骨形態(tài)發(fā)生蛋白9（bone morphogenetic protein 9,BMP9）是已知最有潛力的干細(xì)胞骨向分化誘導(dǎo)因子之一。PTEN和Wnt10b都可以調(diào)控BMP9的成骨分化,但是它們的關(guān)系不清楚。本研究在課題組前期的工作基礎(chǔ)上,分析Wnt10b與PTEN影響B(tài)MP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞骨向分化的關(guān)系及可能的機(jī)制。本實驗采用RT-PCR、茜素紅S染色、IP、CHIP、免疫組化染色和異位成骨等實驗方法,首先分析BMP9在C3H10T1/2細(xì)胞中對PTEN和Wnt10b表達(dá)的影響,以及明確PTEN抑制BMP9誘導(dǎo)的骨向分化;然后分析BMP9和PTEN在C3H10T1/2細(xì)胞中對Wnt10b表達(dá)的影響;最后分析PTEN抑制BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞骨向分化與Wnt10b的關(guān)系,以及可能的分子機(jī)制。結(jié)果顯示,BMP9在C3H10T1/2細(xì)胞中抑制PTEN的表達(dá),但上調(diào)Wnt10b的表達(dá);外源性PTEN抑制BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞的ALP活性、早晚期成骨標(biāo)志物的表達(dá)和礦化,沉默PTEN則促進(jìn)BMP9誘導(dǎo)的作用;外源性Wnt10b可逆轉(zhuǎn)PTEN對BMP9誘導(dǎo)C3H10... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【圖文】：

PTEN內(nèi)源性mRNA在MSCs細(xì)胞中的表達(dá)情況

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文18圖1.2Wnt10b內(nèi)源性mRNA在MSCs細(xì)胞中的表達(dá)情況Fig1.2TheendogenousmRNAexpressionofWnt10binMSCs2.2在C3H10T1/2細(xì)胞中，BMP9對PTEN和Wnt10b表達(dá)的影響PCR和Westernblot結(jié)果顯示，在C3H10T1/2細(xì)胞中，BMP9能明顯減少PTEN的mRNA和蛋白水平（圖1.3和1.4)，顯著增加Wnt10b的mRNA和蛋白水平（圖1.5和1.6）。結(jié)果提示，在BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞骨向分化中，PTEN和Wnt10b可能存在相互作用。

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文19圖1.3BMP9在C3H10T1/2細(xì)胞中對PTENmRNA表達(dá)的影響(“**”p<0.01與對照組比)Fig1.3EffectsofBMP9onthemRNAexpressionofPTENinC3H10T1/2cells(“**”p<0.01vsControl)圖1.4BMP9在C3H10T1/2細(xì)胞中對PTEN蛋白表達(dá)的影響Fig1.4EffectsofBMP9ontheproteinlevelofPTENinC3H10T1/2cells

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Wnt3a協(xié)同BMP9調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化及機(jī)制研究[J]. 張曉,徐道晶,林良波,梁熙,黃偉.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2012(07)



本文編號：3093908