發(fā)布時間：2017-12-24 22:19

  本文關鍵詞：線粒體融合蛋白2表達下調對于多柔比星誘導的心肌細胞凋亡的影響　出處：《江蘇大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： 心肌細胞凋亡 多柔比星 線粒體融合蛋白2 線粒體活性氧族成分

【摘要】：背景多柔比星(Doxorubicin,DOX)是一種臨床上廣泛使用且效果顯著的抗腫瘤藥物,然而它的臨床應用卻受限于其心肌毒性,即能通過尚未明確的機制誘導心衰。線粒體融合蛋白2(Mitofusin2,Mfn2)是一種橫跨于線粒體外膜且具有GTP酶活性的蛋白,通過細胞內復雜的信息交流調控線粒體的融合過程。目的探索心肌細胞內Mfn2表達下調在多柔比星誘導的心肌細胞凋亡過程中的作用。方法本實驗用的是培養(yǎng)的原代心肌細胞,來源于1到3天內出生的Sprague Dawley(SD)大鼠。建立多柔比星誘導的心肌細胞凋亡模型,實驗組然后分為3組,DOX組和Mfn2轉染處理組以及Mitotempo預處理組,以正常心肌細胞作為對照組,對照組不做任何處理,Mfn2轉染組先在心肌細胞內轉入Mfn2激活質粒然后再用DOX處理,Mitotempo預處理組先用Mitotempo預處理1小時然后再用DOX處理。用免疫蛋白印跡法(Western Blotting,WB)檢測心肌細胞中Mfn2的表達。分別用DCFDA法和線粒體特異性熒光染料MitoSOX檢測心肌細胞內和線粒體中的活性氧族成分(Reactive oxygen species,ROS)。通過檢測心肌細胞內Caspase3的活性和TUNEL染色法兩種手段來檢測心肌細胞的凋亡。結果1.DOX誘導心肌細胞產生大量的ROS并且誘導了心肌細胞的凋亡。2.與此同時,在DOX的刺激下,心肌細胞中Mfn2含量的表達也隨之下降。增加心肌細胞中Mfn2的表達可以抑制心肌細胞線粒體中有害活性氧成分的升高。3.增加心肌細胞內Mfn2的表達和使用線粒體特異性抗氧化劑Mitotempo均能夠減少DOX誘導的心肌細胞凋亡。結論在DOX誘導的心肌細胞凋亡中,心肌細胞Mfn2的表達下調發(fā)揮了重要的作用,這一作用的實現(xiàn)與心肌細胞內損害性活性氧的產生有關;線粒體特異性抗氧化劑Mitotempo能抑制D0X誘導的心肌細胞凋亡。
【學位授予單位】：江蘇大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R96

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本文編號：1330188