發(fā)布時(shí)間：2017-10-08 04:14

  本文關(guān)鍵詞：丹參水楊酸結(jié)合蛋白基因的克隆、表達(dá)分析

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【摘要】：[目的]從丹參(Salvia miltiorrhiza Bunge)培養(yǎng)細(xì)胞中克隆水楊酸結(jié)合蛋白(salicylic acid binding protein 2,SABP2)基因Sm SABP2并對(duì)其進(jìn)行表達(dá)分析。[方法]用Trizol法提取丹參細(xì)胞總RNA,反轉(zhuǎn)錄得到c DNA,通過(guò)PCR擴(kuò)增Sm SABP2,將其連接到p MD-19T simple載體中,利用酶切連接的方法構(gòu)建p ET28a-Sm SABP2原核表達(dá)載體,再轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)中進(jìn)行表達(dá),檢測(cè)蛋白酯酶活性。利用RT-q PCR測(cè)定水楊酸處理2 h的丹參懸浮細(xì)胞中Sm SABP2的表達(dá)量。[結(jié)果]PCR擴(kuò)增獲得了長(zhǎng)度為780 bp的Sm SABP2,成功構(gòu)建了原核表達(dá)載體p ET28aSm SABP2,IPTG誘導(dǎo)得到了Sm SABP2,SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示誘導(dǎo)8 h優(yōu)于4 h,q PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)水楊酸處理2 h內(nèi)Sm SABP2相對(duì)表達(dá)量持續(xù)升高。[結(jié)論]從丹參培養(yǎng)細(xì)胞中克隆了大小為780 bp的Sm SABP2,成功表達(dá)出了有活性的Sm SABP2,并且該基因能夠強(qiáng)烈響應(yīng)水楊酸誘導(dǎo)。
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 丹參 基因克隆 SmSABP 原核表達(dá) qPCR
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31670301;No.31170274) 國(guó)家級(jí)創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(No.201610712080)
【分類號(hào)】：S567.53;Q943.2
【正文快照】： 水楊酸(salicylic acid,SA)是廣泛存在于植物體內(nèi)參與調(diào)控其生長(zhǎng)、發(fā)育過(guò)程的植物新內(nèi)源激素[1],也是能夠激活植物系統(tǒng)獲得性抗性(systemic ac-quired resistance,SAR)和過(guò)敏反應(yīng)(hypersensitiveresponse,HR)的重要內(nèi)源信號(hào)分子[2]。SA作為一個(gè)關(guān)鍵信號(hào)分子在植物受到病原菌侵

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2 何煒;章茜;張朝;趙國(guó)強(qiáng);;重組原核表達(dá)載體pGEX-4T-1-MAGE-1的構(gòu)建及表達(dá)[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年03期

3 孫勇;孫曙光;吳煒;張勇;呂尚軍;王林;彭曦;汪仕良;;人解痙多肽原核表達(dá)載體的構(gòu)建及誘導(dǎo)表達(dá)[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年12期

4 鄭少江;黃鳳迎;鄭少萍;王偉;吳人亮;;雞成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子Ⅰ型受體胞外段原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)鑒定[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年04期

5 馬輝;趙緒永;;大鼠熱休克因子結(jié)合蛋白1原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J];鄭州牧業(yè)工程高等�？茖W(xué)校學(xué)報(bào);2007年04期

6 李朝輝;田長(zhǎng)富;;重組L-蛋氨酸γ-裂解酶基因原核表達(dá)載體構(gòu)建及初步鑒定(摘要)[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年06期

7 周娟;趙瑞強(qiáng);陳莉;吳耀生;;三七法呢基焦磷酸合酶原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其表達(dá)[J];生物技術(shù)通報(bào);2009年09期

8 鄔玉蘭;劉志剛;陳小文;;奶牛主要過(guò)敏原β-乳球蛋白基因的克隆及其原核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2009年09期

9 楊震;楊可;侯曼美;景麗麗;張睿;張麗;雷寒;何通川;周建中;;人組織型纖溶酶原激活劑原核表達(dá)載體的構(gòu)建及在大腸桿菌中的初步表達(dá)[J];西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年04期

10 鄧健蓓,陳萍,王字玲,陳常慶,蘇成芝;帶有蛋白標(biāo)簽的原核表達(dá)載體構(gòu)建[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1998年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄔玉蘭;劉志剛;;牛奶主要過(guò)敏原β-乳球蛋白基因的克隆及其原核表達(dá)載體的構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)2009年全國(guó)變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

2 劉全華;華麗;霍婧;鮑一笑;;人白介素13原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在大腸桿菌中的表達(dá)[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

3 劉林林;王鐵君;楊艷明;蘇清秀;殷勝松;張奇;龔守良;;小鼠分泌型內(nèi)皮抑素原核表達(dá)載體pNZ44-ssEndostatin的構(gòu)建及表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)放射腫瘤治療學(xué)分會(huì)六屆二次暨中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)腫瘤放療專業(yè)委員會(huì)二屆二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

4 楊海杰;管寶全;羅文新;李少偉;鮮陽(yáng)凌;張軍;夏寧邵;;含分泌信號(hào)的原核表達(dá)載體的組建及應(yīng)用[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2001年

5 彭旭;袁順宗;王曉娟;甘成軍;王慶紅;陳烯偉;張小容;胡曉紅;羅高興;吳軍;;人HT036蛋白的原核表達(dá)及鑒定[A];第八屆全國(guó)燒傷外科學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2007年

6 李慎濤;歐陽(yáng)紅生;張玉靜;張銳;廖曉萍;孫博興;張永亮;;豬肌生成抑制素基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其表達(dá)[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識(shí)創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（上冊(cè)）[C];2001年

7 李慎濤;歐陽(yáng)紅生;張玉靜;張銳;廖曉萍;孫博興;張永亮;;豬肌生成抑制素基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其表達(dá)[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2001年

8 徐海燕;徐志偉;;人胰島素樣生長(zhǎng)因子-1的原核表達(dá)載體的構(gòu)建[A];山東免疫學(xué)會(huì)、山東微生物學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)專業(yè)委員會(huì)、山東省醫(yī)學(xué)會(huì)微生物學(xué)和免疫學(xué)專業(yè)委員會(huì)、山東省醫(yī)藥生物技術(shù)學(xué)會(huì)2001年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2001年

9 李士澤;張艷宇;張玉靜;;凋亡蛋白融合基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及序列分析[A];動(dòng)物生理生化學(xué)分會(huì)第八次學(xué)術(shù)會(huì)議暨全國(guó)反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)生理生化第三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

10 鮑德明;胡乃中;沈際佳;石海;許建明;;人巨噬細(xì)胞金屬?gòu)椓γ复呋蚧蛟吮磉_(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉芳;1.Keap1和p65蛋白相互作用及其作用機(jī)制研究 2.Mayven不同截短體原核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)和純化[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

2 王桂武;重組IGFBP-4蛋白的表達(dá)、純化、晶體生長(zhǎng)及其對(duì)鹿茸細(xì)胞增殖抑制的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 海旭南;瑟氏泰勒蟲(chóng)p33基恩與牛IL-18基的串聯(lián)表達(dá)[D];延邊大學(xué);2015年

2 常會(huì)婷;軍曹魚(yú)類胰島素生長(zhǎng)因子-I的克隆、表達(dá)及其原核表達(dá)載體構(gòu)建[D];廣東海洋大學(xué);2015年

3 袁仙麗;重組人IL-38的制備及其抑制小鼠肺纖維化的作用[D];寧波大學(xué);2015年

4 楊震;人組織型纖溶酶原激活劑原核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在大腸桿菌中的初步表達(dá)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

5 李曉華;重組梅花鹿胸腺素β_4原核表達(dá)載體的構(gòu)建及活性研究[D];長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué);2013年

6 范海鳴;大鼠寡霉素敏感相關(guān)蛋白的克隆及原核表達(dá)載體的構(gòu)建[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

7 王喜;重組人糖皮質(zhì)激素受體原核表達(dá)載體的構(gòu)建和表達(dá)[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

8 徐珍珍;人膠原蛋白原核表達(dá)載體的構(gòu)建及在大腸桿菌中的表達(dá)[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 詹輝;改良型TAT-PTD-VP3融合蛋白的基因合成、原核表達(dá)載體構(gòu)建及原核表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2006年

10 張?jiān)讫?一種蛋白內(nèi)含子介導(dǎo)純化的原核表達(dá)載體的構(gòu)建及應(yīng)用[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2004年

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本文編號(hào)：991915