發(fā)布時間：2021-04-12 08:27

　　目的:探討納米脂肪聯(lián)合鼠神經(jīng)生長因子對游離股前外側(cè)穿支皮瓣術(shù)后感覺恢復的影響及潛在治療機制,為促進皮瓣術(shù)后感覺恢復提供安全、有效的臨床治療方案及理論基礎。方法:一.臨床研究1.患者招募:制定納入、排除標準,招募已行游離股前外側(cè)穿支皮瓣術(shù)術(shù)后4月的患者16人;2.術(shù)前皮瓣感覺評估及取材:術(shù)前評估皮瓣及周圍區(qū)域痛覺、溫度覺、兩點辨別覺、觸壓覺,使用直徑為5mm打孔器獲取皮瓣皮膚組織。3.納米脂肪與鼠神經(jīng)生長因子混合物的制備:參考Tonnard的方法獲取納米脂肪,將鼠神經(jīng)生長溶液與納米脂肪以1:9比例混合。4.實驗的干預:鼠神經(jīng)生長因子注射組（N組）、納米脂肪注射組（Na組）、鼠神經(jīng)生長因子聯(lián)合納米脂肪組（NN組）、生理鹽水組（NS組）。5.術(shù)后評估:按術(shù)前方法進行皮瓣感覺評估,在術(shù)前取皮部位再次使用打孔器取材。免疫組化:通過CD31免疫組織化學染色觀察皮瓣皮膚新生血管情況,通過S100免疫組織化學染色觀察皮瓣皮膚神經(jīng)再生情況,選取5個視野后Image J軟件分別手動計數(shù)新生血管數(shù)目、陽性細胞表達的個數(shù),將感覺評估、免疫組化術(shù)前術(shù)后數(shù)據(jù)求差值,統(tǒng)計結(jié)果。二.基礎研究6.使用臨床制備的納米脂肪... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

皮瓣切取、移植術(shù)后神經(jīng)情況：A.游離皮瓣切取后皮瓣中神經(jīng)與供區(qū)完全離斷

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文張鳳玲16圖2：A.直徑為5mm的打孔器。B.注射器中黃色為納米脂肪，無色液體為鼠神經(jīng)生長因子溶液。C.注射層次為真皮深層。1.2.4注射中、后注意事項觀察皮瓣血運：1.皮瓣皮膚顏色：正常為紅潤，皮瓣缺血表現(xiàn)為蒼白。2.皮膚毛細血管充盈實驗：正常為撤除壓力后，局部皮膚顏色由白轉(zhuǎn)紅的時間≤2S，＞3S說明皮瓣皮膚供血不足。如發(fā)現(xiàn)血運問題，應急處理方案：1、立即停止注射。2、進行活血擴管等藥物治療。3、應用激素提高應激反應。4、理療。5、如術(shù)后皮膚壞死則進行換藥、促皮膚生長或者植皮等治療。1.2.5術(shù)后感覺評估及取材感覺評估：術(shù)后2月召集患者返院隨訪，由實驗員B按照術(shù)前方法對術(shù)前標記區(qū)域進行感覺評估，記錄術(shù)后皮冷熱覺恢復情況、兩點辨別覺及觸壓覺，將對應皮瓣術(shù)后與術(shù)前數(shù)據(jù)求差值，統(tǒng)計數(shù)據(jù)。取材：術(shù)者C在術(shù)前取材部位瘢痕旁使用打孔器取皮瓣皮膚。1.2.6組織學檢測免疫組化：通過CD31免疫組織化學染色檢測評估皮瓣皮膚中血管密度；通過S100免疫組化檢測來評估皮瓣皮膚神經(jīng)再生情況。步驟簡述之[55,56]：石蠟切片二甲苯兩次脫蠟，分別放入無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、75%乙醇中水化，PBS清洗10分鐘，放入3%過氧化氫溶液10分鐘，PBS清洗10分鐘，清洗兩次，再使用EDTA進行抗原修復（待高壓鍋冒氣后調(diào)低熱量再加熱20分鐘），PBS清洗5分鐘，用5%山羊血清稀釋一抗孵育（稀釋比1:250），滴加一抗，然后放入4℃冰箱過夜，20小時后拿出片子，37℃溫箱復溫，PBS清洗3次，每次10分鐘，滴加二抗工作液（HRP標記），然后放入37℃溫箱30min，PBS清洗3次，每次10分鐘，配置DAB顯色液（現(xiàn)配現(xiàn)用），滴加DAB顯色液，顯微鏡觀察見著色后立即將片子放入自來水中中止顯色，蘇木素復染5分鐘，流水清洗3分鐘，放入1%鹽酸?

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文張鳳玲202.結(jié)果2.1手術(shù)及隨訪、皮瓣感覺評估圖片16例患者手術(shù)后均無皮膚壞死。術(shù)前、術(shù)后對術(shù)前標記區(qū)進行兩點辨別覺、溫度覺及觸壓覺檢測，發(fā)現(xiàn)術(shù)前各組兩點辨別覺很差，術(shù)前NN組、N組、Na組、NS組兩點辨別覺分別為32.05±1.41、31.93±1.55、31.78±1.49、31.88±1.45，術(shù)后分別為13.33±1.39、18.50±0.88、23.03±1.29、27.38±0.82。統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示NN組兩點辨別覺恢復最好，差值為18.73±2.72，與其他組差值對比均具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。NS組恢復最差，差值為4.50±1.88，而N組與Na組差值無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）（表1）。術(shù)前NN組、N組、Na組、NS組swm規(guī)格分別為5.33±0.37、5.26±0.31、5.33±0.52、5.31±0.38，術(shù)后分別為4.09±0.56、4.68±0.29、4.67±0.34、5.12±0.39。統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示NN組觸壓覺恢復最好，SWM規(guī)格差值為1.24±0.26，與其他組差值對比均具有統(tǒng)計學意義（p＜0.05）。NS組恢復最差，差值為0.17±0.11，而N組與Na組差值無統(tǒng)計學意義（p＞0.05）（表2）。術(shù)前溫度覺均為無恢復，術(shù)后2月顯示NN組溫度覺恢復例數(shù)最多，6例恢復溫度覺，N組恢復4例，Na組恢復3例，NS組恢復最少，溫度覺僅恢復1例（表3）（圖3、4）。圖3：各組術(shù)前術(shù)后隨訪圖片。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3132983