發(fā)布時間：2023-02-10 17:28

　　研究背景隨著社會老齡化人口的增加,骨質(zhì)疏松癥在全世界特別是西方發(fā)達國家的發(fā)病率正在逐漸升高,現(xiàn)已成為亟待解決的世界性公共衛(wèi)生問題。藥物治療所產(chǎn)生的毒副作用使其臨床應(yīng)用受到一定的限制,而運動療法作為一種非藥物治療手段可以有效防治骨質(zhì)疏松癥,成為了當今研究熱點。然而運動防治骨質(zhì)疏松癥的作用機制至今尚未完全闡明。研究表明,Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在骨形成和成骨分化,以及防治骨質(zhì)疏松癥中具有非常重要的作用。但Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是否在運動防治骨質(zhì)疏松癥中占有重要作用還未有相關(guān)研究,且不同的運動強度和運動時間在防治骨質(zhì)疏松癥上的效果也不盡相同。因此,本研究將使用老年骨質(zhì)疏松小鼠(SAMP6)作為動物模型,采用跑臺運動干預(yù)手段,研究不同強度和時間跑臺運動對SAMP6小鼠的骨形態(tài)計量學(xué)和Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。同時,本研究還采用機械應(yīng)力刺激(壓應(yīng)力和牽張力)對MC3T3-E1成骨細胞進行干預(yù),觀察機械應(yīng)力對成骨細胞分化及Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。從而驗證“運動/機械應(yīng)力——Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路——促骨重塑/成...

【文章頁數(shù)】：115 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞
緒論
文獻綜述 運動防治骨質(zhì)疏松癥的機制概述以及機械應(yīng)力對Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
第一部分 不同強度和時間跑臺運動對老年骨質(zhì)疏松小鼠(SAMP6)骨形成和Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
    前言
    1 材料和方法
        1.1 實驗動物及分組
        1.2 主要實驗儀器
        1.3 主要實驗試劑
        1.4 實驗方法
            1.4.1 實驗步驟
            1.4.2 小鼠跑臺運動方案
            1.4.3 取材
            1.4.4 檢測指標及方法
            1.4.5 統(tǒng)計學(xué)分析
    2 結(jié)果
        2.1 小鼠脛骨骨形態(tài)計量學(xué)結(jié)果
            2.1.1 運動對SAMP6小鼠骨小梁形態(tài)計量學(xué)的影響
            2.1.2 運動對SAMP6小鼠皮質(zhì)骨形態(tài)計量學(xué)的影響
        2.2 運動對小鼠脛骨Wnt1、LRP5和β-cateninmRNA表達的影響
        2.3 運動對各組小鼠血清ALP、OCN和PTH水平的影響
    3 討論
        3.1 老年骨質(zhì)疏松癥模型的建立及Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的變化
        3.2 不同運動強度對SAMP6小鼠骨形成及Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
        3.3 不同運動時間對SAMP6小鼠骨形成及Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
    4 小結(jié)
第二部分 機械壓應(yīng)力對MC3T3-E1成骨細胞的分化及Wnt/β-catenin信號的影響
    前言
    1 材料和方法
        1.1 主要儀器
        1.2 主要試劑及配置
        1.3 方法
            1.3.1 研究方案示意圖(圖2-1)
            1.3.2 細胞培養(yǎng)
            1.3.3 3 D細胞混凝柱的制備
            1.3.4 細胞加壓實驗
            1.3.5 堿性磷酸酶(ALP)活性測定
            1.3.6 Real-timePCR檢測成骨細胞分化相關(guān)基因(ALP、OCN、Runx2、OSX)以及Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路關(guān)鍵因子LRP5,SOST的mRNA的表達
            1.3.7 Westenblot檢測細胞成骨細胞Wnt1、DVL2、β-catenin和磷酸化β-catenin(p-β-catenin)的蛋白表達水平
            1.3.8 統(tǒng)計分析
    2 結(jié)果
        2.1 不同強度和時間的機械壓應(yīng)力對MC3T3-E1成骨細胞ALP活性的影響
        2.2 不同強度和時間的機械壓應(yīng)力對MC3T3-E1成骨分化關(guān)鍵因子表達的影響
        2.3 不同強度和時間的機械壓應(yīng)力對MC3T3-E1成骨細胞Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
    3 討論
        3.1 不同強度機械壓應(yīng)力刺激對MC3T3-E1成骨細胞分化的影響
        3.2 不同時間機械壓應(yīng)力刺激對MC3T3-E1成骨細胞分化的影響
        3.3 不同強度和時間機械壓應(yīng)力刺激對MC3T3-E1成骨細胞Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響
    4 小結(jié)
第三部分 機械牽張力對MC3T3-E1成骨細胞分化及Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響
    前言
    1 材料與方法
        1.1 主要儀器
        1.2 主要試劑
        1.3 方法
            1.3.1 細胞培養(yǎng)
            1.3.2 施加牽張應(yīng)力
            1.3.3 堿性磷酸酶(ALP)活性測定
            1.3.4 Real-timePCR檢測
            1.3.5 Westernblot檢測成骨細胞的Wnt1、β-catenin、P-β-catenin蛋白表達情況
            1.3.6 流式細胞儀檢測細胞凋亡水平
            1.3.7 統(tǒng)計學(xué)分析
    2 結(jié)果
        2.1 不同強度和時間機械牽張應(yīng)力對MC3T3-E1成骨細胞ALP活性的影響
        2.2 不同強度和時間機械牽應(yīng)力對MC3T3-E1成骨細胞分化關(guān)鍵因子OCN、Runx2和OsterixmRNA表達的影響
        2.3 不同強度和時間機械牽張應(yīng)力對MC3T3-E1成骨細胞Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通的影響
        2.4 不同強度和時間機械牽張應(yīng)力對MC3T3-E1成骨細胞凋亡的影響
    3 討論
        3.1 不同強度機械牽張應(yīng)力刺激對MC3T3-E1成骨細胞分化的影響
        3.2 不同時間機械牽張應(yīng)力刺激對MC3T3-E1成骨細胞分化的影響
        3.3 不同強度和時間機械牽張應(yīng)力刺激對MC3T3-E1成骨細胞Wnt/β-catenin的影響
        3.4 不同強度和時間機械牽張應(yīng)力刺激對MC3T3-E1成骨細胞凋亡的影響
    4.小結(jié)
全文總結(jié)
研究主要創(chuàng)新之處及展望
    1.創(chuàng)新之處
    2.局限性及展望
參考文獻
本科到研究到研究生學(xué)習(xí)經(jīng)歷
攻讀學(xué)位期間的科研成果
資助聲明
致謝



本文編號：3739599