目的葡萄膜炎是一種常見(jiàn)的致盲性的眼內(nèi)炎癥性疾病,常由自身免疫失調(diào)引起。以往研究發(fā)現(xiàn),黃連素可緩解實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）及潰瘍性結(jié)腸炎等自身免疫性疾病的臨床癥狀。本實(shí)驗(yàn)旨在研究黃連素是否可以抑制實(shí)驗(yàn)性自身性葡萄膜炎（EAU）的發(fā)生發(fā)展,并闡明其可能的作用及機(jī)制。方法B10R.Ⅲ小鼠經(jīng)視網(wǎng)膜光感受器間維生素A類(lèi)結(jié)合蛋白161-180（IRBP161-180）免疫誘為EAU。并在誘導(dǎo)第1天開(kāi)始予以黃連素或安慰劑ddH2O灌胃。在免疫后第14天,用裂隙燈觀察炎癥小鼠前房的改變并進(jìn)行臨床評(píng)分;取小鼠眼球做HE切片并進(jìn)行病理評(píng)分;伊文思藍(lán)實(shí)驗(yàn)用于觀察血視網(wǎng)膜屏障完整性的改變;RT-PCR用于檢測(cè)IL-17、IFN-r和IL-10的表達(dá)量;流式細(xì)胞術(shù)用于檢測(cè)Th1細(xì)胞、Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞比例的變化;轉(zhuǎn)錄組測(cè)序用于檢測(cè)脾臟轉(zhuǎn)錄組的差異表達(dá)基因;糞便16sRNA測(cè)序用于檢測(cè)腸道菌群的差異。結(jié)果EAU造模后第14天,與對(duì)照組（ddH2O組）相比,黃連素治療組小鼠臨床評(píng)分和病理評(píng)分顯著降低,受損的血眼屏障得到修復(fù),黃連素治療組EAU鼠炎癥細(xì)胞和炎癥因子的表達(dá)顯著降低,同時(shí)抗炎因子的表達(dá)顯... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

所示為，在造模及灌胃第14天后，使用裂隙燈評(píng)估小鼠的臨床癥狀

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文21如圖5所示，黃連素可顯著降低EAU小鼠脾臟淋巴細(xì)胞中Th17(IL-17+CD4+)細(xì)胞及Th1(IFN-γ+CD4+)細(xì)胞的比例，而增加Treg(Foxp3+CD4+)細(xì)胞的比例(n=5/group;mean±SD;***p<0.001;**p<0.01;*p<0.05;Unpairedt-test)。TheflowcytometryresultsshowedthatberberinecanremarkablyreducethefrequencyofTh17(IL-17+CD4+),Th1(IFN-γ+CD4+),andincreasethefrequencyofTreg(Foxp3+CD4+)(n=5/group;mean±SD;***p<0.001;**p<0.01;*p<0.05;Unpairedt-test).2.1.6黃連素可顯著改變EAU小鼠脾臟轉(zhuǎn)錄組黃連素治療EAU小鼠14天之后，取小鼠脾臟做轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，結(jié)果顯示黃連素處理組與對(duì)照組小鼠脾臟轉(zhuǎn)錄組存在顯著差異，設(shè)閾值為：FDR<0.05,|log2foldchange|>1，則有476個(gè)DEGs，其中上調(diào)的DEGs為249個(gè)，下調(diào)DEGs為227個(gè)。

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文22如圖6所示，黃連素可顯著改變EAU小鼠脾臟轉(zhuǎn)錄組的基因表達(dá)，其中上調(diào)的DEGs為249個(gè)，下調(diào)DEGs為227個(gè)（FDR<0.05,|log2foldchange|>1）。TheresultshowedthatBBRchangedtheglobalgenetranscriptionprofilesofEAUspleen，whereby249DEGswereupregulatedand227DEGsweredownregulated（FDR<0.05,|log2foldchange|>1）.2.1.7脾臟轉(zhuǎn)錄組GO分析黃連素治療EAU小鼠可引起脾臟染色體重組通路及多條免疫相關(guān)通路基因表達(dá)水平的變化。其中上調(diào)的通路有三條，都屬于細(xì)胞成分類(lèi)別包括：basementmembrane,extracellularmatrix,collagen-containingextracellularmatrix；下調(diào)的通路有71調(diào)，生物過(guò)程類(lèi)別通路有：nucleosomeassembly,chromatinassembly,myeloidcelldifferentiation,antigenprocessingandpresentationofpeptideantigen等；下調(diào)的細(xì)胞成分類(lèi)別通路有：nucleosome,DNApackagingcomplex,protein-DNAcomplex,chromatin,MHCproteincomplex等；下調(diào)的分子功能類(lèi)別


本文編號(hào)：3328894