目的:電針預(yù)處理（EAP）能有效減輕心肌缺血（MI）損傷,但是其機(jī)制尚未完全闡釋。越來越多的證據(jù)表明梗死后心臟的炎性反應(yīng)直接影響心室功能的重塑,其中炎性體活化和巨噬細(xì)胞極化在該過程扮演重要角色,因此,擬通過本研究從調(diào)控NLRP3炎性體活化和巨噬細(xì)胞表型變化的角度探索電針預(yù)處理減輕MI損傷的可能機(jī)制。方法:以C57BL/6小鼠為研究對象,隨機(jī)分為4組,正常組（Ctrl）、正常電針預(yù)處理組（EA+Ctrl）、心肌缺血模型組（MI）、電針預(yù)處理3d后造模組（EA+MI）。采用結(jié)扎小鼠冠狀動(dòng)脈左前降支（LAD）構(gòu)建急性心肌缺血模型;預(yù)處理方案為電針雙側(cè)“內(nèi)關(guān)”,電針頻率2Hz/15Hz,疏密波,強(qiáng)度2mA,每次20min,1次/d,共干預(yù)3d。采用超聲心動(dòng)圖和TTC染色用于評估缺血24h后MI小鼠的心功能和心臟梗死面積;HE染色法和免疫組織化學(xué)法觀察小鼠心臟梗死區(qū)域的炎癥水平,以Western blot檢測NLRP3炎性小體的活化程度,流式細(xì)胞術(shù)檢測巨噬細(xì)胞極化和中性粒細(xì)胞浸潤程度。結(jié)果:（1）與正常組相比,模型組心肌梗死面積比例和心功能降低;與模型組相比,電針預(yù)處理后造模組心肌梗死面積比例和... 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１技術(shù)路線圖??

反應(yīng)以及??缺血組織修復(fù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。調(diào)控ＮＬＲＰ３炎性小體的活化，可以平衡急性心肌缺??血階段缺血心肌組織中的炎性平衡，有利于缺血心肌組織損傷后的修復(fù)與重塑。??ＮＬＲＰ３?ＡＳＣ?Ｐｒｏ－ｃａｓｐａｓｅ－１??ＩＨＷＨ?ＮＡＣＨＴ?ＭＭ?ＣＡＲＤ?｜?｜?ＣＡＲＤ??ＬＲＲ?，?．??＼?！?／??＼?ｖ?ｚ??ＤＱＤＱｉ?ｍ?ｃｕｍａｍ?／?一??ＮＬＲＰ３?ｉｎｆｌａｍｍａｓｏｍｅ?＿??Ｂ「盯ＢＢｌ，??Ｃａｓｐａｓｅ－１?ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ??圖２?ＮＬＲＰ３炎性體的結(jié)構(gòu)及在炎性反應(yīng)中的作用??大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也表明，小鼠ＡＭＩ模型中，缺血心肌組織中ＮＬＲＰ３表達(dá)升??高，炎性反應(yīng)加�。郏福�，８５］，相反，缺乏ＮＬＲＰ３炎性體成分可減輕炎性反應(yīng)并促進(jìn)??心臟的保護(hù)作用［２９］。另外，ＮＬＲＰ３７－小鼠ＡＭＩ模型也驗(yàn)證了?ＮＬＲＰ３的缺乏可有??效降低心肌炎性反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)心肌保護(hù)效應(yīng)［８６］。??３．?２巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞與心肌缺血??ＡＭＩ早期的急性炎性反應(yīng)是由針對缺血心肌細(xì)胞壞死的固有免疫觸發(fā)的。??壞死的心肌碎片作為ＤＡＭＰＳ被固有免疫識別，誘發(fā)急性的劇烈的炎性反應(yīng)Ｐ，??８８）。ＡＭＩ后，當(dāng)固有免疫系統(tǒng)被激活后，免疫細(xì)胞在缺血心肌組織中聚集，誘導(dǎo)??最初的炎性反應(yīng)［８９］。ＡＭＩ發(fā)生后，中性粒細(xì)胞是最早進(jìn)入缺血心肌的免疫細(xì)胞，??隨后單核巨噬細(xì)胞被募集到缺血心肌組織，誘發(fā)急性炎性反應(yīng)，吞噬壞死心肌細(xì)??８??

?第一部分理論研究???Ｃｄ２０６ｌｏｗ??Ｃｄ２０６ｈｉｅｈ??圖３巨噬細(xì)胞的極化對炎性反應(yīng)的影響??Ｍｌ和Ｍ２巨噬細(xì)胞極化的概念最早來源于體外研究，Ｍｌ型巨噬細(xì)胞的極??化主要由脂多糖（ＬＰＳ）和ＩＦＮ－ｙ聯(lián)合誘導(dǎo)，通過誘導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子（ＪＡＫ）和轉(zhuǎn)錄??激活因子ｌ（ＳＴＡＴｌ）下游磷酸化，激活Ｔｏｌｌ樣受體，進(jìn)一步影響絲裂原活化蛋白??（ＭＡＰＫ）通路、干擾素調(diào)節(jié)因子（ＩＲＦ）通路和ＮＦ－ｋＢ通路，促使分泌一系列的促炎??因子［１Ｑ９，?ＵＱ］。Ｍ２型巨噬細(xì)胞的極化由ＩＬ－４和ＩＬ－１３信號通過ＪＡＫ－ＳＴＡＴ通路激??活ＳＴＡＴ６，ＳＴＡＴ６的信號傳遞使巨噬細(xì)胞向Ｍ２型表達(dá)［ｍ］。雖然理論上可以根??據(jù)巨噬細(xì)胞極化表達(dá)的不同受體來分選，但是由于巨噬細(xì)胞有許多細(xì)微的表型，??目前我們?nèi)匀徊荒軐ζ溥M(jìn)行精確的分類。研究者使用Ｆ４／８０和ＣＤｌｌｂ標(biāo)記對小??鼠的Ｍｌ和Ｍ２型巨噬細(xì)胞進(jìn)行了分選［８６］；也有研究者通過ＣＤ２０６ｌｍ＾Ｐ?ＣＤ２０６ｈｉｇｈ??對小鼠的Ｍｌ和Ｍ２巨噬細(xì)胞進(jìn)行了區(qū)分…２］。另外Ｍ２型巨噬細(xì)胞因?yàn)榫哂薪M??織修復(fù)、抑制炎性反應(yīng)、吞噬活性、免疫調(diào)節(jié)等作用，所以又將Ｍ２型巨噬細(xì)胞??分為Ｍ２ａ，Ｍ２ｂ，Ｍ２ｃ等亞型［｜１３］。Ｍ２ａ和Ｍ２ｃ巨噬細(xì)胞對免疫調(diào)節(jié)和組織修復(fù)??至關(guān)重要，而抑制炎性免疫反應(yīng)則主要由依賴Ｍ２ｂ細(xì)胞［｜１４］。巨噬細(xì)胞亞型的轉(zhuǎn)??化并不是簡單割裂的，而不同的巨噬細(xì)胞亞型在心肌缺血病理過程中是交替激活??的，巨噬細(xì)胞這種多亞型、多功能表達(dá)的特點(diǎn)，也為治療心肌缺血?jiǎng)?chuàng)造了無限的??可能性。??在目前的實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，在心肌缺血后，通過將Ｍｌ型巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)??Ｍ２型巨噬細(xì)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3326131