谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD的功能研究
發(fā)布時(shí)間:2017-09-15 05:47
本文關(guān)鍵詞:谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD的功能研究
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【摘要】:【目的】由于谷氏菌素產(chǎn)生菌禾粟鏈霉菌的遺傳操作效率較低,本研究在谷氏菌素生物合成基因簇成功異源表達(dá)的基礎(chǔ)上,通過(guò)在異源宿主天藍(lán)色鏈霉菌M1146中阻斷谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD,研究其在谷氏菌素生物合成中的作用,為谷氏菌素生物合成途徑的闡明奠定基礎(chǔ)!痉椒ā恳院泄仁暇厣锖铣苫虼氐酿ち6-4H為基礎(chǔ),通過(guò)PCR-targeting的方法分別將gouC和gouD敲除得到重組質(zhì)粒p GOUe-ΔC和p GOUe-ΔD。通過(guò)接合轉(zhuǎn)移將這兩個(gè)重組質(zhì)粒分別導(dǎo)入天藍(lán)色鏈霉菌M1146中,獲得gouC和gouD的缺失突變株M1146-GOUe-ΔC和M1146-GOUe-ΔD,通過(guò)HPLC分析突變株的谷氏菌素中間產(chǎn)物積累情況,分離純化后對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定和生物活性檢測(cè)。【結(jié)果】gouC和gouD的缺失均導(dǎo)致谷氏菌素不能合成,突變株發(fā)酵液中積累了不同的中間產(chǎn)物,生物活性分析發(fā)現(xiàn)這些中間產(chǎn)物均失去了對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制活性。【結(jié)論】gouC和gouD是谷氏菌素生物合成的重要基因,與谷氏菌素肽基部分的肌氨酸殘基合成相關(guān)。本研究為闡明谷氏菌素的生物合成機(jī)制提供了更多的依據(jù)。
【作者單位】: 西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)科學(xué)院微生物研究所微生物資源前期開(kāi)發(fā)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 禾粟鏈霉菌 谷氏菌素 生物合成基因簇 功能研究 產(chǎn)物鑒定
【基金】:國(guó)家“973計(jì)劃”(2015CB150600) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31270110,31571281)~~
【分類號(hào)】:Q78
【正文快照】: 谷氏菌素屬于核苷肽類抗生素,具有抗腫瘤、抗病毒、抗支原體、驅(qū)蟲(chóng)與殺螨等生物活性[1 4],是一種具有開(kāi)發(fā)價(jià)值的農(nóng)用與醫(yī)用抗生素,其產(chǎn)生菌主要包括谷氏鏈霉菌(Streptomyces gougerotii)和禾粟鏈霉菌(Streptomyces graminearus)[5 6]。谷氏菌素是蛋白質(zhì)合成的抑制劑[7],通過(guò)
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
1 江玲娟;韋俊宏;牛國(guó)清;譚華榮;;基因簇拷貝數(shù)倍增和底物添加對(duì)谷氏菌素產(chǎn)量的影響[A];中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編(2009-2013)[C];2013年
2 牛國(guó)清;李磊;韋俊宏;江玲娟;譚華榮;;谷氏菌素生物合成及其表達(dá)調(diào)控[A];中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編(2009-2013)[C];2013年
3 韋俊宏;牛國(guó)清;譚華榮;;谷氏菌素生物合成調(diào)控基因gouR的功能研究[A];2012年第五屆全國(guó)微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2012年
,本文編號(hào):854682
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