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載SPIO及Ce6脂質體納米粒子體外成像及對乳腺癌細胞光動力療法的實驗研究

發(fā)布時間:2021-02-24 19:43
  研究目的本研究主要使用脂質體(liposome)包裹超順磁性氧化鐵(superparamagnetic iron oxide,SPIO)合成Lipo(SPIO),對其進行體外磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI),然后再通過包裹二氫卟吩e6(Chlorin e6,Ce6)合成Lipo(SPIO-Ce6)納米粒子復合物,通過體外細胞實驗研究,探討Lipo(SPIO-Ce6)納米粒子復合物用于進行光動力療法(photodynamic therapy,PDT)的可行性。研究方法1.選用大豆磷脂和膽固醇為合成原材料,通過使用薄膜分散法制備合成獲得脂質體,在磷脂雙分子疏水層包載SPIO與Ce6,制備得到Lipo(SPIO-Ce6)。測定SPIO和Ce6的包封率;電鏡下觀察復合物形態(tài),動態(tài)光散射激光粒度儀測量復合物的粒徑分布。使用紫外可見分光光度計測量SPIO及Ce6的包封率。2.通過MRI掃描檢測Lipo(SPIO)的T2信號。設置由低到高的不同濃度梯度值的實驗組及空白對照組,使用3.0 T磁共振進行掃描并計算其T2弛豫率。3.采用CCK8細胞毒性試驗考察Li... 

【文章來源】:廣州醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

載SPIO及Ce6脂質體納米粒子體外成像及對乳腺癌細胞光動力療法的實驗研究


Ce6化學結構式

示意圖,脂質體,示意圖,光動力療法


第一章前言11圖1-2脂質體結構示意圖1.3.本研究的主要目的、意義及內容本研究通過制備具有良好生物相容性的Lipo(SPIO),實現(xiàn)MR成像,以期可應用于對腫瘤病灶的無創(chuàng)性及實時性檢測,同時,通過包載Ce6合成Lipo(SPIO-Ce6)納米粒子復合物,研究Ce6的PDT效應對乳腺癌MCF7細胞的殺傷效果。本研究通過結合分子材料學、分子影像學和細胞生物學等多學科,探討利用納米粒子復合物用于MR成像及抗腫瘤治療。分子影像學在國內外有著廣泛的基礎實驗研究,體現(xiàn)其有非常廣闊的應用前景。本研究內容包括:(1)光動力療法材料的制備采用薄膜分散法合成研究所需的脂質體,然后在脂質體內包載SPIO及Ce6,得到納米粒子Lipo(SPIO)和Lipo(SPIO-Ce6)。通過測定材料的粒徑和分布、T2弛豫率驗證材料的理化性質及穩(wěn)定性。(2)光動力療法材料用于乳腺癌的研究本研究主要對Lipo(SPIO-Ce6)的安全性進行檢測,進而研究其在體外光動力療法的效果。通過CCK-8法評估材料的生物毒性。使用熒光顯微鏡、流式細胞術檢測細胞對材料的攝取及其本身的熒光特性。對細胞進行激光照射后,通過ROS探針檢測細胞內ROS產生情況,使用CCK-8法及Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染法檢測材料在體外對腫瘤細胞進行PDT的殺傷能力。

電鏡圖,包封率,納米粒子,脂質體


第二章制備及理化性質研究15載客體分子后的脂質體粒徑增大,主要是因為疏水分子進入脂質層。TEM觀察下,空白脂質體呈球形結構,粒徑分布均勻;Lipo(SPIO-Ce6)在TEM下可以看到SPIO納米粒子均勻地分散。包封率測量實驗測得該納米粒子復合物SPIO的包封率為87%,Ce6包封率為60%。80100120140160180020406080100120Intensity(%)Diameter(nm)LipoLipo(SPIO)Lipo(SPIO-Ce6)圖2-1動態(tài)光散射測定納米粒子粒徑圖2-2透射電鏡圖(A)Liposome與(B)Lipo(SPIO-Ce6)

【參考文獻】:
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本文編號:3049857

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