本文關(guān)鍵詞：AMPK的調(diào)控對(duì)PD轉(zhuǎn)基因果蠅模型的影響

  更多相關(guān)文章： 帕金森轉(zhuǎn)基因果蠅 PINK1 AMPK 線粒體

【摘要】：目的:探討AMPK的調(diào)控是否對(duì)PINK1突變型PD轉(zhuǎn)基因果蠅具有神經(jīng)保護(hù)作用及其作用的相關(guān)機(jī)制。方法:利用經(jīng)典的PD關(guān)基因PINK1無(wú)效突變的PD轉(zhuǎn)基因果蠅模型—PINK1~(B9)。使用MHC-Gal4啟動(dòng)子,利用經(jīng)典的GAL4/UAS系統(tǒng),使果蠅帕金森疾病的特征于肌肉組織中特異性表達(dá),構(gòu)建MHC-GAL4系統(tǒng)的PD轉(zhuǎn)基因果蠅模型。應(yīng)用Western Blot檢測(cè)PD模型中AMPK活化型蛋白表達(dá)水平,探討基因突變型PD中是否存在AMPK的活化異常。并進(jìn)一步對(duì)PD轉(zhuǎn)基因果蠅通過(guò)啟動(dòng)過(guò)表達(dá)AMPK和RNA干擾AMPK調(diào)控其AMPK的表達(dá)量。通過(guò)觀察其翅膀異常率、飛行率及肌肉ATP水平、線粒體氧化呼吸鏈復(fù)合物I的組分m RNA ND42的表達(dá)及其相應(yīng)的蛋白NDUFS-3的表達(dá)量來(lái)檢測(cè)其功能的改變。探索AMPK的調(diào)控在PD發(fā)病機(jī)制中的作用,并探索其作用的具體機(jī)制。結(jié)果:在PINK1~(B9)轉(zhuǎn)基因PD果蠅模型中AMPK的主要活化形式P-AMPK-α蛋白表達(dá)水平較正常對(duì)照明顯下降。不論是過(guò)表達(dá)AMPK,還是RNA干擾敲低AMPK的表達(dá),對(duì)PD轉(zhuǎn)基因果蠅PINK1~(B9)進(jìn)行干預(yù),均能夠挽救PD轉(zhuǎn)基因果蠅模型翅膀異常的表型,且均使PD模型組的活化形式的AMPK蛋白的表達(dá)水平相應(yīng)改變。檢測(cè)調(diào)控AMPK表達(dá)后的PD轉(zhuǎn)基因果蠅中線粒體功能后發(fā)現(xiàn),具有嚴(yán)重線粒體功能障礙的PD轉(zhuǎn)基因果蠅的線粒體功能明顯提高,飛行肌中線粒體形態(tài)得到改善,其ATP水平也顯著提高,標(biāo)志線粒體功能的線粒體氧化呼吸鏈Complex I的亞基ND42的m RNA及NDUFS-3蛋白的表達(dá)量均比模型組顯著提高。結(jié)論:不僅AMPK的激活形式可以挽救PD模型,通過(guò)RNA干擾調(diào)控AMPK表達(dá)下調(diào)仍可以通過(guò)直接對(duì)線粒體功能的調(diào)節(jié)來(lái)挽救PINK1~(B9)的線粒體功能。
【關(guān)鍵詞】：帕金森轉(zhuǎn)基因果蠅 PINK1 AMPK 線粒體
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：Q78
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 英漢縮略詞對(duì)照表8-9
• 前言9-12
• 1 材料與方法12-22
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料12
• 1.2 主要試劑、耗材及試劑的配制12-14
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器14
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法14-22
• 2 結(jié)果22-34
• 2.1 MHC-GAL4/UAS系統(tǒng)PD轉(zhuǎn)基因果蠅模型22-26
• 2.2 AMPK的調(diào)控對(duì)PD轉(zhuǎn)基因果蠅表型的保護(hù)作用26-32
• 2.3 AMPK的調(diào)控對(duì)PD轉(zhuǎn)基因果蠅的線粒體功能障礙具有挽救作用32-33
• 2.4 AMPK的調(diào)控提高PD轉(zhuǎn)基因果蠅線粒體氧化呼吸鏈復(fù)合物I功能33-34
• 3 討論34-36
• 4 結(jié)論36-38
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 綜述41-58
• 參考文獻(xiàn)51-58
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄58-59
• 致謝59

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊子初;廖q伶;;AMPK在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的意義與展望[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2013年03期

2 王艷;黃德強(qiáng);羅志軍;;AMPK對(duì)線粒體功能的調(diào)節(jié)[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2013年10期

3 符慶瑛,高鈺琪;蛋白激酶AMPK的研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2005年02期

4 顏洪;張瓊;吳丹;宋華培;;His-AMPKα~1(312)截短缺失融合蛋白原核表達(dá)載體的構(gòu)建與純化[J];局解手術(shù)學(xué)雜志;2013年04期

5 焦顯芹;崔錦;李夢(mèng)云;;AMPK對(duì)細(xì)胞增殖的調(diào)控作用[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年30期

6 聶歆贏;田世坤;聶艷芳;褚志華;;新疆維吾爾族人2型糖尿病患者AMPKα2基因多態(tài)性的分析研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2009年09期

7 代潔;張曉明;林玲;艾青;張力;;能量敏感的AMPK-SIRT1通路與炎癥調(diào)控[J];生命科學(xué);2014年04期

8 杜林濤;張紅學(xué);;AMPK與胰島素抵抗[J];生物技術(shù)世界;2012年08期

9 常洪霞;張紅學(xué);;AMPK與胰島素抵抗[J];哈爾濱師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào);2012年04期

10 陳雷;焦智浩;鄭麗沙;張媛媛;解樹(shù)濤;王志新;吳嘉煒;;糖尿病關(guān)鍵蛋白AMPK的自抑制機(jī)制[J];生物物理學(xué)報(bào);2009年S1期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 ;Co-commitment and Interplay between Akt and AMPK in the Regulation of Endothelial NO Synthase Phosphorylation by Reactive Oxygen Species[A];第九屆全國(guó)心血管藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

2 Paul M Vanhoutte;;SIRT1 and AMPK:the Seesaw Effect in Regulating Endothelial Sene-scence[A];第八屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2011年

3 李瑾;朱海波;;新結(jié)構(gòu)類(lèi)型調(diào)血脂化合物與靶蛋白AMPK分子間相互作用初步解析[A];全國(guó)第十二屆生化與分子藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

4 宋海燕;李強(qiáng);孫玉倩;張巾超;鄔艷慧;;AMPK結(jié)合蛋白的篩選及其與2型糖尿病的關(guān)系研究[A];2008內(nèi)分泌代謝性疾病系列研討會(huì)暨中青年英文論壇論文匯編[C];2008年

5 ;AMPK mediated an apoptotic response to combined effect of hypoxia stress and ER stress[A];2012全國(guó)發(fā)育生物學(xué)大會(huì)摘要集[C];2012年

6 ZHANG Jian-wei;MA Xiao-wei;DENG Rui-fen;DING Shan;GU Nan;GUO Xiao-hui;;Genetic variability in AMPKαl gene may have synergetic effect with smoking on risk of coronary artery disease in chinese type 2 diabetics[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)第十六次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

7 姚遠(yuǎn);周京軍;裴建明;;AMPK介導(dǎo)無(wú)鈣預(yù)處理心肌保護(hù)作用[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2011年

8 季樂(lè)樂(lè);Haifeng Zhang;Feng Gao;;A novel mechanism of preconditioning:Attenuating reperfusion injury through enhanced myocardial glucose uptake via insulin-stimulated Akt and AMPK activation[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第十屆全國(guó)青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2013年

9 WU Qiao;;The orphan nuclear receptor Nur77 regulates AMPK activity through LKB1 subcellular localization in glucose metabolism[A];細(xì)胞—生命的基礎(chǔ)——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2013年全國(guó)學(xué)術(shù)大會(huì)·武漢論文摘要集[C];2013年

10 Jia-Wei Wu;;Conserved elements in allosteric regulation of AMPK[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專(zhuān)題報(bào)告二[C];2014年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 黃敏;精力充沛基因決定?[N];新華每日電訊;2011年

2 實(shí)習(xí)生 程鳳;不愛(ài)鍛煉可能與基因缺失有關(guān)[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳雷;AMP激活的蛋白質(zhì)激酶（AMPK）調(diào)控機(jī)制的研究[D];清華大學(xué);2010年

2 張秀娟;TSH調(diào)節(jié)肝臟HMG-CoA還原酶磷酸化修飾的研究[D];山東大學(xué);2014年

3 趙順玉;消積飲聯(lián)合CIK通過(guò)AMPKα/Sp1/EZH2/DNMT1相關(guān)通路抗肺癌生長(zhǎng)的作用機(jī)制[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2015年

4 王紅亮;AMPK-α在鹵蟲(chóng)胚胎發(fā)育過(guò)程中對(duì)細(xì)胞有絲分裂調(diào)控的研究[D];浙江大學(xué);2015年

5 周錫紅;三甲基甘氨酸通過(guò)AMPK途徑影響脂肪沉積的研究[D];浙江大學(xué);2015年

6 劉效磊;AMPK/mTOR介導(dǎo)有氧運(yùn)動(dòng)提高骨骼肌胰島素敏感性的機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

7 劉書(shū)東;AICAR誘導(dǎo)激活的AMPK在肝臟抑制TSH/SREBP-2/HMGCR通路[D];山東大學(xué);2015年

8 杜宇;AMPK調(diào)控組蛋白糖基化修飾的機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2015年

9 李知行;電針對(duì)胰島素抵抗模型大鼠肝臟AMPK、ACC的干預(yù)機(jī)制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年

10 尉娜;AMPK通過(guò)mTOR促進(jìn)腦缺氧條件下血管內(nèi)皮細(xì)胞作用的研究[D];鄭州大學(xué);2016年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 魏蘇玉;乙醇對(duì)H4-ⅡE細(xì)胞脂質(zhì)代謝及AMPK表達(dá)的影響[D];延邊大學(xué);2015年

2 陳婷;肌肉特異敲除AMPKα2對(duì)小鼠脂代謝的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

3 郭文文;女貞苷和TBC1D1調(diào)控脂聯(lián)素高聚化的機(jī)制研究[D];清華大學(xué);2015年

4 宋科標(biāo);羅漢果苷元結(jié)構(gòu)修飾及其激活A(yù)MPK磷酸化的構(gòu)效關(guān)系研究[D];華東理工大學(xué);2016年

5 楊于;PIP對(duì)細(xì)胞糖代謝AMPK信號(hào)通路GLUT4的干預(yù)研究[D];云南中醫(yī)學(xué)院;2016年

6 魏雅改;PIP對(duì)IR細(xì)胞模型糖代謝AMPK信號(hào)通路上游靶點(diǎn)的干預(yù)研究[D];云南中醫(yī)學(xué)院;2016年

7 袁雯;AMPK激動(dòng)劑對(duì)神經(jīng)病理性疼痛小鼠治療作用的研究[D];江蘇大學(xué);2016年

8 楊俊;二甲雙胍預(yù)激活A(yù)MPK對(duì)大鼠腎部分切除術(shù)后殘余腎臟功能的影響[D];蘭州大學(xué);2016年

9 伏曉;ω-3多不飽和脂肪酸通過(guò)AMP/LKB1/AMPK信號(hào)通路調(diào)節(jié)肝再生的分子機(jī)制[D];南京大學(xué);2016年

10 董晨歡;兩種量豐三萜的結(jié)構(gòu)修飾與激活A(yù)MPK磷酸化的構(gòu)效關(guān)系研究[D];中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所;2016年

，

本文編號(hào)：911685