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耐堿GsCHX19基因的克隆及對(duì)苜蓿的遺傳轉(zhuǎn)化

發(fā)布時(shí)間:2017-09-09 11:03

  本文關(guān)鍵詞:耐堿GsCHX19基因的克隆及對(duì)苜蓿的遺傳轉(zhuǎn)化


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【摘要】:基于實(shí)驗(yàn)室前期野生大豆G07256堿脅迫轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),結(jié)合生物信息學(xué)方法篩選得到響應(yīng)堿脅迫的cation/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因Gs CHX19,克隆了Gs CHX19基因全長(zhǎng)CDS編碼序列并將其構(gòu)建到p CAMBIA330035Su植物超量表達(dá)載體中。以肇東紫花苜蓿為受體材料,通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將重組的植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化其子葉節(jié),用含0.5mg/L草銨膦的篩選培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,獲得20株抗性植株。采用PCR方法檢測(cè)抗性植株中bar基因的表達(dá),獲得16株P(guān)CR陽(yáng)性植株。對(duì)獲得的PCR陽(yáng)性植株進(jìn)行RT-PCR及real-time PCR檢測(cè),鑒定共獲得11株RT-PCR陽(yáng)性植株,且證明Gs CHX19基因在各轉(zhuǎn)基因植株中均有不同程度的表達(dá)。結(jié)果表明,Gs CHX19基因成功轉(zhuǎn)化苜蓿,并且得到表達(dá),該轉(zhuǎn)基因植株將為耐鹽堿轉(zhuǎn)基因苜蓿新品種的培育提供重要的試驗(yàn)材料。
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)生物功能基因重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】Cation/H~+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 GsCHX 野生大豆 苜蓿 遺傳轉(zhuǎn)化
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31171578) 黑龍江省高?萍紕(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)計(jì)劃(2011TD055)
【分類號(hào)】:S541.9
【正文快照】: 東北自然環(huán)境條件優(yōu)越,具有廣袤的草原,是發(fā)展畜牧業(yè)的理想基地。然而,由于環(huán)境因素與人為因素導(dǎo)致的不斷擴(kuò)大的鹽堿地面積嚴(yán)重威脅到了畜牧業(yè)的發(fā)展。紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是世界上栽培最廣泛、利用最早的豆科牧草,具有產(chǎn)量高、品質(zhì)優(yōu)良的特點(diǎn)。隨著苜蓿產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,,

本文編號(hào):820051

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