目的:隨著非酒精性脂肪肝（NAFLD）患病率的逐年增長,其已成為全球最常見的慢性肝病。到目前為止,NAFLD尚無有效的治療方法,生活方式干預(yù)依然是其主要治療策略,藥物如二甲雙胍、吡格列酮和維生素E等對NAFLD的治療效果有限。因此,急需針對NAFLD治療藥物的研發(fā)。人參的主要活性成分人參皂苷Rg1被發(fā)現(xiàn)具有抗腫瘤、抗氧化和抗糖尿病等多種藥理作用。在前期的研究中,本課題組發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg1可顯著降低NAFLD模型小鼠甘油三酯和游離脂肪酸水平,減輕肝組織脂肪變,提示人參皂苷Rg1對改善肝臟脂質(zhì)蓄積具有積極作用。本研究旨在既往研究的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探討人參皂苷Rg1改善NAFLD脂質(zhì)代謝的可能機(jī)制及作用靶點,為NAFLD的治療提供新的思路。方法:1.細(xì)胞造模與分組:接種Hep G2細(xì)胞于6孔板,當(dāng)6孔板內(nèi)細(xì)胞密度達(dá)到60%-70%時分為3組,分別予以不同處理。正常組:普通培養(yǎng)基培養(yǎng)（含等濃度溶解介質(zhì)）;模型組:1 mmol/L游離脂肪酸（FFA）培養(yǎng)基[FFA為油酸（OA）和棕櫚酸（PA）混合物（OA:PA=2:1）]培養(yǎng)24 h后繼以普通培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h;人參皂苷Rg1組:1 mmol/L... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人參皂苷Rg1對HepG2細(xì)胞活性的影響(x±s，n=3)

人參皂苷Rg1對NAFLD細(xì)胞模型脂質(zhì)沉積的影響(x±s，n=3)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文25圖3人參皂苷Rg1對FFA誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞脂質(zhì)過氧化的影響(x±s，n=3)Fig3.EffectsofG-Rg1onFFA-inducedlipidperoxidationinHepG2cells(x±s，n=3)注：與模型組比較***P<0.0014.4人參皂苷Rg1對FFA誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達(dá)的影響為了進(jìn)一步研究人參皂苷Rg1對脂質(zhì)合成的作用，本研究通過Westernblot和RT-qPCR檢測SREBP1c信號通路，獲得相關(guān)基因表達(dá)情況。Westernblot結(jié)果顯示(圖4a，b，c)：模型組SREBP1c和FASN表達(dá)均升高（P＜0.01），與模型組比較，25μM和50μM濃度人參皂苷Rg1組SREBP1c和FASN表達(dá)均降低（P＜0.01）。此外，模型組ACCα表達(dá)無顯著變化（P＞0.05），但ACCα的磷酸化顯著降低（P＜0.05），ACCα的磷酸化與ACCα比值顯著降低（P＜0.05）。經(jīng)不同濃度人參皂苷Rg1處理后，ACCα表達(dá)均無顯著變化（P＞0.05），ACCα磷酸化均顯著升高（P＜0.05），50μM濃度人參皂苷Rg1組磷酸化ACCα與ACCα比值顯著升高（P＜0.05）。RT-qPCR結(jié)果表明（圖4d），模型組SREBP1c、FASN和ACCα表達(dá)均升高（P＜0.05）。人參皂苷Rg1組SREBP1c、FASN和ACCα表達(dá)均下降，50μM濃度時效果最顯著（P＜0.05）。證明人參皂苷Rg1可抑制FFA誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞脂質(zhì)合成。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease in children and adolescence: From “two hit theory” to “multiple hit model”[J]. Yan-Lan Fang,Hong Chen,Chun-Lin Wang,Li Liang.  World Journal of Gastroenterology. 2018(27)
[2]Treatment options for alcoholic and non-alcoholic fatty liver disease: A review[J]. Sukhpreet Singh,Natalia A Osna,Kusum K Kharbanda.  World Journal of Gastroenterology. 2017(36)



本文編號：3314605