球形棕囊藻（Phaeocystis globosa Scherffel）頻繁出現(xiàn)在我國(guó)南部沿海水域，嚴(yán)重影響生態(tài)系統(tǒng)安全和人體健康。棕囊藻爆發(fā)性增殖時(shí)會(huì)產(chǎn)生巨大數(shù)目的膠質(zhì)、糖和溶血毒素，同時(shí)消耗大量溶解氧，造成魚類大面積死亡，其釋放的二甲基丙磺酸(DMSP)和二甲基硫醚(DMS)對(duì)海洋生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生較大的影響，也是形成酸雨的影響因素之一，因而棕囊藻赤潮的有效治理成為亟待解決的問題。本論文以“菌治藻”為思路，以廣東沿海發(fā)生頻率高、范圍廣的赤潮原因種球形棕囊藻為主要研究對(duì)象，從珠海赤潮高發(fā)區(qū)海域采集水樣，從中篩選高效的海洋溶藻細(xì)菌，開展溶藻細(xì)菌的分子生物學(xué)研究，溶藻作用方式探討、溶藻前后藻形態(tài)的變化、溶藻細(xì)菌胞外活性物質(zhì)分離的理化性質(zhì)，推測(cè)溶藻可能發(fā)生機(jī)理，旨在為球形棕囊藻的生物防治提供一定的理論依據(jù)及實(shí)踐基礎(chǔ)，主要結(jié)論如下： （1）從分離純化得到的17株細(xì)菌中篩選出溶藻效果最好的一株B1，溶藻率達(dá)95.6%，平板觀察細(xì)菌B1菌落呈圓形，直徑3~4mm，稍有隆起，邊緣整齊，表面光滑濕潤(rùn)有光澤，乳白色不透明，為革蘭氏陽性（G+）菌，單個(gè)排列，桿狀。電鏡觀察下菌體為桿狀，大小為0.7~0.8μm×2.0~2.2μm，無鞭毛。利用分子生物學(xué)方法對(duì)B1進(jìn)行序列分析，得到溶藻細(xì)菌Bl PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的長(zhǎng)度分別為1542bp，在GenBank中的菌株編號(hào)為1465471，登錄號(hào)為JN228893；序列同源性比較和系統(tǒng)發(fā)育表明，溶藻細(xì)菌B1與多株芽抱桿菌的16S rDNA核苷酸序列的同源性均在99%以上，屬于芽抱桿菌屬。 （2）根據(jù)繪制的B1生長(zhǎng)曲線，處于穩(wěn)定期的B1菌株液和胞外濾液都具有較好的溶藻效果，表現(xiàn)出良好的溶藻穩(wěn)定性。B1是通過分泌胞外活性物質(zhì)的方式對(duì)棕囊藻生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制，當(dāng)額外提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的2216E營(yíng)養(yǎng)液時(shí)，細(xì)菌會(huì)釋放出溶藻活性物質(zhì)。活性物質(zhì)的產(chǎn)生是依賴于營(yíng)養(yǎng)的提供，并且溶藻能力大小與溶藻物質(zhì)的濃度成正相關(guān)。B1無菌濾液能在短時(shí)間內(nèi)破壞藻細(xì)胞膜系統(tǒng)的完整性，使細(xì)胞內(nèi)含物質(zhì)溶出，進(jìn)而使整個(gè)藻細(xì)胞溶解。球形棕囊藻單體細(xì)胞的死亡過程為：細(xì)胞膜破裂—細(xì)胞質(zhì)溢出—色素分解。 （3）分離濃縮B1菌胞外活性物質(zhì)進(jìn)行分析，，溶藻活性物質(zhì)的分子量小于3.5KD，能用乙醇沉淀法分離去除部分雜質(zhì)，三種有機(jī)溶劑（正戊烷，甲苯，乙酸乙酯）中只有乙酸乙酯可以萃取到少量的活性物質(zhì)，活性物質(zhì)極性較強(qiáng)。胞外分泌液中的溶藻活性物質(zhì)有較廣的溫度適應(yīng)性，在一定的pH范圍內(nèi)保持較強(qiáng)溶藻能力，將胞外分泌液調(diào)節(jié)在pH為9.0條件下溶藻能力增強(qiáng)，適宜pH為6.0-9.0，增加或降低pH，溶藻能力均下降。活性物質(zhì)具有很強(qiáng)的抗氧化性由此推測(cè)該活性物質(zhì)為含有酸性或堿性基團(tuán)的非生物活性分子，不屬于蛋白質(zhì)、核酸、多糖等物質(zhì)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：X172
【目錄】：

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