目的:探討miR-224通過影響細(xì)胞自噬對SiHa、C33A細(xì)胞子宮頸癌裸鼠移植瘤生長的作用。方法:（1）通過細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染技術(shù)過表達(dá)及敲低子SiHa、C33 A細(xì)胞中miR-224,以流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染效率,并采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Quantitative Real-Time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR）檢測各組細(xì)胞中miR-224的表達(dá)水平。兩種細(xì)胞系各分為5組,即miR-224模擬物（miR-224 mimics）組、miR-224模擬物陰性對照（miR-224 mimics negative control）組、miR-224抑制物（miR-224inhibitor）組、miR-224抑制物陰性對照（miR-224 inhibitor negative control）組及空白對照（negative control）組。（2）用磷酸鹽緩沖液將上述10組子宮頸癌細(xì)胞配制為細(xì)胞懸液并混合基質(zhì)膠,用胰島素針吸取混合細(xì)胞懸液注射到裸鼠頸背部皮下,每個處理組5只裸鼠,觀察荷瘤鼠生命活動并估計瘤體積變化,通過腫瘤生長曲線及終止觀察時移植瘤質(zhì)量比... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

根據(jù)平均熒光強度計算轉(zhuǎn)染效率

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文9圖2-2細(xì)胞轉(zhuǎn)染后各組miR-224表達(dá)量比較2.210組裸鼠生命活動和成瘤比較（1）SiHa細(xì)胞裸鼠的miR-224mimic組瘤體出現(xiàn)時間最早，大約在子宮頸癌細(xì)胞注射第5天時頸背部出現(xiàn)包塊。至第8天時所有裸鼠頸背部均有明顯包塊形成，成瘤率為100%。即日開始測量瘤體直徑并估計瘤體積，隔日一次，兩周后終止觀察。各組荷瘤鼠的腫瘤生長曲線見圖2-3。對應(yīng)干預(yù)組別中的同一日期下，SiHa細(xì)胞所形成的裸鼠移植瘤體積大于C33A細(xì)胞（p＜0.05）。SiHa、C33A細(xì)胞裸鼠移植瘤模型分別進行5組間比較，miR-224mimic組小鼠皮下移植瘤生長迅速，隨著皮下包塊的增長，裸鼠活動量日益減少，食欲欠佳。miR-224inhibitor組荷瘤鼠皮下包塊生長較對照組相對緩慢，活動量無顯著變化，精神食欲尚可。實驗組與對照組在首次測量（第8天）時移植瘤的大小具有顯明差別，即miR-224mimic組移植瘤體積大于對照組（p＜0.05），而miR-224inhibitor組移植瘤體積小于對照組（p＜0.05），且顯著性差異持續(xù)存在。

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文10圖2-310組子宮頸癌裸鼠移植瘤生長曲線（2）觀察終止時，10組裸鼠移植瘤質(zhì)量見表2-2，差異如圖2-4所示：對應(yīng)干預(yù)組別的SiHa細(xì)胞裸鼠移植瘤的質(zhì)量大于C33A細(xì)胞裸鼠移植瘤（p＜0.05）。SiHa、C33A細(xì)胞裸鼠移植瘤模型分別進行5組間比較，miR-224mimic組裸鼠移植瘤質(zhì)量明顯大于對照組（p＜0.05），miR-224inhibitor組裸鼠移植瘤質(zhì)量明顯小于對照組（p＜0.05）。表2-2.實驗終止時10組裸鼠移植瘤質(zhì)量（x±s）組別SiHa細(xì)胞裸鼠移植瘤質(zhì)量（g）C33A細(xì)胞裸鼠移植瘤質(zhì)量（g）miR224mimic組3.48±0.663.27±0.49miR224mimicNC組1.09±0.181.93±0.12miR224inhibitor組0.36±0.050.33±0.04miR224inhibitorNC組2.13±0.221.88±0.09空白對照組1.15±0.271.96±0.17


本文編號：3128868