本文關(guān)鍵詞：家蠶蛹表達(dá)人生長(zhǎng)激素蛋白及其生物活性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 博士學(xué)位論文 家蠶蛹表達(dá)人生長(zhǎng)激素蛋白及其生物活性的研究 姓名：藍(lán)航蓮 申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士 專(zhuān)業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué) 指導(dǎo)教師：張耀洲 座機(jī)電話(huà)號(hào)碼 浙江大學(xué)博：l：論文 中文摘要 人生長(zhǎng)激素 hGH 是由人垂體前葉細(xì)胞分泌的一種多肽類(lèi)激素，對(duì)機(jī)體的 組織、器官以及各種代謝活動(dòng)都起著重要的生理功能。本試驗(yàn)首先構(gòu)建了重組質(zhì) mMIPTG在大腸桿菌中誘導(dǎo)帶rhGH融合蛋白的 粒pET28a--hGH，經(jīng)終濃度為1 表達(dá)，，融合蛋白帶有His6標(biāo)簽；純化得到無(wú)生物活性的融合蛋白作為抗原免疫雄 性新西蘭大白兔，收集抗血清后采用硫酸銨沉淀方法純化多克隆抗體；抗血清的 效價(jià)為l：25600；Westemblot結(jié)果顯示多克隆抗體存在較高的特異性，以rhGH 為抗原制得的抗體也可以和hGH蛋白發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)。高效抗一hGH多克隆 抗體的制備為下游的工作奠定了基礎(chǔ)。 昆蟲(chóng)桿狀病毒是與原核、酵母以及哺乳動(dòng)物細(xì)胞系統(tǒng)并存的表達(dá)外源蛋白的 一類(lèi)重要表達(dá)系統(tǒng)，因其可以高效表達(dá)有活性的外源蛋白而被廣泛應(yīng)用。家蠶桿 狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是昆蟲(chóng)桿狀病毒的重要組成部分，本試驗(yàn)利用該系統(tǒng)在受體家蠶 細(xì)胞和蠶蛹中合成hGH。利用共轉(zhuǎn)染技術(shù)攜帶有hGH基岡的重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒 組，產(chǎn)生有插入hGH基因的重組家蠶桿狀病毒；利用空斑分析以及l(fā)ac―z基因的 hGH基因。TCID50檢測(cè)重組病毒的滴度為6．0×108PFU／ml；家蠶細(xì)胞感染 vBmhGH表達(dá)rhGH，最大表達(dá)量為約

  本文關(guān)鍵詞：家蠶蛹表達(dá)人生長(zhǎng)激素蛋白及其生物活性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。