本文關(guān)鍵詞：豬流行性腹瀉病毒部分N基因的原核表達及表達產(chǎn)物反應(yīng)原性分析

  更多相關(guān)文章： 豬流行性腹瀉病毒 N基因片段 原核表達 反應(yīng)原性

【摘要】：為研究豬流行性腹瀉病毒(PEDV)部分N蛋白的原核表達產(chǎn)物是否具有抗原性,并為建立PEDV的間接ELISA方法奠定基礎(chǔ),本試驗應(yīng)用RT-PCR技術(shù)擴增N基因的部分核酸序列,經(jīng)克隆后將目的片段連接到原核表達載體pET-30a(+)中。重組菌于37℃、0.5 mmol/L IPTG誘導(dǎo)4h后進行SDS-PAGE分析,并進行Western blotting鑒定。結(jié)果顯示,構(gòu)建的原核表達重組質(zhì)粒測序正確,且該蛋白與抗血清(PEDV高免血清)具有良好的反應(yīng)活性。本試驗成功構(gòu)建了PEDV部分N基因原核表達載體,為后續(xù)PEDV感染的血清學(xué)診斷方法的建立提供依據(jù)。
【作者單位】： 天津農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;農(nóng)業(yè)部生物獸藥創(chuàng)制重點實驗室;天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司研究院;
【關(guān)鍵詞】： 豬流行性腹瀉病毒 N基因片段 原核表達 反應(yīng)原性
【基金】：瑞普生物研究院豬流行性腹瀉疫苗專項基金項目
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 豬流行性腹瀉(porcine epidemic diarrhea,PED)由豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diar-rhea virus,PEDV)引起,是一種破壞腸道的傳染病[1]。PEDV是冠狀病毒屬Ⅰ群的成員,是包膜病毒,大小約為28kb,為單股正義RNA病毒,基因組5′端有帽子結(jié)構(gòu),3′端有多聚腺苷酸尾[2]�；蚪M

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本文編號：929108