間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal Stem Cell,MSC）除了具有其干細(xì)胞特性以外還具有免疫調(diào)節(jié)特性而成為頗具臨床應(yīng)用價值的治療性細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞（Human Embryonic Stem Cell,hESC）是一種在體外可無限增殖的亞全能細(xì)胞,具有分化成各種體細(xì)胞的潛力,因此如果胚胎干細(xì)胞能分化成間充質(zhì)干細(xì)胞則該細(xì)胞（hESCMSC）將是一種可再生的MSC,而且由于來源相同,hESC-MSC品質(zhì)高度均一,可望成為質(zhì)量完全可控的新型MSC產(chǎn)品以用于臨床治療。盡管目前hESC-MSC分化方案多種多樣,但是分化效率相差較大,特別是其免疫調(diào)節(jié)的特性目前仍存在爭議。hESC-MSC分化可使用生物基質(zhì)材料替代細(xì)胞飼養(yǎng)層維持人類胚胎干細(xì)胞存活并輔助誘導(dǎo)分化,避免了動物源基質(zhì)細(xì)胞對臨床研究造成困難。生物基質(zhì)材料具有無毒、無病原體、生物相容性良好等優(yōu)勢,是誘導(dǎo)hESC-MSC的理想媒介和微環(huán)境。不同包被材料通過識別細(xì)胞表面受體信號,在培養(yǎng)過程中對hESC-MSC遷移、增殖、分化等具有重要的意義,但對T淋巴細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)特性影響鮮見報道。為此我們首先建立了一個簡易、高效的hESC-MSC分化方案,... 

【文章來源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRCT
第一章 綜述
    1.1 間充質(zhì)干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 間充質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)用于免疫疾病治療
        1.1.2 間充質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)用于組織修復(fù)和抗衰老治療
        1.1.3 間充質(zhì)干細(xì)胞應(yīng)用于組織工程研究
    1.2 人胚胎干細(xì)胞的研究現(xiàn)狀
    1.3 人胚胎干細(xì)胞向間充質(zhì)干細(xì)胞分化的研究現(xiàn)狀
    1.4 間充質(zhì)干細(xì)胞對T淋巴細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)研究
    1.5 研究目的及意義
第二章 人胚胎干細(xì)胞衍生間充質(zhì)干細(xì)胞的分化與鑒定
    2.1 實驗方法
        2.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.1.2 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
        2.1.3 hESC-MSC分化方案
        2.1.4 MSC成骨、成脂、成軟骨誘導(dǎo)分化
        2.1.5 MSC增殖檢測
        2.1.6 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面抗原表達(dá)
        2.1.7 RNA提取與反轉(zhuǎn)錄
        2.1.8 熒光定量PCR(Real-time PCR)反應(yīng)
        2.1.9 統(tǒng)計與分析
    2.2 實驗儀器與試劑
        2.2.1 實驗儀器
        2.2.2 實驗試劑
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 hESC-MSC的分化與細(xì)胞表面抗原表達(dá)
        2.3.2 hESC-MSC的成骨、成脂、成軟骨分化
        2.3.3 hESC-MSC增殖檢測
    2.4 小結(jié)
第三章 人胚胎干細(xì)胞衍生MSC具有強烈的CD4~+-T淋巴細(xì)胞功能調(diào)節(jié)潛力
    3.1 實驗方法
        3.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.2 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
        3.1.3 hESC-MSC分化方案
        3.1.4 流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞表面抗原表達(dá)檢測
        3.1.5 CD4~+T淋巴細(xì)胞增殖檢測
        3.1.6 CD4~+T淋巴細(xì)胞向Treg分化檢測
        3.1.7 統(tǒng)計與分析
    3.2 實驗儀器與試劑
        3.2.1 實驗儀器
        3.2.2 實驗試劑
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 hESC-MSC在不同共培養(yǎng)條件下對CD4~+T淋巴細(xì)胞增殖的抑制
        3.3.2 hESC-MSC在不同共培養(yǎng)條件下促進(jìn)CD4~+T淋巴細(xì)胞向Treg細(xì)胞分化
    3.4 小結(jié)
第四章 hESC通過不同包被材料衍生的MSC生物學(xué)特性鑒定
    4.1 實驗方法
        4.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.1.2 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
        4.1.3 hESC-MSC分化方案
        4.1.4 MSC成骨、成脂、成軟骨誘導(dǎo)分化
        4.1.5 流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞表面抗原表達(dá)檢測
        4.1.6 RNA提取與反轉(zhuǎn)錄
        4.1.7 熒光定量PCR(Real-time PCR)反應(yīng)
        4.1.8 統(tǒng)計與分析
    4.2 實驗儀器與試劑
        4.2.1 實驗儀器
        4.2.2 實驗試劑
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 不同包被材料分化的hESC-MSC表面抗原表達(dá)
        4.3.2 不同包被材料分化的hESC-MSC成骨、成脂、成軟骨分化能力
    4.4 小結(jié)
第五章 不同包被材料對hESC-MSC在 T淋巴細(xì)胞免疫功能調(diào)節(jié)的影響
    5.1 實驗方法
        5.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        5.1.2 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
        5.1.3 hESC-MSC分化方案
        5.1.4 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面抗原表達(dá)
        5.1.5 T淋巴細(xì)胞增殖檢測
        5.1.6 T淋巴細(xì)胞向Treg分化檢測
        5.1.7 ELISA檢測MSC分泌抗炎因子
        5.1.8 統(tǒng)計與分析
    5.2 實驗儀器與試劑
        5.2.1 實驗儀器
        5.2.2 實驗試劑
    5.3 實驗結(jié)果
        5.3.1 不同包被材料對hESC-MSC抑制T淋巴細(xì)胞增殖的影響
        5.3.2 不同包被材料對hESC-MSC促進(jìn)Treg分化的影響
        5.3.3 不同包被材料對hESC-MSC在不同共培養(yǎng)條件下抗炎因子分泌的影響
討論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡況及聯(lián)系方式


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)特性及在器官移植中的應(yīng)用[J]. 蔣珊珊,王峰,余麗梅.  中國組織工程研究. 2019(01)
[2]Ⅰ型膠原誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及成骨細(xì)胞的成骨分化機制[J]. 謝玉,周諾.  中國組織工程研究. 2018(21)
[3]間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療胰腺炎的研究進(jìn)展[J]. 金相任,徐鉑然,侯國方,孫備,白雪巍.  世界華人消化雜志. 2017(30)
[4]體外定向誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞向骨、軟骨及脂肪細(xì)胞的分化[J]. 李豫皖,朱喜忠,金瑛,王勝民,楊繼濱,熊華章,鄒剛,劉毅.  中國組織工程研究. 2017(01)
[5]人胚胎干細(xì)胞來源多巴胺前體細(xì)胞治療帕金森病猴[J]. 王昱凱,周琪,胡寶洋.  生命科學(xué). 2016(08)
[6]間充質(zhì)干細(xì)胞臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 李明,詹成,代曦煜,楊新宇,馮明祥.  復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(04)
[7]人胚胎干細(xì)胞源性間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 馮年花.  中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報. 2015(03)
[8]臍血間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為類雪旺細(xì)胞修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)損傷的實驗研究[J]. 王璽,王勝,肖玉周.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2015(02)
[9]胚胎干細(xì)胞衍生的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞移植治療眼病[J]. 胡誕寧.  中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志(電子版). 2014(02)
[10]HLA-G誘導(dǎo)DC細(xì)胞在免疫耐受機制中的研究進(jìn)展[J]. 許惠惠,阮嫣赟,顏衛(wèi)華,林愛芬.  生命科學(xué). 2011(08)

博士論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源微泡的生物學(xué)特征及其在組織工程中的應(yīng)用研究[D]. 謝慧.華中科技大學(xué) 2016

碩士論文
[1]hESC生物藥物建立及GM-1對hESC誘導(dǎo)分化神經(jīng)細(xì)胞的影響[D]. 高選.山東大學(xué) 2010



本文編號：3171478