目的:本課題應(yīng)用雙環(huán)己酮草酰二腙（Cuprizone,CPZ）誘導(dǎo)C57BL/6小鼠,建立不同時間的中樞神經(jīng)系統(tǒng)（Central nervous system,CNS）脫髓鞘模型。觀察不同CPZ喂食時間小鼠的髓鞘脫失情況、免疫反應(yīng)及膠質(zhì)細胞反應(yīng)的時空變化。試圖找到理想的藥物干預(yù)靶點,為髓鞘再生和脫髓鞘疾病的神經(jīng)保護提供理論和實驗依據(jù)。方法:本實驗采用8周齡C57BL/6雄性小鼠,建立CPZ喂食誘導(dǎo)的小鼠脫髓鞘模型。小鼠分為對照組、2周組、4周組、6周組,每組8只小鼠。正常組常規(guī)嚙齒動物標準飼料,連續(xù)飼喂6周;2周組常規(guī)嚙齒動物標準飼料先飼喂4周,然后繼續(xù)飼喂含0.2%（w/w）CPZ的混合飼料2周;4周組常規(guī)嚙齒動物標準飼料先飼喂2周,然后繼續(xù)飼喂含0.2%（w/w）CPZ的混合飼料4周;6周組含0.2%（w/w）CPZ的混合飼料,連續(xù)飼喂6周。并從造模開始記錄動物的體重。在第六周結(jié)束時處死動物,取脾臟、腦組織,分離脾臟單個核細胞（Mononuclear cells,MNCs）,將腦組織分為提取蛋白質(zhì)和固定兩部分。進行Luxol Fast Blue染色、Black Gold II染色、... 

【文章來源】：山西中醫(yī)藥大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【圖文】：

CPZ喂養(yǎng)引起髓鞘脫失的病理變化

CPZ喂養(yǎng)誘導(dǎo)的BBB損傷

CPZ誘導(dǎo)的脫髓鞘小鼠模型中膠質(zhì)細胞反應(yīng)和免疫反應(yīng)的時空動態(tài)變化研究14圖3CPZ喂養(yǎng)誘導(dǎo)中樞T細胞浸潤及其活化狀態(tài)（a）免疫熒光染色顯示CD4+T細胞在大腦中的表達。（b）用Image-ProPlus6.0定量評估CD4+T細胞的數(shù)量。（c）免疫熒光雙重染色顯示CD4+T細胞的狀態(tài)。（d）用Image-ProPlus6.0定量評估IL17+CD4+和IFN-γ+CD4+T細胞的數(shù)量。（e）Elisa法檢測腦提取液中IL-17和IFN-γ的水平。（f）實驗觀察部位的小鼠大腦位置圖。每組從3只動物獲得數(shù)據(jù)，采用Tukey-Kramer單因素方差分析，結(jié)果用均數(shù)±標準誤（mean±SEM）表示（*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，#p<0.05）。

【參考文獻】：
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碩士論文
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本文編號：3133469