人血白蛋白（Human Serum Albumin,HSA）是一種在人類的血漿中含量最為豐富的一種血漿可溶性蛋白質,在腎臟和肝細胞中進行轉化合成,本質上是一種簡單的血漿單體可溶性蛋白質,沒有任何輔基和以共價碳氫鍵形式結合的、脂質或其他碳水化合物。臨床上人血白蛋白的生物學結構性質和種類較多,包括與有機陰離子和無機陽離子的結合、與其他藥物的離子耦合、藥物的靶向、抗氧化活性和酶活性等。我國是世界上消耗人血白蛋白的第一大國,國內(nèi)產(chǎn)品供不應求。雖然我國血液制品行業(yè)發(fā)展迅速,采漿量年年穩(wěn)中有升。但是,進口人血白蛋白制品也在沖擊著國內(nèi)市場,進口制品銷售占比也在逐年增長,2018年已超過60%。目前,人血白蛋白的收率在2400-3000瓶/噸血漿,提取率僅占總白蛋白的60-70%。在提取過程中,因為多種原因造成了白蛋白的流失,其中最主要流失的地方是:組分Ⅳ（Fraction IV）沉淀。因此,從組分Ⅳ沉淀中制備人血白蛋白具有非常重要的理論意義和應用價值。本學位論文以Cohn組分Ⅳ為原料,采用低溫乙醇法,先在實驗室制備白蛋白,其中包括:考察了組分Ⅳ溶解液白蛋白溶出、組分Ⅳ-1分離條件、組分Ⅳ-2分離條件... 

【文章來源】：山西大學山西省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

人血白蛋白分子結構[3]

第二章從組分IV沉淀中分離提純?nèi)搜椎鞍椎墓に囇芯?4圖2.2組分IV溶解液電泳掃描Figure2.2ElectrophoresisscanningofFractionIVlysate鑒于組分IV沉淀中含有一定的凝血酶原和金屬離子，為了不引起凝血效應，我們選擇了含有枸櫞酸鈉、氯化鈉的乙醇溶液作為組分IV沉淀的溶解液。通過對組分IV沉淀在不同溫度、不同溶解倍數(shù)、不同乙醇濃度條件下，對組分IV沉淀中蛋白質的溶出做了試驗。本試驗采用（L934）[42]正交試驗考察3因數(shù)3個水平，按表2.2和表2.3配組進行正交試驗，對組分IV的溶解液白蛋白溶出率的影響。為減少測量蛋白質含量過程中對實驗結果的影響，以上條件溶解后均采用0.22μm濾膜將樣品過濾，準確計量上清液體積，再對上清進行蛋白質含量和純度的檢測。根據(jù)純度結果，計算出上清液中白蛋白，白蛋白的值作為試驗結果并進行方差分析。1.3.2組分IV-1分離的最佳條件選擇按照選取出組分IV溶解最佳條件，另取同批混合的組分IV溶解液，分成9份，每份100ml，按表2.5和表2.6配組進行正交試驗。每份樣品反應結束后繼續(xù)攪拌2小時，靜置4小時，再對9份樣品進行0.22μm濾膜過濾，過濾上清為組分IV-1上清，準確計量體積后，取樣測蛋白質含量和純度，計算出組分IV-1上清中白蛋白的量，以白蛋白的量作為試驗結果并進行方差分析。

第二章從組分IV沉淀中分離提純?nèi)搜椎鞍椎墓に囇芯?0圖2.3不同濃度的氯化鈉溶液透析對白蛋白溶液中鋁離子含量的影響Figure2.3EffectofDifferentConcentrationsofSodiumChlorideSolutiononAluminumIonContentinAlbuminSolution3討論3.1工藝最佳條件的確定由于組分IV沉淀蛋白質種類多，與白蛋白沉淀相似的雜蛋白也較多，結構復雜，PKA含量高，組分IV沉淀作為起始材料，在實驗室獲得成功的實驗有時難以放大至生產(chǎn)規(guī)模。通過大量的試驗數(shù)據(jù)對比，同時，也為了驗證所選取最佳條件組合的效果，我們逐步確定了從組分IV沉淀中提取分離人血白蛋白的生產(chǎn)流程，以低溫乙醇法為分離主要方法，經(jīng)超濾、巴氏病毒滅活，獲得在同類藥品內(nèi)在的高質量，安全性、穩(wěn)定性符合消費者預期的生物制品。組分IV沉淀溶解的最佳條件為pH值6.4、乙醇濃度25%，溫度0℃，其中影響因素最大的為pH值和乙醇濃度；組分IV-1的分離的最佳條件為pH值6.4、乙醇濃度38%，溫度-5.5℃，其中影響因素最大的為pH值；組分IV-2的分離的最佳條件為pH值5.7、乙醇濃度42%，溫度-6.0℃，其中影響因素最大的為pH值。3.2降低人血白蛋白制品中鋁離子的含量應用低溫乙醇法制備的人血白蛋白，由于乙醇、助濾劑、原輔料會引入乙醇、金屬離子等，為了達到靜脈注射的要求，脫鹽、脫醇就顯得很有必要。目前，國內(nèi)

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3047091