本文關(guān)鍵詞：口腔鱗狀細(xì)胞癌中Dickkopf-3基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)及mRNA表達(dá)的研究

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【摘要】：目的:口腔癌是頭頸部常見的惡性腫瘤之一,位居人類全身惡性腫瘤的第六位。目前,我國口腔癌的發(fā)病率居高不下,經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查研究表明其病因與吸煙、飲酒、口腔衛(wèi)生等多種因素相關(guān),且呈年輕化的趨勢。盡管隨著多學(xué)科綜合序列治療模式的引入使口腔癌的治療取得了一定程度上的突破,但其五年生存率仍不理想。DKK-3(Dickkopf-3)作為Wnt信號傳導(dǎo)通路中重要的抑制劑之一,先后在肺癌、食管癌、甲狀腺癌等惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)其m RNA的低表達(dá)及啟動子區(qū)的高甲基化狀態(tài),提示DKK-3可作為候選抑癌基因參與惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。但目前關(guān)于DKK-3基因在口腔頜面部惡性腫瘤中的研究仍鮮有報(bào)道。因此,本實(shí)驗(yàn)通過檢測口腔鱗狀細(xì)胞癌組織及相應(yīng)正�？谇火つそM織中DKK-3基因m RNA的表達(dá)水平及其啟動子區(qū)的甲基化狀態(tài),探索DKK-3基因與口腔癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,為DKK-3成為新的口腔癌靶基因治療的生物學(xué)指標(biāo)提供理論依據(jù)。方法:選取河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院口腔科2014年09月至2015年12月手術(shù)切除的原發(fā)口腔鱗癌組織為研究對象,癌旁2cm處的正�？谇火つそM織為對照。術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)癌組織標(biāo)本為鱗狀細(xì)胞癌,癌旁組織非腫瘤組織。所用標(biāo)本均為術(shù)后立即取材,于-80°冰箱中凍存。應(yīng)用RT-PCR及甲基化特異性PCR(Methylation-Specific PCR,MSP)的方法分別檢測DKK-3基因在口腔鱗癌組織及相應(yīng)正常黏膜組織m RNA的表達(dá)情況及其啟動子區(qū)的甲基化狀態(tài),并運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,分析DKK3與年齡、性別、吸煙、臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等各臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果:1 DKK-3基因m RNA在口腔鱗癌組織中的相對表達(dá)量為0.41±0.27,在其對應(yīng)正�？谇火つぶ邢鄬Ρ磉_(dá)量為0.50±0.29,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-12.580,P0.05)。同時(shí),吸煙組DKK-3基因m RNA的相對表達(dá)量0.22±0.16低于不吸煙組m RNA相對表達(dá)量0.63±0.21(t=-8.018,P0.05);臨床Ⅰ期、Ⅱ期的DKK-3基因m RNA的相對表達(dá)量0.46±0.29高于臨床Ⅲ期、Ⅳ期m RNA的相對表達(dá)量0.28±0.19(t=2.214,P0.05);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組DKK-3基因m RNA的相對表達(dá)量0.24±0.17低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組m RNA的相對表達(dá)量0.50±0.28(t=-4.114,P0.05),DKK-3基因m RNA的相對表達(dá)量與性別和年齡無關(guān)(P0.05);2 DKK-3基因啟動子區(qū)在口腔鱗癌組織中的甲基化率為49.0%(25/51),明顯高于其對應(yīng)正常口腔黏膜組織的甲基化率7.8%(4/51)(χ~2=19.273,P0.05)。同時(shí),吸煙組的甲基化率64.3%(18/28)高于不吸煙組甲基化率30.4%(7/23)(χ~2=5.790,P0.05);臨床Ⅰ期、Ⅱ期的甲基化率38.9%(14/36)低于Ⅲ期、Ⅳ期的甲基化率73.3%(11/15)(χ~2=5.027,P0.05);但是DKK-3基因啟動子區(qū)在口腔鱗癌組織中的甲基化率與性別、年齡及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P0.05);3 DKK-3基因發(fā)生甲基化的口腔鱗癌組織m RNA的相對表達(dá)量0.30±0.21低于未發(fā)生甲基化的口腔鱗癌組織m RNA的相對表達(dá)量0.51±0.29(t=-2.817,P0.05)。結(jié)論:1口腔鱗癌組織中DKK-3基因m RNA的相對表達(dá)量低于正�？谇火つそM織。該結(jié)果提示在口腔鱗癌中DKK-3基因可能是抑癌基因,其表達(dá)下調(diào)或沉默可能導(dǎo)致了口腔癌的發(fā)生與發(fā)展,該基因的異常表達(dá)與吸煙、臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),與性別和年齡無關(guān)。2口腔鱗癌組織中DKK-3基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)明顯高于相應(yīng)正�？谇火つそM織。提示DKK-3基因啟動子區(qū)的高甲基化狀態(tài)可能是口腔癌發(fā)病的重要機(jī)制之一,同時(shí),該基因啟動子的異常甲基化狀態(tài)與吸煙和臨床分期有關(guān),與性別、年齡及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。3在口腔鱗癌組織中DKK-3基因m RNA在甲基化陽性病例中的相對表達(dá)量低于甲基化陰性病例中m RNA的相對表達(dá)量。研究結(jié)果提示DKK-3基因啟動子區(qū)的高甲基化可能是導(dǎo)致其轉(zhuǎn)錄沉默的主要原因。
【關(guān)鍵詞】：口腔鱗狀細(xì)胞癌 DKK-3基因 Wnt信號通路 表觀遺傳學(xué) 甲基化
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.8
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-20
• 結(jié)果20-22
• 附圖22-24
• 附表24-27
• 討論27-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-35
• 綜述 Wnt信號通路及其與口腔頜面部惡性腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展35-45
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 致謝45-46
• 個(gè)人簡歷46

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張敏;朱衛(wèi)豐;嵇琴;孫振;周瑩;章明;彭淑紅;;抗腫瘤中藥對DNA去甲基化作用的研究進(jìn)展[J];中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2015年23期

2 李博磊;李龍江;周學(xué)東;程磊;;口腔微生物與口腔癌[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2015年06期

3 陳嬋嬋;凌均h，

本文編號：946984