本文關(guān)鍵詞：馬藺VP基因的克隆與植物表達(dá)載體構(gòu)建

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【摘要】：以馬藺幼根總RNA為模板,通過RT-PCR方法擴(kuò)增得到馬藺H+-PPase全長(zhǎng)序列并克隆到p MD19-T載體,命名為Il VP。序列分析表明該基因的開放閱讀框?yàn)? 316 bp,編碼771個(gè)氨基酸,推測(cè)等電點(diǎn)為5.16,分子量為80.7 k D,所得到的序列與Gen Bank中注冊(cè)的高等植物液泡膜H+-PPase的核苷酸序列相比,其同源性均達(dá)到70%以上,其氨基酸序列的同源性則達(dá)到79%以上。用SmaⅠ和SacⅠ分別對(duì)目的基因質(zhì)粒和植物表達(dá)載體p BI121進(jìn)行雙酶切,在DNA連接酶的作用下進(jìn)行定向連接,構(gòu)建成植物重組質(zhì)粒p BI121-35S-Il VP-Nos,再轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌EHA105中,為該基因在煙草等植物中遺傳轉(zhuǎn)化和基因功能研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 北京市農(nóng)林科學(xué)院北京草業(yè)與環(huán)境研究發(fā)展中心;山西農(nóng)業(yè)大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 馬藺 H+-PPase基因 序列分析 重組質(zhì)粒 遺傳轉(zhuǎn)化
【基金】：北京市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(6142007;6152008) 北京市農(nóng)林科學(xué)院創(chuàng)新能力建設(shè)專項(xiàng)(KJCX20140103)共同資助
【分類號(hào)】：Q943.2;S682.19
【正文快照】： *同等貢獻(xiàn)作者*通訊作者,menglin9599@sina.comCloning and Construction of Plant Expression Vector of Il VP Gene from IrislacteaGuo Jingya1,2*Li Shanshan1*Guo Qiang1Mao Peichun1Tian Xiaoxia1Meng Lin1**Yang Xiaopen21 Beijing Research and Development Center fo，

本文編號(hào)：857159