發(fā)布時間：2021-07-02 18:17

　　目的:MAO-B能催化體內(nèi)多種單胺類如多巴胺等神經(jīng)遞質(zhì)的氧化降解。其活性或表達(dá)的異常升高將導(dǎo)致多巴胺等神經(jīng)遞質(zhì)水平的降低,并造成神經(jīng)細(xì)胞的氧化損傷。在臨床上,MAO-B被認(rèn)為是治療多種神經(jīng)退行性疾病的重要靶點。然而,以MAO-B為作用靶點的現(xiàn)有臨床藥物大多存在毒副作用較大或選擇性差等缺點。因此,研發(fā)高效、選擇性好和毒副作用低的新型MAO-B抑制劑是當(dāng)前研究的熱門領(lǐng)域。天然查爾酮化合物異甘草素是中藥甘草的活性成分之一,被發(fā)現(xiàn)對MAO-B具有一定的抑制活性,但其確切構(gòu)效關(guān)系尚未明確,有望通過結(jié)構(gòu)優(yōu)化修飾,進(jìn)一步提高其抑制活性和選擇性。基于此,本論文從異甘草素母體結(jié)構(gòu)出發(fā),通過結(jié)構(gòu)修飾,合成一系列查爾酮衍生物,探討其構(gòu)效關(guān)系。在獲取的構(gòu)效關(guān)系指導(dǎo)下,對新發(fā)現(xiàn)的活性分子骨架再進(jìn)行合理設(shè)計、合成,構(gòu)建查爾酮化合物庫,從中進(jìn)行活性篩選,旨在尋找具有良好抑制活性、選擇性高和成藥性好的MAO-B抑制劑。方法:以查爾酮母體結(jié)構(gòu)（1,3-二苯基-2-丙烯酮）為基本骨架,利用計算機(jī)輔助設(shè)計,通過堿催化的Claisen-Schmidt縮合反應(yīng)法,合成異甘草素及2,3-二氫-1,4-苯并二氧六環(huán)基查爾酮等系列衍... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：164 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

MAO-A（左）和MAO-B（右）共晶結(jié)構(gòu)圖（a.核黃素結(jié)合區(qū)域（藍(lán)色表示），其中黃色表示FAD分子；b.底物區(qū)域（紅色表示），其中陰影部分表示底物空腔，其中靠近FAD的陰

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文孔卓7核苷酸（FAD）。通過硫醚鍵，F(xiàn)AD與MAO-A的Cys406和MAO-B的Cys397發(fā)生共價結(jié)合[7,8]；研究還發(fā)現(xiàn)，在FAD異咯嗪環(huán)的背面上，還存在一個由多個芳香環(huán)組成的籠狀結(jié)構(gòu)（AromaticCage），該結(jié)構(gòu)在底物催化氧化過程也扮演著重要角色[9-11]。在MAO-B中，上述籠狀結(jié)構(gòu)包含Tyr398和Tyr435等氨基酸殘基，在MAO-A中，該籠狀結(jié)構(gòu)包含Tyr406和Tyr444等氨基酸殘基。MAO-A和MAO-B在活性位點的結(jié)構(gòu)差異較大。MAO-A的活性位點是單個疏水腔，大小約為5503[12]。而MAO-B具有入口區(qū)和底物區(qū)的雙腔結(jié)構(gòu)，底物或抑制劑在酶與膜表面的交匯處開始進(jìn)入活性位點。首先，與蛋白質(zhì)環(huán)loop99-112相互融合，之后經(jīng)入口空腔進(jìn)入底物空腔，最終到達(dá)黃素催化中心區(qū)。入口空腔為疏水口袋，體積為2903，同為疏水環(huán)境的底物空腔，體積為3903。四個殘基（Tyr326，Ile199，Leu171和Phe168）在入口區(qū)和底物區(qū)之間形成邊界，殘基Ile199充當(dāng)分隔兩個腔的構(gòu)象“門”，決定兩個空腔的分離或融合狀態(tài)，當(dāng)兩個空腔開口融合形成單腔時，形成的總體積為7003[13,14]。1.2單胺氧化酶的生理功能在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CentralNervousSystem，CNS）和外周組織中，MAO可通過催化單胺神經(jīng)遞質(zhì)發(fā)生氧化脫氨作用，使底物失去原有活性。這個催化過程還伴隨著過氧化氫、胺和醛等副產(chǎn)物的產(chǎn)生（圖2）[15]。這些單胺類物質(zhì)主要包括芐胺（Benzylamine），酪胺（Tyramine）、血清素（5-HT）、多巴胺（Dopamine，DA）、腎上腺素（Epinephrine）、去甲腎上腺素（Norepinephrine）等[16]。圖2MAO催化多巴胺氧化脫氨反應(yīng)Fig.2MAO-catalyzedoxidativedeaminationofdopamine在CNS中，MAO-A主要催化血清素、酪胺、腎上腺素和去甲腎上腺素的降解，

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文孔卓8MAO-B則更多參與催化DA的氧化降解[17,18]。隨著年齡增長，MAO-B的活性和表達(dá)在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中逐漸增強(qiáng)，可高達(dá)約4倍[19]。這將導(dǎo)致更多的多巴胺發(fā)生降解，同時產(chǎn)生高水平的過氧化氫，形成氧化應(yīng)激，最后將致使黑膠質(zhì)中DA能神經(jīng)元細(xì)胞凋亡[20]。這被認(rèn)為是帕金森�。≒arkinson’sdisease，PD）發(fā)病進(jìn)程中的重要事件之一[21]。另外，MAO-B還可以將1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶（MPTP）代謝生成一種神經(jīng)毒素1-甲基-4-苯基-吡啶離子（MPP+），進(jìn)一步加劇病理進(jìn)程。而抑制MAO-B活性則可以提高體內(nèi)多巴胺水平，并產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用。因此，采取抑制MAO-B活性的辦法被認(rèn)為是治療包括PD在內(nèi)的多種神經(jīng)退行性疾病的有效策略。而對MAO-A進(jìn)行抑制則常用于抑郁癥的治療。1.3MAO-B抑制劑MAO-B抑制劑常用于治療PD等神經(jīng)退行性疾病[22]。臨床上現(xiàn)有的治療藥物主要是司來吉蘭（selegiline）[23]、雷沙吉蘭（rasagiline）[24,25]和沙芬酰胺（safinamide）[26]（如圖3），前兩者是MAO-B不可逆抑制劑，后者是MAO-B可逆性抑制劑。圖3MAO-B抑制劑結(jié)構(gòu)式Fig.3ChemicalstructuresofMAO-Binhibitor1.3.1司來吉蘭司來吉蘭作為第一代MAO-B抑制劑，屬于不可逆抑制劑，其抑制人MAO-B的IC50為16.73nM，而抑制人MAO-A的IC50為68.73μM[27]。司來吉蘭既可作為單藥用于治療早期PD，也可與左旋多巴合用，能有效緩解晚期PD患者的震顫、肌強(qiáng)直和運(yùn)動障礙[28]。但其選擇性較差，當(dāng)其劑量低于10mg時才有選擇性，會產(chǎn)生惡心、

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]染料木素對Aβ25-35誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及CaM-CaMKIV信號通路的影響[J]. 蔡標(biāo),葉樹,王艷,華如鵬,汪婷婷,李靜,江愛娟,申國明.  中國中藥雜志. 2018(03)
[2]黃酮類化合物在防治神經(jīng)退行性疾病中作用的研究進(jìn)展[J]. 曹秦,吳輝,張蓓蓓,吳曉俊.  中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2015(03)
[3]作用于不同活性位點的單胺氧化酶抑制劑[J]. 郭躍平,鄭瑞華,梁世君,胡基埂,肖延銘.  浙江化工. 2011(12)
[4]查爾酮類化合物生物活性研究新進(jìn)展[J]. 金磊,閆聰彥,甘淋玲,周成合.  中國生化藥物雜志. 2010(05)
[5]抗抑郁藥物及其研究方法的進(jìn)展[J]. 楊小瑩,陳杰,楊新明,馬世平.  中國中藥雜志. 2007(09)
[6]藥物分子設(shè)計中的Lipinski規(guī)則[J]. 楊二冰,李正名.  化學(xué)通報. 2006(01)
[7]利用酶抑制劑固定化磷脂酶A1（PLA1）的研究[J]. 孫萬成,宋齡英,蔣篤孝,羅毅皓.  食品科學(xué). 2004(06)
[8]串果藤中甘草素和異甘草素對大鼠單胺氧化酶的體外抑制作用(英文)[J]. 潘宣,孔令東,張勇,鄭漢其,譚仁祥南京大學(xué)功能生物分子研究所.  Acta Pharmacologica Sinica. 2000(10)



本文編號：3260977