本文關(guān)鍵詞：蘇云金芽胞桿菌CcpA蛋白對幾丁質(zhì)酶基因chiA和chiB的表達調(diào)控作用

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【摘要】：【目的】研究蘇云金芽胞桿菌Bti75中糖代謝蛋白Ccp A對兩種幾丁質(zhì)酶基因chi A和chi B的表達調(diào)控�！痉椒ā坷肞REDetector軟件分析Bti75 chi A和chi B的基因上游區(qū)序列,EMSA方法在體外驗證Ccp A是否能與chi A和chi B基因的啟動子區(qū)域片段特異性結(jié)合。構(gòu)建ccp A基因敲除載體以獲得敲除突變株Δccp A,運用實時熒光定量PCR技術(shù)和Western blot技術(shù)比較有無葡萄糖存在的情況下,Ccp A對chi A和chi B基因表達的影響。【結(jié)果】計算機分析顯示,chi B上游啟動子區(qū)存在一個潛在的Ccp A結(jié)合位點crechi B,而chi A上游啟動子區(qū)未發(fā)現(xiàn)類似序列。體外實驗表明,Ccp A蛋白在共阻遏蛋白Hpr-Ser45-P的參與下可與chi B基因啟動子區(qū)特異性結(jié)合,而與chi A基因啟動子區(qū)沒有特異性結(jié)合;實時熒光定量PCR和Western blot結(jié)果均顯示,Bti75中ccp A基因敲除后,同樣在葡萄糖存在下chi B的表達量提高而chi A的表達量變化不明顯�！窘Y(jié)論】在葡萄糖存在的情況下,Ccp A蛋白能抑制蘇云金芽胞桿菌中幾丁質(zhì)酶chi B的表達,而chi A的表達不受Ccp A調(diào)控。
【作者單位】： 南開大學生命科學學院微生物系;分子微生物學與技術(shù)教育部重點實驗室;天津市微生物功能基因組學重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 蘇云金芽胞桿菌 CcpA蛋白 幾丁質(zhì)酶 表達調(diào)控
【基金】：國家自然科學基金項目(No.31371979) 天津市自然科學基金項目(No.15JCYBJC30200)~~
【分類號】：Q78
【正文快照】： 蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)產(chǎn)生的幾丁質(zhì)酶(Chitinase)可以水解幾丁質(zhì),具有抑制真菌生長和明顯的殺蟲增效作用;而幾丁質(zhì)水解產(chǎn)生的幾丁單糖(Glc NAc)以及分子大小不等的幾丁寡糖[(Glc NAc)n],廣泛參與細菌碳源和氮源的代謝。多種微生物在進化過程中形成了嚴格

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本文編號：854699