鈍刺血蜱(Haemaphysalis doenitzi)主要分布于中國的福建、云南、臺灣等地,多寄生在鳥類和小型哺乳動物體表上,能攜帶巴貝斯蟲等多種病原體,對野生動物和人類造成嚴重危害。防御素(defensin)具有抵抗外來病原體的生物活性,在蜱類先天免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。本研究以鈍刺血蜱為研究對象,通過基因克隆得到5條防御素基因序列,對其進行生物信息學分析(蛋白序列、同源性、理化性質以及三維結構),并對原核表達的重組蛋白進行功能研究(抑菌活性、抗氧化活性、溶血活性)。將5條基因分別命名為Hd-defensin-1、Hd-defensin-2、Hd-defensin-3、Hd-defensin-4、Hd-defensin-5,其開放閱讀框分別為246bp、225bp、225bp、210bp和225bp;編碼氨基酸個數(shù)為88、74、74、69和74;成熟肽長度為48、38、38、38和38;等電點大小為7.47、8.73、11.51、7.47和9.65。與NCBI中的不同蜱源防御素進行比對,同源性均達到60%以上,其中Hd-defensin-1和Hd-defensin-2與長角血蜱的防御...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2.3不同蜂種與Hddefsnxin-I-S防御素蛋白序列對比

132.2.2.3理化參數(shù)的分析根據(jù)擴增到的基因全長對其進行信號肽的預測（見圖2.4）及理化性質分析（見表），包括以下幾個方面：開放閱讀框大小、氨基酸個數(shù)、信號肽氨基酸個數(shù)、成熟肽酸個數(shù)以及成熟肽的等電點。結果表明5條基因等電點均高于7，屬于陽離子肽。Hd-defen....

圖2.5蛋白模型預測

抵抗外來微生物具有免疫特性的小分子多肽，最pia)，之后從細菌到哺乳動物都有發(fā)現(xiàn)。防御素是，蜱源防御素首次由JohnsR等在變異革蜱的血。目前收錄在NCBI的蜱類防御素主要為硬蜱科的硬蜱屬、革蜱屬、花蜱屬、鈍緣蜱屬和璃眼蜱屬御素基因，其它血蜱均未報道。有關鈍刺血蜱的對防....

圖3₁PE}SY-TI-d}ffensin-3;5酶切電泳圖

24圖3.2Defensin-pET-32(a+）轉入BL21中菌液PCR電泳圖M：DNA分子量標準S1、S2：目的基因Fig.3.2Electeophoretogramofdefensin-pET-32(a+）plasmidintoBL21byP....

圖3.2Defensin-pET-32(a+）轉入BL21中菌液PCR電泳圖

24圖3.2Defensin-pET-32(a+）轉入BL21中菌液PCR電泳圖M：DNA分子量標準S1、S2：目的基因Fig.3.2Electeophoretogramofdefensin-pET-32(a+）plasmidintoBL21byP....

本文編號：4030855