R環(huán),一種由DNA-RNA形成的雜合鏈和一條游離狀態(tài)的單鏈DNA共同組成的三鏈結構。形成R環(huán)的因素有很多種,由于轉錄過程中缺少DNA-RNA的解旋酶或者轉錄形成的RNA沒有被及時的加工,都會導致R環(huán)的產(chǎn)生。早期研究發(fā)現(xiàn)R環(huán)的產(chǎn)生會導致DNA損傷積累和基因組穩(wěn)定性下降,并且在一些癌癥的相關研究中發(fā)現(xiàn)許多與R環(huán)相關的基因都存在異常表達。隨著對R環(huán)的探索不斷深入,研究發(fā)現(xiàn)R環(huán)在正常生物體內普遍存在,不僅是在高等動物,在酵母、大腸桿菌中也發(fā)現(xiàn)R環(huán)的存在。目前研究認為雖然R環(huán)在癌癥的發(fā)生發(fā)展具有一定的促進作用,但是一些正常的生理活動也離不開R環(huán)的調節(jié)。R環(huán)與一些疾病之間的聯(lián)系并不像癌癥基因與疾病那么明顯,R環(huán)促進疾病與癌癥發(fā)生的原因主要是R環(huán)的特殊結構間接導致。R環(huán)的特殊結構會引起DNA雙鏈斷裂(DSB)、基因重組,并且在轉錄過程中R環(huán)還會介導轉錄的不正常延長。研究發(fā)現(xiàn),在轉錄過程中形成R環(huán)之后,為了維持轉錄與DNA復制的正常進行,XPF和XPG兩種核酸內切酶會將R環(huán)從DNA雙鏈上切除下來,這就導致DNA雙鏈斷裂。同時,如果轉錄過程中形成的R環(huán)沒有被正確的切除或者降解,將會增加后續(xù)DNA復制壓力,...

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【學位級別】：碩士

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圖5-4siRNA敲低SC35與WAC同時加DOX處理后DNA損傷變化

R環(huán)與DNA損傷上海師范大學碩士學位論文36圖5-2siRNA敲低SC35與WAC后DNA損傷變化5.4.2siRNA與DOX共同處理組我們用siRNA處理U2OS細胞，分別敲低SETX、RNF20、SC35、WAC，，同時用DOX處理，再用γH2AX抗體進行染色。實驗結果如圖5....

圖6-2WAC的DRIP實驗結果

上海師范大學碩士學位論文WAC與SC35影響R環(huán)的具體位點43SC35在轉錄過程中共同維持轉錄的正常進行并抑制R環(huán)的產(chǎn)生。實驗結果及P21引物區(qū)域如圖6-1與6-2、6-3所示。圖6-1P21圖6-2WAC的DRIP實驗結果圖6-3SC35的DRIP實驗結果6.5本章小結我們用s....

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