本文關(guān)鍵詞：EGCG對甲狀腺乳頭狀癌細胞的作用及其機制研究　出處：《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:本文旨在探討表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)對甲狀腺乳頭狀癌細胞的作用,及其對凋亡、自噬和細胞氧化還原平衡調(diào)節(jié)的相關(guān)機制研究。方法:1.甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1、甲狀腺上皮細胞Nthy-ori 3-1經(jīng)不同濃度的EGCG(0、5、10、20、40μmol/L)處理24、48 h后,MTT法檢測細胞增殖能力的變化,確定最佳EGCG作用時間及IC50(50%抑制濃度)值(經(jīng)Graphpad軟件計算EGCG IC50值約為17.2μmol/L)。2.甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1經(jīng)EGCG(0μmol/L)、3-MA(0.3 mmol/L)、EGCG(17.2μmol/L)、EGCG(17.2μmol/L)聯(lián)合3-MA(0.3 mmol/L)共同作用48 h后,MTT法檢測甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1增殖能力以及凋亡水平的變化。3.甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1經(jīng)EGCG(0、17.2μmol/L)處理24 h后,PI染色,流式細胞術(shù)檢測細胞周期的變化。4.甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1經(jīng)EGCG(0、17.2μmol/L)處理48 h后,流式細胞術(shù)檢測細胞內(nèi)ROS表達量的變化。5.甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1經(jīng)EGCG(0、17.2μmol/L)處理48 h后,Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2、Cyt c、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP,以及自噬相關(guān)蛋白LC3B-II、p62表達量的變化。6.甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1經(jīng)EGCG(0、17.2μmol/L)處理(0、15、30、60 min)后,Western blot檢測p-AKT、p-mTOR、t-AKT、t-mTOR蛋白表達量的變化。結(jié)果:1.EGCG抑制甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1的增殖,呈現(xiàn)時間和濃度依賴性(P0.001)。EGCG對正常甲狀腺上皮細胞Nthy-ori 3-1的增殖能力沒有影響。2.與實驗對照組相比,經(jīng)EGCG(17.2μmol/L)處理后,甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1的凋亡率明顯增加(P0.01),ROS表達水平明顯下降(P0.05)。凋亡相關(guān)蛋白Bax表達明顯增加(P0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表達明顯下降(P0.01),凋亡相關(guān)蛋白Cytc(P0.05)、cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-9、cleaved-PARP表達明顯上調(diào)(P0.05)。3.與實驗對照組相比,經(jīng)EGCG(17.2μmol/L)處理后,甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1出現(xiàn)明顯的S期阻滯現(xiàn)象(P0.01)。同時細胞周期S期的相關(guān)蛋白cyclinA表達顯著下降(P0.01),CDK2表達顯著下降(P0.01)。4.與實驗對照組相比,經(jīng)EGCG(17.2μmol/L)處理后,甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1自噬相關(guān)蛋白LC3B-II表達明顯增加(P0.01),P62表達明顯下降(P0.05),自噬相關(guān)信號通路p-AKT、p-mTOR水平明顯下調(diào)(P0.05)。自噬抑制劑3-MA(0.3mmol/L)聯(lián)合EGCG(17.2μmol/L)處理后,與EGCG(17.2μmol/L)單獨處理組相比,甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1的增殖率顯著下調(diào)(P0.05),同時凋亡率顯著上調(diào)(P0.01)。結(jié)論:1.EGCG能夠抑制甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1的生長。2.EGCG能夠下調(diào)甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1內(nèi)ROS水平,并誘導(dǎo)甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1凋亡。3.EGCG能夠促進甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1周期阻滯在S期。4.EGCG通過下調(diào)AKT/mTOR信號通路誘導(dǎo)甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1的自噬。
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R736.1

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 Shu-min LIU;Shi-yi OU;Hui-hua HUANG;;茶多酚對人乳腺癌細胞MCF-7凋亡的影響及其機制研究（英文）[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2017年02期

2 徐曉琴;韓存芝;張文麗;王艷;孫婷;田保國;荊結(jié)線;;2001年-2010年山西省腫瘤醫(yī)院甲狀腺癌住院患者分析[J];中國病案;2017年01期

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本文編號：1310457