本文關(guān)鍵詞：兩種密碼子優(yōu)化的Cas9編碼基因在斑馬魚胚胎中基因敲除效率的比較

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【摘要】：為在斑馬魚中獲得特異且高效的基因敲除,多個(gè)實(shí)驗(yàn)室獨(dú)立人工合成了序列彼此不一的Cas9 c DNA序列,并克隆入不同的體外轉(zhuǎn)錄載體。本文選取兩種斑馬魚密碼子優(yōu)化的Cas9編碼序列(z Cas9_bz和z Cas9_wc),對(duì)斑馬魚胚胎中的7個(gè)基因(外源egfp及內(nèi)源chd、hbegfa、th、eef1a1b、tyr、tcf7l1a)分別進(jìn)行敲除,通過PCR產(chǎn)物測序、克隆測序和表型分析比較了兩種Cas9的敲除效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn),z Cas9_wc在各種情況下都顯現(xiàn)出較高的敲除效率,而z Cas9_bz的效率相對(duì)較低。
【作者單位】： 中國科學(xué)院水生生物研究所淡水生態(tài)與生物技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： CRISPR/Cas 斑馬魚 基因敲除 突變效率
【基金】：國家重大科學(xué)研究計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):2012CB944504) 中國科學(xué)院重點(diǎn)部署項(xiàng)目(編號(hào):KSZD-EW-Z-001) 國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):31222052)資助~~
【分類號(hào)】：Q78
【正文快照】： 基因敲除是開展基因功能研究最為重要的技術(shù)手段之一。近年來,新一代人工核酸內(nèi)切酶技術(shù)——CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspacedshort palindromic repeats/CRISPR-associated protein)被廣泛地應(yīng)用于小鼠(Mus musculus)[1]、果蠅(Dro-sophila melanogaster)[2]、斑

【相似文獻(xiàn)】

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中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號(hào)：950660