目的葡萄膜炎是一種常見的致盲性的眼內炎癥性疾病,常由自身免疫失調引起。以往研究發(fā)現,黃連素可緩解實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）及潰瘍性結腸炎等自身免疫性疾病的臨床癥狀。本實驗旨在研究黃連素是否可以抑制實驗性自身性葡萄膜炎（EAU）的發(fā)生發(fā)展,并闡明其可能的作用及機制。方法B10R.Ⅲ小鼠經視網膜光感受器間維生素A類結合蛋白161-180（IRBP161-180）免疫誘為EAU。并在誘導第1天開始予以黃連素或安慰劑ddH2O灌胃。在免疫后第14天,用裂隙燈觀察炎癥小鼠前房的改變并進行臨床評分;取小鼠眼球做HE切片并進行病理評分;伊文思藍實驗用于觀察血視網膜屏障完整性的改變;RT-PCR用于檢測IL-17、IFN-r和IL-10的表達量;流式細胞術用于檢測Th1細胞、Th17細胞和Treg細胞比例的變化;轉錄組測序用于檢測脾臟轉錄組的差異表達基因;糞便16sRNA測序用于檢測腸道菌群的差異。結果EAU造模后第14天,與對照組（ddH2O組）相比,黃連素治療組小鼠臨床評分和病理評分顯著降低,受損的血眼屏障得到修復,黃連素治療組EAU鼠炎癥細胞和炎癥因子的表達顯著降低,同時抗炎因子的表達顯... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數】：51 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

所示為，在造模及灌胃第14天后，使用裂隙燈評估小鼠的臨床癥狀

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文21如圖5所示，黃連素可顯著降低EAU小鼠脾臟淋巴細胞中Th17(IL-17+CD4+)細胞及Th1(IFN-γ+CD4+)細胞的比例，而增加Treg(Foxp3+CD4+)細胞的比例(n=5/group;mean±SD;***p<0.001;**p<0.01;*p<0.05;Unpairedt-test)。TheflowcytometryresultsshowedthatberberinecanremarkablyreducethefrequencyofTh17(IL-17+CD4+),Th1(IFN-γ+CD4+),andincreasethefrequencyofTreg(Foxp3+CD4+)(n=5/group;mean±SD;***p<0.001;**p<0.01;*p<0.05;Unpairedt-test).2.1.6黃連素可顯著改變EAU小鼠脾臟轉錄組黃連素治療EAU小鼠14天之后，取小鼠脾臟做轉錄組測序，結果顯示黃連素處理組與對照組小鼠脾臟轉錄組存在顯著差異，設閾值為：FDR<0.05,|log2foldchange|>1，則有476個DEGs，其中上調的DEGs為249個，下調DEGs為227個。

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文22如圖6所示，黃連素可顯著改變EAU小鼠脾臟轉錄組的基因表達，其中上調的DEGs為249個，下調DEGs為227個（FDR<0.05,|log2foldchange|>1）。TheresultshowedthatBBRchangedtheglobalgenetranscriptionprofilesofEAUspleen，whereby249DEGswereupregulatedand227DEGsweredownregulated（FDR<0.05,|log2foldchange|>1）.2.1.7脾臟轉錄組GO分析黃連素治療EAU小鼠可引起脾臟染色體重組通路及多條免疫相關通路基因表達水平的變化。其中上調的通路有三條，都屬于細胞成分類別包括：basementmembrane,extracellularmatrix,collagen-containingextracellularmatrix；下調的通路有71調，生物過程類別通路有：nucleosomeassembly,chromatinassembly,myeloidcelldifferentiation,antigenprocessingandpresentationofpeptideantigen等；下調的細胞成分類別通路有：nucleosome,DNApackagingcomplex,protein-DNAcomplex,chromatin,MHCproteincomplex等；下調的分子功能類別


本文編號：3328894