發(fā)布時間：2021-04-07 21:49

　　目的:通過對不同生長環(huán)境對金釵石斛化學(xué)成分的影響進(jìn)行分析,首先考察環(huán)境因素對金釵石斛國家藥典質(zhì)量控制指標(biāo)的影響規(guī)律,然后通過高通量次生代謝產(chǎn)物組學(xué)研究,考察環(huán)境因素對金釵石斛廣譜物質(zhì)基礎(chǔ)的影響規(guī)律,發(fā)現(xiàn)對次生代謝產(chǎn)物合成的關(guān)鍵性影響因素,挖掘出優(yōu)勢化學(xué)成分,并結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法對其可能影響的藥效進(jìn)行預(yù)判,為金釵石斛質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)從分析導(dǎo)向提升至藥效導(dǎo)向奠定基礎(chǔ)。方法:1.不同環(huán)境因素下石斛樣本的采集:依據(jù)產(chǎn)地、海拔、光照因素的不同,分別收集金釵石斛樣本。對采集的新鮮金釵石斛樣本的莖,進(jìn)行分離、切段、烘干、稱重、粉碎成粉末狀,過三號篩。2.金釵石斛國家藥典質(zhì)控指標(biāo)的測定:按2015版《中國藥典》方法,采用0.05%甲酸-甲醇溶液回流提取,利用氣相色譜（GC）測定樣本中石斛堿的含量,萘為內(nèi)標(biāo),火焰離子化檢測儀（FID）為檢測器,篩選影響金釵石斛中石斛堿含量的主要環(huán)境因素。3.金釵石斛中小分子次生代謝產(chǎn)物組學(xué)分析:采用超高效液相色譜四極桿時間飛行質(zhì)譜聯(lián)用儀（UPLC-Q/TOF-MS）對金釵石斛的次生代謝產(chǎn)物譜進(jìn)行高通量檢測,并結(jié)合文獻(xiàn)報道及數(shù)據(jù)庫信息進(jìn)行結(jié)構(gòu)推定,初步推測優(yōu)勢化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)。4.... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

金釵石斛樣本采集情況

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士生畢業(yè)論文陸安靜17取空白溶劑（甲醇）、內(nèi)標(biāo)溶液、對照品溶液、石斛堿內(nèi)標(biāo)混合對照品溶液及供試品溶液，按1.4.2項下色譜條件測定，結(jié)果如圖2。由圖可知，石斛堿與萘在此檢測條件下互不干擾，供試品溶液中石斛堿保留時間與對照品溶液一致，且無背景干擾，與相鄰峰分離度大于1.5，表明該方法專屬性良好。圖2專屬性考察結(jié)果Fig.2Theresultofspecificityexamination（A）空白溶劑；（B）內(nèi)標(biāo)溶液；（C）對照品溶液；（D）石斛堿內(nèi)標(biāo)混合對照品溶液；（E）供試品溶液.1.萘；2.石斛堿(A)Blanksolution;(B)Internalstandardsolution;(C)Referencesolution;(D)mixedreferencesolutionofdendrobineandinternalstandard;(E)Samplesolution1.Naphthalene;2.Dendrobine2.2.2線性范圍考察結(jié)果如圖3所示，以濃度（X）為橫坐標(biāo)，峰面積比值（對照品峰面積/內(nèi)標(biāo)物峰面積，Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.1448X-0.0137（r=0.9997），線性關(guān)系良好，表明石斛堿在0.30~50.00μg·mL-1濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士生畢業(yè)論文陸安靜18圖3線性范圍考察結(jié)果Fig.3Theresultoflinearrangeinvestigation2.2.3精密度考察結(jié)果按1.4.2項下方法制備對照品溶液，并連續(xù)進(jìn)樣6次，計算RSD值。結(jié)果見表5，RSD為0.48%，表明精密度良好。表5精密度考察結(jié)果Table.5TheresultofprecisioninvestigationIDArAsAr/As均值（%）RSD(%）1137.669140.72573.38043.380.482136.942040.91943.34663137.556940.74633.37594139.769741.20073.39245138.133640.77143.38806138.284340.96953.3753注：Ar：石斛堿內(nèi)標(biāo)混合對照品溶液中石斛堿峰面積；As：石斛堿內(nèi)標(biāo)混合對照品溶液中萘峰面積；Ar/As：石斛堿內(nèi)標(biāo)混合對照品溶液中石斛堿峰面積與萘峰面積的比值2.2.4重復(fù)性考察結(jié)果按1.4.2項下方法，平行制備6份供試品溶液，測定石斛堿含量，結(jié)果見表6。供試品溶液中石斛堿含量平均值為0.36%，RSD為1.50%，表明該方法重復(fù)性良好。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3124246