本文關鍵詞：泥蚶谷胱甘肽過氧化物酶基因的全長克隆與表達分析

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【摘要】：為了探討谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)基因在泥蚶應激反應中的作用,研究采用RACE技術克隆了泥蚶GPx基因(TgGPx)c DNA全長,其c DNA全長1195 bp,包含45 bp 5′-UTR,639 bp開放閱讀框(ORF)和511 bp 3′-UTR。ORF編碼212個氨基酸殘基,預測蛋白分子量為24.3 k D,理論等電點為8.33,其中,第53個氨基酸U是由密碼子202UGA204編碼的硒代半胱氨酸(Se-Cys)。在3′-UTR上存在一段序列,形成一種獨特的莖環(huán)結構,即SECIS元件。SECIS元件在密碼子UGA翻譯為Se-Cys的過程中起決定性作用。通過序列比對與系統(tǒng)進化分析,發(fā)現(xiàn)軟體動物中也存在不同種類的GPx基因,TgGPx與GPx1和GPx2的親緣關系較近。利用qRT-PCR技術對TgGPx在泥蚶的不同組織以及重金屬刺激后的表達量進行分析,結果表明,TgGPx在泥蚶的5個組織中都有表達,但存在組織特異性,在外套膜中的表達量最高,在血細胞中的表達量最低。用重金屬鉛、銅、鎘刺激后,TgGPx在肝胰臟中的表達量顯著升高,表明TgGPx在維護機體正常功能方面及泥蚶抵御外界刺激的應激反應中發(fā)揮作用。
【作者單位】： 浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所;溫州醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院生命科學學院;浙江省近岸水域生物資源開發(fā)和保護重點實驗室;上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院;
【關鍵詞】： 泥蚶 谷胱甘肽過氧化物酶 全長克隆 基因表達
【基金】：國家高技術研究發(fā)展計劃(2012AA10A410-1) 浙江省重大科技專項(2012C12907-4) 溫州市種子種苗科技創(chuàng)新專項(N20120017)資助~~
【分類號】：S917.4
【正文快照】： 活性氧(ROS)又稱氧自由基,在大多數(shù)情況下是由細胞正常代謝和呼吸作用產(chǎn)生的,在機體中有廣泛的生物學作用。在貝類細胞免疫過程中,機體可以通過產(chǎn)生大量的活性氧(ROS)來消滅病原體,除此之外,ROS作為生長因子和第二信使等在機體的生長調控中也發(fā)揮重要作用。但當ROS過量時,機體

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