本文關(guān)鍵詞：家蠶蛹表達(dá)人生長激素蛋白及其生物活性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院博士學(xué)位論文家蠶蛹表達(dá)人生長激素蛋白及其生物活性的研究姓名:藍(lán)航蓮申請學(xué)位級別:博士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:張耀洲20090901浙江大學(xué)博:l:論文中文摘要人生長激素(hGH)是由人垂體前葉細(xì)胞分泌的一種多肽類激素,對機(jī)體的組織、器官以及各種代謝活動都起著重要的生理功能。本試驗(yàn)首先構(gòu)建了重組質(zhì)粒pET28a--hGH,經(jīng)終濃度為1 mM IPTG在大腸桿菌中誘導(dǎo)帶rhGH融合蛋白的表達(dá),融合蛋白帶有His6標(biāo)簽;純化得到無生物活性的融合蛋白作為抗原免疫雄性新西蘭大白兔,收集抗血清后采用硫酸銨沉淀方法純化多克隆抗體;抗血清的效價(jià)為l:25600;Westem blot結(jié)果顯示多克隆抗體存在較高的特異性,以rhGH為抗原制得的抗體也可以和hGH蛋白發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)。高效抗一hGH多克隆抗體的制備為下游的工作奠定了基礎(chǔ)。昆蟲桿狀病毒是與原核、酵母以及哺乳動物細(xì)胞系統(tǒng)并存的表達(dá)外源蛋白的一類重要表達(dá)系統(tǒng),因其可以高效表達(dá)有活性的外源蛋白而被廣泛應(yīng)用。家蠶桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是昆蟲桿狀病毒的重要組成部分,本試驗(yàn)利用該系統(tǒng)在受體家蠶細(xì)胞和蠶蛹中合成hGH。利用共轉(zhuǎn)染技術(shù)攜帶有hGH基岡的重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pBacPAK--hGH與線性化的BmBacPAK6基因組DNA在家蠶細(xì)胞中發(fā)生同... 內(nèi)容來自轉(zhuǎn)載請標(biāo)明出處.

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