【摘要】： 阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，簡稱AD)是病因未明的原發(fā)性神經(jīng)退行性疾病(neurodegenerative disease)，可以導(dǎo)致學(xué)習(xí)和記憶力的下降。Macelignan為從印度尼西亞的植物Myristica fragrans Houtt(Myristicaceae)提取的天然的、無毒副作用的單體成分。傳統(tǒng)上，Myristica fragrans Houtt用于食物佐料和治療齲齒等牙病上。本研究為了探討Macelignan對阿爾茨海默病的作用機(jī)制，采用分子生物學(xué)技術(shù)、神經(jīng)行為學(xué)和免疫組織化學(xué)方法，為天然藥物Macelignan的開發(fā)和應(yīng)用提供了有效的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。 本實(shí)驗(yàn)在體外運(yùn)用Western blot技術(shù)檢測了脂多糖和Macelignan對誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、環(huán)氧合酶2(COX-2)、磷酸化的p38、p38、cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)、核轉(zhuǎn)錄因子kB p65(NF-kB p65)等蛋白表達(dá)的影響，探討其神經(jīng)炎癥病變的細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑和Macelignan在谷氨酸的細(xì)胞毒性作用下的神經(jīng)保護(hù)作用。在體外實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，動(dòng)物第四腦室內(nèi)注入脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)制備老年癡呆動(dòng)物模型，術(shù)后給予Macelignan(10mg／kg／日)灌胃，利用Morris水迷宮測試方法檢測了脂多糖和Macelignan對Fischer-344大鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響，并運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測所制備的動(dòng)物模型的腦病理變化。 本研究的主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1．各濃度組Macelignan處理神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞BV2細(xì)胞后，利用WST-8試劑盒檢測了其細(xì)胞生存率變化，與對照組之間無顯著性差異。 2．倒置顯微鏡觀察結(jié)果表明，用5μg／ml谷氨酸處理的BV2細(xì)胞發(fā)生腫脹，，細(xì)胞間接觸稀疏，增殖減慢，細(xì)胞周圍碎片增多。而Macelignan—谷氨酸復(fù)合處理組細(xì)胞生長旺盛，細(xì)胞間結(jié)構(gòu)緊密，與對照組細(xì)胞無形態(tài)上的差異。 3．Western blot檢測驗(yàn)結(jié)果表明，Macelignan可以抑制脂多糖所誘導(dǎo)的iNOS、COX-2、磷酸化的p38和CREB等蛋白的表達(dá)，LPS組與對照組之間、Macelignan組與LPS組之間有顯著性差異，P＜0.05。 4．Western blot檢測結(jié)果表明，LPS與Macelignan對各組之間NF-kBp65表達(dá)無顯著性差異。 5．動(dòng)物神經(jīng)行為學(xué)測試結(jié)果，Macelignan可以抑制LPS所導(dǎo)致的逃避潛伏期的延長，第三個(gè)循環(huán)開始LPS模型組與對照組之間(P＜0.01)、Macelignan組與LPS模型組之間有顯著性差異(P＜0.05)。Probe檢測結(jié)果，Macelignan組與LPS組在藏有平臺(tái)的1／4象限內(nèi)游泳的時(shí)間有顯著性差異(P＜0.05)。 6．免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果，Macelignan可以抑制LPS所誘導(dǎo)的被OX-6染色的活化的小膠質(zhì)細(xì)胞。 以上結(jié)果提示： 1．Macelignan在體內(nèi)可以抑制LPS所誘導(dǎo)的動(dòng)物的空間學(xué)習(xí)和記憶功能的損害，并抑制了谷氨酸的細(xì)胞毒性作用，具有神經(jīng)保護(hù)作用。 2．Macelignan在體內(nèi)可以抑制LPS所誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，并抑制了BV2細(xì)胞在LPS誘導(dǎo)下產(chǎn)生的COX-2的表達(dá)，對神經(jīng)退行性疾病具有抗炎作用。 3．Macelignan抑制了BV2細(xì)胞在LPS誘導(dǎo)下產(chǎn)生的iNOS的表達(dá)，具有很好的抗氧化作用。 4．Macelignan抑制了BV2細(xì)胞在LPS誘導(dǎo)下產(chǎn)生的p-p38、CREB的表達(dá)。LPS和Macelignan是通過作用于MAPK信號通路調(diào)節(jié)炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生。 5．Macelignan不通過NF-kB信號通路調(diào)節(jié)炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生。 6．Macelignan作用于神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞，具有抗炎、抗氧化作用及其神經(jīng)保護(hù)作用，具有很好的開發(fā)潛能。
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R749.16

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 才志剛;張紹明;張珩;周宜勇;吳海波;徐小平;;脂多糖誘發(fā)小鼠急性肺損傷microRNA-199a表達(dá)及其對基因表達(dá)的調(diào)控[J];華南國防醫(yī)學(xué)雜志;2011年04期

2 蘇蕓;謝澤鋒;許燕璇;辛崗;李康生;;脂多糖刺激星形膠質(zhì)細(xì)胞SOCS-3及促炎性細(xì)胞因子的表達(dá)[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2011年07期

3 陳莉;Rachel J Waddington;Alastair J Sloan;;脂多糖刺激小鼠成骨細(xì)胞表達(dá)白細(xì)胞介素-23的實(shí)驗(yàn)研究[J];北京口腔醫(yī)學(xué);2011年03期

4 郭建紅;楊麗紅;;脂多糖對非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝細(xì)胞凋亡的影響[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年07期

5 徐婧秋;吳麗萍;;脂多糖和白細(xì)胞介素-1β對人牙周膜細(xì)胞中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的影響[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年04期

6 王瑛;;氣道滴入加煙熏法建立慢性支氣管炎大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究[J];實(shí)用醫(yī)藥雜志;2011年07期

7 張金良;任懂平;呂新亮;;D-半乳糖胺/脂多糖誘導(dǎo)急性肝衰竭機(jī)制的研究進(jìn)展[J];武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年09期

8 李淑芬;孫國瑛;周勇;周慧芳;段佳熙;管茶香;;TREM-2對小鼠肺成纖維細(xì)胞凋亡的影響[J];國際病理科學(xué)與臨床雜志;2011年04期

9 姜輝;高家榮;劉新平;韓燕全;;三七總皂苷抗小鼠免疫性肝損傷的研究[J];中藥藥理與臨床;2011年04期

10 李承峰;焦光宇;劉春利;;緊密連接蛋白在脂多糖致急性肺損傷大鼠肺組織的表達(dá)[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2011年15期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 李志明;馬健飛;丁紅;張靖華;樊怡;;脂多糖對大鼠腹膜間皮細(xì)胞腫瘤壞死因子表達(dá)的影響[A];“中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2004年年會(huì)”暨“第二屆全國中青年腎臟病學(xué)術(shù)會(huì)議”論文匯編[C];2004年

2 李曉捷;楊智權(quán);呂智海;;早期干預(yù)對宮內(nèi)感染致腦損傷仔鼠大腦中OMgp表達(dá)的影響[A];第三屆全國兒童康復(fù)學(xué)術(shù)會(huì)第十屆全國小兒腦癱學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

3 李永塘;侯永清;丁斌鷹;劉玉蘭;朱慧玲;劉堅(jiān);王蕾;;α-酮戊二酸對免疫應(yīng)激斷奶仔豬肝臟蛋白質(zhì)合成的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

4 石君霞;劉玉蘭;晁金;魯晶;趙勝軍;朱惠玲;侯永清;丁斌鷹;;LPS刺激對斷奶仔豬下丘腦-垂體-腎上腺軸PPARγ表達(dá)的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

5 范偉;劉玉蘭;朱惠玲;侯永清;丁斌鷹;瞿永華;;PPAR-γ激活對脂多糖刺激的斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)和功能的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

6 劉玉蘭;黃晶晶;侯永清;朱惠玲;丁斌鷹;范偉;;L-精氨酸對脂多糖刺激斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)和功能的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

7 唐文紅;倪文;鄧小明;;丙泊酚對脂多糖刺激人單核細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響[A];2008年第七次華東六省一市麻醉學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省麻醉學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編（下冊）[C];2008年

8 岳峗;孫蘭;楊京;劉景生;;17-β雌二醇對脂多糖誘導(dǎo)的大鼠原代成骨細(xì)胞凋亡的影響[A];第八屆全國生化藥理學(xué)術(shù)討論會(huì)暨第七屆Servier獎(jiǎng)?lì)C獎(jiǎng)大會(huì)會(huì)議摘要集[C];2003年

9 王小平;王麗琴;張軍;余優(yōu)成;;氯化鑭對脂多糖誘導(dǎo)人牙齦成纖維細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素-8的影響[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)第六屆全國口腔黏膜病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2004年

10 李玉鳳;吳純啟;廖明陽;;細(xì)菌脂多糖對氯丙嗪肝毒性作用的影響[A];中國毒理學(xué)會(huì)第四屆全國學(xué)術(shù)會(huì)議論文（摘要）集[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 王力;喝茶有助防癌[N];中國礦業(yè)報(bào);2001年

2 上海師范大學(xué)工程食品研究所功能與復(fù)合食品添加劑研究室 胡國華 馬正智 吳彬;米糠多糖：多種功能提升開發(fā)價(jià)值[N];中國食品報(bào);2008年

3 聞?dòng)?英國發(fā)明用浸量尺檢測沙眼的方法[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

4 記者 張紅玲;茶水煮飯好處多[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

5 趙永春;治病茶方[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2008年

6 壽柏泉;看電視多喝茶[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

7 葉子;熒屏前常飲茶[N];保健時(shí)報(bào);2003年

8 保健時(shí)報(bào)特約記者 蔣月榮;白領(lǐng)麗人護(hù)眼寶典[N];保健時(shí)報(bào);2006年

9 王青蓮;電磁輻射環(huán)境中如何保健[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2006年

10 副主任醫(yī)師 林利華;三種益壽古方[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 羅海波;LPS模擬肽疫苗誘導(dǎo)保護(hù)性免疫應(yīng)答的研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

2 高玉興;空腸彎曲菌脂多糖成分對周圍神經(jīng)致病機(jī)理研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2001年

3 張德明;脂多糖結(jié)合蛋白多抗對內(nèi)毒素急性肺損傷大鼠肺泡巨噬細(xì)胞TLR4信號通路的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

4 蔣學(xué)風(fēng);NAC對感染性早產(chǎn)LPS/NF-κB信號通路及孕激素受體亞型的影響[D];四川大學(xué);2005年

5 溫安祥;谷氨酰胺緩解中華鱉免疫應(yīng)激反應(yīng)作用機(jī)理的研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

6 崔春愛;Macelignan對阿爾茨海默病作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];延邊大學(xué);2007年

7 侯一峰;脂多糖結(jié)合蛋白對內(nèi)毒素性肺損傷的調(diào)節(jié)作用及機(jī)理研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2001年

8 王曉東;人N端脂多糖結(jié)合蛋白（tLBP）基因的克隆表達(dá)及保護(hù)作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

9 徐德斌;脂多糖結(jié)合蛋白功能位點(diǎn)分析及其抑制性多肽的篩選[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

10 張養(yǎng)東;脂多糖對泌乳奶牛乳脂肪和乳蛋白影響及其機(jī)理研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張文涵;不同劑量沐舒坦對內(nèi)毒素所致大鼠急性肺損傷的阻遏作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

2 趙瑋;Toll樣受體4在大鼠、小鼠急性肺損傷時(shí)的表達(dá)及藍(lán)桉油和糖皮質(zhì)激素對大鼠Toll樣受體4表達(dá)的影響[D];浙江大學(xué);2006年

3 張文輝;核仁素對LPS所致炎癥因子IL-1β釋放的影響[D];中南大學(xué);2008年

4 李鐵英;糖尿病大鼠肺泡巨噬細(xì)胞TLR4的表達(dá)及對LPS反應(yīng)性的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

5 吳妍雯;吸入不同濃度NO對LPS所致大鼠急性肺損傷TLR4表達(dá)的影響[D];華中科技大學(xué);2008年

6 張曉靜;硫化氫對脂多糖誘導(dǎo)離體大鼠肺動(dòng)脈反應(yīng)性變化的影響及其與一氧化碳的關(guān)系[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

7 王春艷;PKC在CCK-8調(diào)節(jié)RAW264.7細(xì)胞CD14表達(dá)中的作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

8 姚琳;EGCG對LPS誘導(dǎo)的p38 MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用研究[D];南京師范大學(xué);2005年

9 王曉穎;脂多糖治療奶牛子宮內(nèi)膜炎過程中相關(guān)因子的變化研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

10 李強(qiáng);脂多糖體外誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

本文編號：2646453