Notch信號(hào)通路在生物的生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要功能。近年來(lái),其在骨發(fā)育及再生中的作用受到國(guó)內(nèi)外越來(lái)越多的重視。目前研究表明,除經(jīng)典的膜蛋白配體(Jagged1,Jagged2,DLL1,DLL3,DLL4)外,Notch信號(hào)通路還有一種分泌型配體存在:CCN3,又稱腎母細(xì)胞瘤過(guò)表達(dá)因子(nephroblastoma overexpressed,NOV),并在各種生命活動(dòng)中起到不可或缺的作用。我們的前期研究結(jié)果表明,DLL1(經(jīng)典的膜蛋白配體)激活的Notch信號(hào)可促進(jìn)骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的成骨分化,這一過(guò)程是通過(guò)BMP信號(hào)通路進(jìn)行的,而CCN3抑制MSCs的成骨分化。那么,CCN3作為Notch信號(hào)的一種分泌型配體,是如何與膜蛋白配體DLL1分別發(fā)揮不同作用,影響MSCs成骨分化的呢?二者對(duì)于MSCs的細(xì)胞增殖又起到怎樣的作用呢?本研究擬針對(duì)上述問(wèn)題,探討CCN3協(xié)同DLL1調(diào)控MSCs成骨分化與增殖的機(jī)制,尋找CCN3及相關(guān)蛋白在骨組織工程中的臨床應(yīng)...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1ALP染色（A）及免疫組化（B）驗(yàn)證CCN3抑制MEFs成骨分化，DLL1促進(jìn)成骨分化

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文23圖1-1ALP染色（A）及免疫組化（B）驗(yàn)證CCN3抑制MEFs成骨分化，DLL1促進(jìn)成骨分化。Fig.1-1ALPstaining(A)andimmunohistochemistry(B)verifiedthatCCN3inhibitedMEF....

圖1-2ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DLL1對(duì)CCN3表達(dá)的影響

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文使用Ad-DLL1或Ad-RFP腺病毒處理MEFs，細(xì)胞培養(yǎng)至第3d時(shí)收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液，通過(guò)ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CCN3的表達(dá)。結(jié)果顯示，DLL1組CCN3的濃度為0.96ng/ml，低于RFP組（1.34....

圖1-3qRT-PCR（A）及ELISA實(shí)驗(yàn)（B）檢測(cè)BMP9對(duì)CCN3表達(dá)的影響

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文25圖1-3qRT-PCR（A）及ELISA實(shí)驗(yàn)（B）檢測(cè)BMP9對(duì)CCN3表達(dá)的影響。與對(duì)照組相比，*P<0.05。Fig.1-3TheinfluenceofBMP9onCCN3expressionwasdetectedbyqRT-PCR(A)an....

圖1-4ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MEFs中CCN3的基礎(chǔ)表達(dá)量

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文26成骨分化的影響，我們檢測(cè)了不同處理下MEFs中CCN3的濃度。首先，我們將MEFs鋪板，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至40%（細(xì)胞數(shù)×10）、80%（細(xì)胞數(shù)×10）及100%（細(xì)胞數(shù)×10）密度時(shí)，分別收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液，通過(guò)ELISA實(shí)驗(yàn)測(cè)定CCN3蛋白的濃度。....

本文編號(hào)：4033744