本文關(guān)鍵詞：蘇云金芽胞桿菌CcpA蛋白對(duì)幾丁質(zhì)酶基因chiA和chiB的表達(dá)調(diào)控作用

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【摘要】：【目的】研究蘇云金芽胞桿菌Bti75中糖代謝蛋白Ccp A對(duì)兩種幾丁質(zhì)酶基因chi A和chi B的表達(dá)調(diào)控�！痉椒ā坷肞REDetector軟件分析Bti75 chi A和chi B的基因上游區(qū)序列,EMSA方法在體外驗(yàn)證Ccp A是否能與chi A和chi B基因的啟動(dòng)子區(qū)域片段特異性結(jié)合。構(gòu)建ccp A基因敲除載體以獲得敲除突變株Δccp A,運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和Western blot技術(shù)比較有無(wú)葡萄糖存在的情況下,Ccp A對(duì)chi A和chi B基因表達(dá)的影響�！窘Y(jié)果】計(jì)算機(jī)分析顯示,chi B上游啟動(dòng)子區(qū)存在一個(gè)潛在的Ccp A結(jié)合位點(diǎn)crechi B,而chi A上游啟動(dòng)子區(qū)未發(fā)現(xiàn)類似序列。體外實(shí)驗(yàn)表明,Ccp A蛋白在共阻遏蛋白Hpr-Ser45-P的參與下可與chi B基因啟動(dòng)子區(qū)特異性結(jié)合,而與chi A基因啟動(dòng)子區(qū)沒(méi)有特異性結(jié)合;實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot結(jié)果均顯示,Bti75中ccp A基因敲除后,同樣在葡萄糖存在下chi B的表達(dá)量提高而chi A的表達(dá)量變化不明顯�！窘Y(jié)論】在葡萄糖存在的情況下,Ccp A蛋白能抑制蘇云金芽胞桿菌中幾丁質(zhì)酶chi B的表達(dá),而chi A的表達(dá)不受Ccp A調(diào)控。
【作者單位】： 南開(kāi)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物系;分子微生物學(xué)與技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;天津市微生物功能基因組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 蘇云金芽胞桿菌 CcpA蛋白 幾丁質(zhì)酶 表達(dá)調(diào)控
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31371979) 天津市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.15JCYBJC30200)~~
【分類號(hào)】：Q78
【正文快照】： 蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)產(chǎn)生的幾丁質(zhì)酶(Chitinase)可以水解幾丁質(zhì),具有抑制真菌生長(zhǎng)和明顯的殺蟲(chóng)增效作用;而幾丁質(zhì)水解產(chǎn)生的幾丁單糖(Glc NAc)以及分子大小不等的幾丁寡糖[(Glc NAc)n],廣泛參與細(xì)菌碳源和氮源的代謝。多種微生物在進(jìn)化過(guò)程中形成了嚴(yán)格

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本文編號(hào)：854699