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桑樹成花素基因MaFT的啟動子克隆和功能位點分析

發(fā)布時間:2017-10-08 06:25

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【摘要】:FT(flowering locus T)是高等植物開花過程中關(guān)鍵的信號整合因子,主要在葉片維管束中合成,通過運輸?shù)诌_(dá)莖頂端分生組織發(fā)揮作用。為了研究桑樹FT基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制,以白桑種(Morus alba Linn.)品種新一之幼嫩葉片的基因組DNA為模板,根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫公布川桑(Morus notabilis)全基因組中FT同源序列的上游序列設(shè)計引物,PCR擴增獲得FT基因的啟動子片段,其長度為921 bp,命名為MaF TP。通過PLACE和PlantC ARE在線啟動子預(yù)測工具分析,該序列中除含有TATA-box、CAAT-box等真核生物啟動子的核心元件外,還存在脫落酸的響應(yīng)元件ABRE,生長素響應(yīng)元件AuxRR-core,水楊酸響應(yīng)元件TCA-element,生理節(jié)律相關(guān)順式作用元件circadian,光響應(yīng)元件I-box、G-box、MNF1等,以及胚乳表達(dá)必需的順式作用元件Skn-1-motif和抗逆性相關(guān)的順式作用元件W-box、MBS、TC-rich repeats,表明FT基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)可能受光照、干旱、節(jié)律性、脫落酸、生長素、水楊酸等因素的調(diào)控,并參與胚乳的形成。將5'端缺失的5段FT啟動子序列(從大到小依次為MaF TP903、MaF TP762、MaF TP542、MaF TP289、MaF TP162)分別與報告基因GUS融合構(gòu)建表達(dá)載體,利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化煙草(Nicotiana benthamiana)植株,通過GUS染色對不同長度的啟動子活性進(jìn)行分析,結(jié)果表明:除了MaF TP903的活性較弱外,其余啟動子缺失片段均能驅(qū)動GUS基因高效表達(dá),且表達(dá)量相近。依據(jù)研究結(jié)果推測:MaF TP啟動子的762~903 bp區(qū)段可能存在MaF T基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)的負(fù)調(diào)控元件。
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)蠶桑絲綢研究所;
【關(guān)鍵詞】桑樹 成花素基因 啟動子 序列結(jié)構(gòu) 功能位點 轉(zhuǎn)基因煙草
【基金】:家蠶基因組生物學(xué)國家重點實驗室開放課題(No.201200-13) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))專項(No.201303057) 西北農(nóng)林科技大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)專項(No.XNY2013-27)
【分類號】:S888.2;Q943.2
【正文快照】: 開花是高等植物生長發(fā)育過程中的重要階段,是 植物從營養(yǎng)生長向生殖生長轉(zhuǎn)換的過渡時期,受到基因和環(huán)境共同精密調(diào)控。在已探究的植物開花的6種調(diào)控途徑中,由多種開花相關(guān)基因形成復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[1]。其中,成花素(flowering locus T,FT)基因FT作為各種開花調(diào)控途徑的共同靶基

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 況守龍;胡廷章;;啟動子的克隆和研究方法[J];重慶工學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版);2007年01期

2 李志新;曹雙河;張相岐;張懷剛;;偽鵝觀草高分子量麥谷蛋白基因啟動子的克隆[J];長江大學(xué)學(xué)報(自科版)農(nóng)學(xué)卷;2007年02期

3 高剛;魯艷芹;韓金祥;趙麗;;雙啟動子對增強型綠色熒光蛋白表達(dá)的影響[J];中國生物制品學(xué)雜志;2009年10期

4 郝迪,

本文編號:992503


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