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富含血小板血漿(PRP)修復(fù)低氧環(huán)境下兔跟腱病的實驗研究

發(fā)布時間:2021-04-28 15:20
  研究背景肌腱。╰endinopathy)不僅是一種職業(yè)病,也是最常見的運動損傷性疾病,發(fā)病率高,是目前足踝外科、運動醫(yī)學(xué)、康復(fù)醫(yī)學(xué)等學(xué)科常見的傷病之一,嚴(yán)重影響了人們的日常工作與生活。目前的治療方式主要是保守治療和手術(shù)治療,保守治療的方法包括局部制動休息、減負(fù)訓(xùn)練、口服甾體類抗炎藥、物理治療,中醫(yī)療法、干細(xì)胞療法等;對于保守治療無效、臨床癥狀持續(xù)加重的患者,可予以外科手術(shù)治療。這些保守治療方式在治療過程中發(fā)生的不良反應(yīng)多,治療效果較差。肌腱病的發(fā)病機(jī)制目前為止還沒有一個明確的定論,肌腱的過度拉伸使用和肌腱干細(xì)胞的異常分化是肌腱病比較公認(rèn)的發(fā)生機(jī)制。富血小板血漿(Platelet-rich plasma,PRP)局部注射能夠有效地促進(jìn)跟腱組織損傷的修復(fù)。但臨床上PRP應(yīng)用不存在明確的定義,因而不同的患者、不同的醫(yī)師操作會產(chǎn)生不同的效果,甚至出現(xiàn)截然相反的結(jié)果,因此完善PRP的臨床使用規(guī)范是我們迫切需要解決的科學(xué)問題。本課題提出了三點假設(shè):第一,在常氧和低氧的條件下,PRP能促進(jìn)TSCs成腱分化;第二,PRP對兔跟腱病的修復(fù)效果具有濃度相關(guān)性;第三,PRP對兔跟腱病的修復(fù)效果與注射部位(... 

【文章來源】:甘肅中醫(yī)藥大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】:94 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮寫表
前言
第一部分 兔肌腱干細(xì)胞的分離、提取與鑒定
    前言
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器與實驗設(shè)備
        1.4 主要溶液的配制
    2 實驗方法
        2.1 兔肌腱干細(xì)胞的分離與原代培養(yǎng)
        2.2 肌腱干細(xì)胞的鑒定
    3 結(jié)果
        3.1 肌腱干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察
        3.2 克隆平板實驗結(jié)果分析
        3.3 流式細(xì)胞技術(shù)表型鑒定結(jié)果分析
        3.4 肌腱干細(xì)胞多項分化能力鑒定結(jié)果分析
        3.5 免疫熒光鑒定結(jié)果分析
    4 討論
    5 小結(jié)
第二部分 PRP在低氧環(huán)境下誘導(dǎo)TSCs成腱細(xì)胞分化的研究
    前言
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器與實驗設(shè)備
        1.4 主要溶液的配制
    2 實驗方法
        2.1 富血小板血漿(PRP)的制備及檢測
        2.2 不同濃度的PRP對 TSCs成腱分化的影響
        2.3 低氧環(huán)境下PRP對 TSCs成腱分化與凋亡的影響
        2.4 肌腱干細(xì)胞生物學(xué)特征檢測
        2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析
    3 結(jié)果
        3.1 富血小板血漿檢測結(jié)果分析
        3.2 細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果分析
        3.3 蛋白印跡法(western blot)結(jié)果分析
        3.4 RT-PCR檢測結(jié)果分析
    4 討論
    5 小結(jié)
第三部分 不同濃度PRP對兔跟腱病模型修復(fù)的療效評價
    前言
    1 材料與方法
        1.1 實驗動物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器與實驗設(shè)備
        1.4 主要溶液配制
    2 實驗方法
        2.1 建立兔跟腱損傷模型
        2.2 不同濃度的PRP治療兔跟腱病的實驗分組
        2.3 療效評價指標(biāo)
        2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析
    3 結(jié)果
        3.1 彈性定量超聲結(jié)果分析
        3.2 核磁共振(MRI)結(jié)果分析
        3.3 組織病理學(xué)結(jié)果分析
        3.4 蛋白印跡法(western blot)結(jié)果分析
        3.5 RT-PCR檢測結(jié)果分析
    4 討論
    5 小結(jié)
第四部分 PRP注射在不同部位對兔跟腱病模型修復(fù)的療效評價
    前言
    1 材料與方法
        1.1 實驗動物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器與實驗設(shè)備
        1.4 主要溶液配制
    2 實驗方法
        2.1 相同濃度的PRP注射在不同部位治療兔跟腱病的實驗分組
        2.2 療效評價指標(biāo)
        2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析
    3 結(jié)果
        3.1 彈性定量超聲結(jié)果分析
        3.2 核磁共振(MRI)結(jié)果分析
        3.3 組織病理學(xué)結(jié)果分析
        3.4 蛋白印跡法(western blot)結(jié)果分析
        3.5 RT-PCR檢測結(jié)果分析
    4 討論
    5 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
文獻(xiàn)綜述 富血小板血漿(PRP)療法在跟腱病中應(yīng)用的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]干細(xì)胞治療骨科慢性疼痛的研究進(jìn)展[J]. 祝兆琛,謝宗平.  國際骨科學(xué)雜志. 2020(01)
[2]肌腱力學(xué)生物學(xué)與運動性肌腱損傷病理機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 楊金娟,陳俊飛,支子,嚴(yán)翊.  中國運動醫(yī)學(xué)雜志. 2019(10)
[3]自體富血小板血漿治療骨關(guān)節(jié)與運動損傷疾病的機(jī)制與應(yīng)用[J]. 福嘉欣,王樹森.  中國組織工程研究. 2017(30)
[4]局部注射自體富血小板血漿聯(lián)合運動療法和局部注射曲安奈德治療跟腱病的臨床療效對比[J]. 劉步云,咸杰,孫育良,吳驍,何本祥.  四川醫(yī)學(xué). 2017(05)
[5]富血小板血漿制備方法穩(wěn)定性的研究[J]. 潘紅娟,王雅麗,呂爽,劉鐵梅.  中國實驗診斷學(xué). 2016(06)
[6]肌腱干細(xì)胞研究新進(jìn)展[J]. James H-C.Wang,周義欽.  國際骨科學(xué)雜志. 2015(03)
[7]富血小板血漿(PRP)治療技術(shù)及應(yīng)用[J]. 呂汝舉,劉美靜.  中國醫(yī)療器械信息. 2013(10)
[8]TGF-β1和VEGF在富血小板血漿治療跟腱斷裂模型中的表達(dá)及意義[J]. 伍亮,熊小龍,相大勇,倪國新,余斌.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2013(04)
[9]不同抗凝劑和激活劑聯(lián)合應(yīng)用對富血小板血漿凝膠釋放生長因子影響的比較[J]. 羅濤,李放,張寧.  中國組織工程研究. 2012(16)
[10]富血小板血漿對大鼠跟腱斷裂早期愈合的影響[J]. 熊小龍,伍亮,相大勇,倪國新,趙培冉,余斌.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2012(04)

碩士論文
[1]富血小板血漿制備技術(shù)的優(yōu)化及其組分的檢測[D]. 潘紅娟.吉林大學(xué) 2017



本文編號:3165711

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