抑制劑U0126和JNK抑制劑SP600125處理細(xì)胞30 min,接著再用10 μg/ml MDP或10 ng/ml FGF9刺激細(xì)胞24 h后終止刺激并收集細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HD5和HD6的mRNA表達(dá)量。6、為研究主導(dǎo)人類腸道抗菌肽表達(dá)的信號(hào)通路的活化情況,我們用10ng/ml FGF9刺激Caco2細(xì)胞,分別于刺激10 min、30 min、60 min和120 min后收集細(xì)胞進(jìn)行Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)主導(dǎo)信號(hào)通路蛋白的磷酸化情況。7、為研究NF-κB通路哪種轉(zhuǎn)錄因子傳到胞漿MDP-NOD2信號(hào)進(jìn)胞核,我們用10 μg/ml MDP刺激Caco2細(xì)胞,分別于刺激2h、4h和6 h后終止刺激并收集細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活化量的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。8、為得到類潘氏細(xì)胞,我們用10 ng/ml FGF9連續(xù)刺激Caco2細(xì)胞72 h,每24 h換一次刺激液體。這樣處理得到的細(xì)胞用作類潘氏細(xì)胞,我們用這種類潘氏細(xì)胞來(lái)體外研究NOD2調(diào)節(jié)IL-23p19表達(dá)的作用及機(jī)制。9、為研究哪種腸道微生物成分誘導(dǎo)IL-23p19的表達(dá),我們用各種工作濃度的TLRs配體,即10 μg/ml PGN、1 μg/ml Pam3CSK4,10 μg/ml Poly (I:C)、 10 μg/ml LPS,1μg/ml Flagellin,1μg/ml FSL-1、1μg/ml Imiquimod,1μg/ml ssRNA40和1μM MODN2006來(lái)刺激類潘氏細(xì)胞,分別于刺激4h、8h和16h后終止刺激并收集細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IL-23p19 mRNA的表達(dá)量。10、為研究NOD2是否調(diào)節(jié)TLR2介導(dǎo)的IL-23p19的表達(dá),我們分別用10μg/ml MDP、10 μg/ml PGN、10μg/ml PGN+10 μg/ml MDP、1μg/ml Pam3CSK4和1 μg/ml Pam3CSK4+10μg/ml MDP刺激類潘氏細(xì)胞,于刺激4h后終止刺激并收集細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IL-23p19 mRNA的表達(dá)量。為了進(jìn)一步從反面證實(shí)NOD2在調(diào)節(jié)TLR2介導(dǎo)的IL-23p19的表達(dá)中的作用,我們先用NOD2-siRNA敲低細(xì)胞內(nèi)的NOD2蛋白,再用10 μg/ml PGN、1 μg/ml Pam3CSK4和1 μg/ml Pam3CSK4+10 μg/ml MDP分別刺激4h后收集細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IL-23p19 mRNA的表達(dá)量,在PGN刺激4h后還收集細(xì)胞進(jìn)行Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IL-23p19蛋白的表達(dá)量。11、為了研究TLR2介導(dǎo)的IL-23p19表達(dá)主要涉及到哪些信號(hào)通路,我們先用五種工作濃度的信號(hào)通路抑制劑,即50 μM BAY117082 (NF-κB),50 μM LY294002 (PI3K),50μM SB203580 (p38),50 μM U0126 (ERK1/2), and 50μMSP600125 (JNK)預(yù)處理類潘氏細(xì)胞30 min,再用10μg/ml PGN刺激細(xì)胞4h后終止刺激并收集細(xì)胞進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IL-23p19 mRNA的表達(dá)量。12、為研究主導(dǎo)IL-23p19表達(dá)的信號(hào)通路之活化情況,我們用10 μg/mlPGN刺激類潘氏細(xì)胞,分別于刺激5 min、10 min、30 min和60 min后收集細(xì)胞進(jìn)行Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)相關(guān)信號(hào)通路蛋白的磷酸化情況。13、為研究NF-κB通路哪種轉(zhuǎn)錄因子傳導(dǎo)引起IL-23p19表達(dá)的胞漿信號(hào)進(jìn)胞核,我們用1μg/ml Pam3CSK4和10μg/ml PGN刺激類潘氏細(xì)胞,于刺激2h后終止刺激并收集細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活化量的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。14、為研究TLR2配體Pam3CSK4和PGN誘導(dǎo)IL-23p19表達(dá)差異的機(jī)制,我們用先用NOD2-siRNA敲低細(xì)胞內(nèi)的NOD2蛋白,再用10μg/ml PGN刺激2h后收集細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活化量的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。15、計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。應(yīng)用SPSS 18.0軟件進(jìn)行分析。兩組間比較時(shí)采用Student's t檢驗(yàn)；多組間比較時(shí)采用單因素方差分析(one-way ANOVA),當(dāng)滿足方差齊性時(shí),用Tukey法行組間多重比較,當(dāng)方差不齊時(shí),用Dunnett T3法行組間多重比較。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1、在FGF9連續(xù)刺激Caco2細(xì)胞72小時(shí)后,同未處理組相比,處理組的SI和APOA1這兩種吸收腸上皮細(xì)胞分化特異基因的mRNA表達(dá)量均顯著減少且維持至少72小時(shí)。相反,處理組的四種潘氏細(xì)胞分化特異基因HD5、HD6、lysozyme和sPLA2的mRNA表達(dá)量卻顯著地增加并維持至少24小時(shí)。2、同僅用FGF9連續(xù)刺激細(xì)胞72小時(shí)相比,用FGF9+MDP連續(xù)刺激Caco2細(xì)胞72小時(shí)后,HD5、HD6、lysozyme和sPLA2的mRNA表達(dá)量分別減少約10.6倍、9.6倍、2.7倍和2.3倍。而在轉(zhuǎn)染NOD2-siRNA后,FGF9刺激的轉(zhuǎn)染細(xì)胞同未轉(zhuǎn)染細(xì)胞相比,HD5、HD6、lysozyme和sPLA2的mRNA表達(dá)量均顯著增加。同此結(jié)果相一致,FGF9刺激的轉(zhuǎn)染細(xì)胞同未轉(zhuǎn)染細(xì)胞相比,HD5和HD6蛋白表達(dá)量也都顯著增加。3、在MDP連續(xù)刺激Caco2細(xì)胞72小時(shí)后,同未處理組相比,處理組的HD5和HD6基因的mRNA表達(dá)量分別增加約2.8倍和1.5倍,但是處理組的lysozyme和sPLA2基因的：mRNA表達(dá)量卻沒(méi)有顯著性的改變。而在轉(zhuǎn)染NOD2-siRNA后,MDP刺激的轉(zhuǎn)染細(xì)胞同未轉(zhuǎn)染細(xì)胞相比,HD5和HD6的mRNA表達(dá)量均顯著減少。4、FGF9刺激組同未處理組間的NOD2蛋白表達(dá)并沒(méi)有顯著性的差異。5、MDP刺激的信號(hào)通路抑制劑預(yù)處理的細(xì)胞同未預(yù)處理的細(xì)胞相比,在用BAY117082預(yù)處理的細(xì)胞中HD5和HD6的mRNA表達(dá)量均減少最明顯。而FGF9刺激的預(yù)處理細(xì)胞同未預(yù)處理的細(xì)胞相比,HD5和HD6的mRNA表達(dá)量分別在用SP600125和SB203580預(yù)處理的細(xì)胞中減少最明顯。另外,FGF9刺激能引起Caco2細(xì)胞內(nèi)MAPK通路中三種激酶p38、JNK和ERK1/2的磷酸化。6、在MDP刺激4小時(shí)和6小時(shí)后,胞核蛋白中p52,p50, Re1B和c-Rel的活化量都顯著性增加,其中增加最明顯的是p52和p50的活化量。7、TLR2激動(dòng)劑PGN和Pam3CSK4均可以誘導(dǎo)類潘氏細(xì)胞的IL-23p19表達(dá),當(dāng)刺激處理4小時(shí)后,兩者誘導(dǎo)的IL-23pl9 mRNA表達(dá)量最多,且此時(shí)PGN誘導(dǎo)的IL-23p19 mRNA表達(dá)量是Pam3CSK4誘導(dǎo)的四倍。此外,除了TLR2的激動(dòng)劑PGN和Pam3CSK4外,其它的TLR激動(dòng)劑并不能顯著性誘導(dǎo)IL-23p19的表達(dá)。8、同PGN刺激細(xì)胞比,PGN+MDP刺激細(xì)胞的IL-23p19 mRNA表達(dá)量顯著增加；同Pam3CSK4刺激組比,Pam3CSK4+MDP刺激組的IL-23p19mRNA表達(dá)量也顯著增加。此外,單獨(dú)用MDP刺激并不能顯著性誘導(dǎo)IL-23p19的mRNA表達(dá)。而在轉(zhuǎn)染NOD2-siRNA后,PGN或Pam3CSK4+MDP刺激的轉(zhuǎn)染細(xì)胞同未轉(zhuǎn)染組細(xì)胞相比,IL-23p19的mRNA表達(dá)量顯著減少,而Pam3CSK4刺激的轉(zhuǎn)染細(xì)胞同未轉(zhuǎn)染細(xì)胞相比,IL-23p19的mRNA表達(dá)量并無(wú)顯著性差異。另外,在Pam3CSK4刺激的未轉(zhuǎn)染細(xì)胞同PGN刺激的轉(zhuǎn)染細(xì)胞之間IL-23p19的mRNA表達(dá)量并無(wú)顯著性差異。此外,PGN刺激的轉(zhuǎn)染細(xì)胞同未轉(zhuǎn)染細(xì)胞相比,IL-23p19的蛋白表達(dá)量顯著減少。9、PGN刺激的用信號(hào)通路抑制劑預(yù)處理的細(xì)胞同未預(yù)處理的細(xì)胞相比,IL-23p19 mRNA表達(dá)量顯著減少,而在用BAY117082預(yù)處理的細(xì)胞中IL-23p19 mRNA表達(dá)量減少最明顯。此外,PGN還能引起IκBα的磷酸化。10、同未用任何刺激的對(duì)照組相比,NF-κB亞單位c-Rel的活化量在用PGN和Pam3CSK4刺激后均顯著增加,而其它亞單位p65、p52、p50和RelB的活化量都沒(méi)有顯著性的差異改變。此外,同Pam3CSK4刺激組相比,PGN刺激組的c-Rel的活化量顯著性增加。而在轉(zhuǎn)染NOD2-siRNA后,PGN刺激的轉(zhuǎn)染組同未轉(zhuǎn)染組相比c-Rel的活化量顯著性減少,而同Pam3CSK4刺激的未轉(zhuǎn)染組相比c-Rel的活化量卻沒(méi)有顯著性差異。結(jié)論1、活化FGFR-3介導(dǎo)的信號(hào)能體外誘導(dǎo)Caco2細(xì)胞向潘氏細(xì)胞系分化。2、在潘氏細(xì)胞系分化過(guò)程中NOD2下調(diào)人類腸道抗菌肽的表達(dá)。3、雖然僅活化NOD2本身能輕微上調(diào)人類腸道α-防御素的表達(dá),但它卻能顯著下調(diào)FGFR-3介導(dǎo)的人類腸道α-防御素的表達(dá)。NOD2分別通過(guò)NF-κB通路和MAPK通路來(lái)上調(diào)和下調(diào)人類腸道α-防御素的表達(dá)。4、NOD2通過(guò)NF-κB亞單位c-Rel上調(diào)TLR2介導(dǎo)的IL-23p19的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：克羅恩病 NOD2 人類腸道抗菌肽 人類腸道 α-防御素 白介素-23
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R574.62
【目錄】：

• 摘要3-11
• ABSTRACT11-22
• 第一章 在潘氏細(xì)胞系的分化過(guò)程中NOD2下調(diào)人類腸道抗菌肽的表達(dá)22-74
• 1.1 引言22-24
• 1.2 材料和方法24-52
• 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果52-69
• 1.4 討論69-74
• 第二章 在類潘氏細(xì)胞中NOD2通過(guò)NF-κB亞單位c-Rel上調(diào)TLR2介導(dǎo)的IL-23p19表達(dá)74-102
• 2.1 引言74-76
• 2.2 材料和方法76-88
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果88-99
• 2.4 討論99-102
• 全文小結(jié)102-103
• 參考文獻(xiàn)103-117
• 中英文縮寫詞對(duì)照表117-118
• 攻讀學(xué)位期間成果118-119
• 致謝119-121
• 統(tǒng)計(jì)學(xué)證明121

  本文關(guān)鍵詞：NOD2對(duì)潘氏細(xì)胞系抗菌肽和白介素-23pl9表達(dá)的調(diào)節(jié)作用及機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：279996