本文關(guān)鍵詞：刺激隱核蟲(chóng)小GTP酶Ran基因的克隆與表達(dá)

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【摘要】：對(duì)刺激隱核蟲(chóng)(Cryptocaryon irritans)的小GTP酶Ran基因(Ci Ran)進(jìn)行研究,以期為刺激隱核蟲(chóng)病原生物學(xué)研究及其防治提供理論基礎(chǔ)。從刺激隱核蟲(chóng)滋養(yǎng)體/包囊前期cDNA文庫(kù)中篩選出Ci Ran基因的克隆,利用生物信息學(xué)方法對(duì)CiRan基因及其編碼的蛋白進(jìn)行結(jié)構(gòu)與功能的預(yù)測(cè);通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)CiRan的mRNA。結(jié)果表明其在刺激隱核蟲(chóng)的各個(gè)發(fā)育階段均有表達(dá)。對(duì)CiRan基因開(kāi)放閱讀框內(nèi)的非通用密碼子進(jìn)行改造,并構(gòu)建重組質(zhì)粒p GEX-4T-1/CiRan,將其轉(zhuǎn)化到大腸桿菌(E.coli)后成功表達(dá)分子量為51.3 kD的重組融合蛋白rCiRan。用rCiRan蛋白免疫鼠血清進(jìn)行免疫印跡分析,結(jié)果表明,抗rCiRan血清能識(shí)別刺激隱核蟲(chóng)各期蟲(chóng)體的天然CiRan蛋白,其表觀分子量為25.3 kD,與根據(jù)編碼基因序列推測(cè)出的理論值相符;以rCiRan的抗血清做間接免疫熒光抗體實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明天然CiRan蛋白在幼蟲(chóng)的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)均有分布,且在核膜周?chē)患?佐證了該分子潛在的功能。
【作者單位】： 福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院福建省發(fā)育與神經(jīng)生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江西省東鄉(xiāng)縣第一中學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 刺激隱核蟲(chóng) 小GTP酶Ran 克隆 表達(dá) 分析
【基金】：福建省教育廳JK項(xiàng)目(JK2013008) 福建省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2014J01120) 福建省公務(wù)員局引進(jìn)人才科研啟動(dòng)項(xiàng)目(2010-595) 福建省農(nóng)業(yè)重大專項(xiàng)(2013NZ0002-5)
【分類(lèi)號(hào)】：S941.5
【正文快照】： 刺激隱核蟲(chóng)病,俗稱“白點(diǎn)病”,其病原為刺激隱核蟲(chóng)(Cryptocaryon irritans)。該蟲(chóng)是隸屬于纖毛蟲(chóng)綱的單細(xì)胞寄生原蟲(chóng),可寄生于除瑩斑籃子魚(yú)(Siganus oramin)以外的幾乎所有海水硬骨魚(yú)類(lèi)皮膚、鰓和眼上,造成炎癥且刺激宿主大量分泌黏液,引起魚(yú)類(lèi)宿主窒息或繼發(fā)細(xì)菌感染,甚至死

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 梁海霞;許靜;王偉;;RAN1基因過(guò)表達(dá)抑制嗜熱四膜蟲(chóng)大核無(wú)絲分裂[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2013年01期

2 陳愛(ài)平;江育林;錢(qián)冬;陳昌福;李安興;黃捷;楊冰;;刺激隱核蟲(chóng)病[J];中國(guó)水產(chǎn);2011年08期

3 孫志宇;鄭昌峰;武曉燕;郭果為;汪彥a;黃曉紅;;福建霞浦海區(qū)刺激隱核蟲(chóng)蟲(chóng)株鑒定及生活史觀察[J];福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年02期

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【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 付國(guó)良;黃瑪嬌;謝金珠;胡燕紅;晏燕花;黃鎮(zhèn);黃曉紅;;刺激隱核蟲(chóng)小GTP酶Ran基因的克隆與表達(dá)[J];中國(guó)水產(chǎn)科學(xué);2016年03期

2 徐曉津;桑本紅;覃映雪;鄒文政;毛勇;鄒峰;羅罡;蘇永全;;大黃魚(yú)刺激隱核蟲(chóng)病組織中巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子的檢測(cè)分析[J];中國(guó)水產(chǎn)科學(xué);2015年06期

3 任曉琦;許靜;王偉;;RanGTPase激活蛋白R(shí)anGAP在嗜熱四膜蟲(chóng)細(xì)胞中的定位及功能[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2015年03期

4 陳波;許靜;王偉;;抗沉默因子Asf1調(diào)控嗜熱四膜蟲(chóng)細(xì)胞核的穩(wěn)定性[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2015年01期

5 鄭曉葉;劉順;周e，

本文編號(hào)：857550