本文關(guān)鍵詞：赤眼鱒Toll樣受體3基因cDNA全長克隆及表達(dá)分析

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【摘要】：為探究赤眼鱒(Squaliobarbus curriculus)Toll樣受體3(Toll-like receptor 3,Sc TLR3)基因是否參與抗病毒免疫反應(yīng),實(shí)驗(yàn)運(yùn)用RACE技術(shù),克隆得到Sc TLR3基因c DNA全長序列,并進(jìn)行了生物信息學(xué)分析;通過RealTime q PCR技術(shù),檢測了Sc TLR3 m RNA在健康赤眼鱒10個組織中的分布以及感染草魚呼腸孤病毒(GCRV)后肝臟、脾臟、體腎和頭腎中的表達(dá)特征。結(jié)果表明:Sc TLR3基因c DNA序列全長4043 bp,包括5?-非編碼區(qū)(UTR)216 bp,開放閱讀框(ORF)2715 bp和3?-UTR 1112 bp;Sc TLR3共編碼904個氨基酸殘基,推導(dǎo)的蛋白分子量102.67 k D,理論等電點(diǎn)8.76;SMART結(jié)構(gòu)域預(yù)測顯示,Sc TLR3由N端的信號肽(SP)、富亮氨酸結(jié)構(gòu)域(LRRs)、跨膜結(jié)構(gòu)域(TM)和C端的Toll/白介素-1受體結(jié)構(gòu)域(TIR)組成。實(shí)時熒光定量結(jié)果顯示,Sc TLR3m RNA在檢測的各組織中均有表達(dá),肝臟中的相對表達(dá)量極顯著高于其他組織(P0.01);感染GCRV后,肝臟、脾臟、體腎和頭腎組織中Sc TLR3 m RNA均上調(diào)表達(dá),肝臟、脾臟和體腎組織中的相對表達(dá)量在24h達(dá)到峰值,分別為對照組的5倍、7倍和6倍。研究表明,Sc TLR3具有TLRs家族基因的典型結(jié)構(gòu)特征,并能被GCRV誘導(dǎo)表達(dá),推測其在赤眼鱒抗GCRV入侵免疫反應(yīng)中發(fā)揮了重要作用。
【作者單位】： 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省特色水產(chǎn)資源利用工程技術(shù)研究中心;水產(chǎn)高效健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心;湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 赤眼鱒 Toll樣受體 分子克隆 表達(dá)特征
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31272652);國家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(31402289) 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)科學(xué)基金項(xiàng)目(13YJ04)資助~~
【分類號】：S917.4
【正文快照】： Toll樣受體(Toll-like receptor,TLRs)是一類識別病原體保守結(jié)構(gòu)——病原相關(guān)分子模式(Pathogenassociated molecular patterns,PAMPs)的模式識別受體(Pattern recognition receptors,PRRs)[1,2]。自1985年在果蠅中被發(fā)現(xiàn)起,TLRs基因受到廣大研究者的關(guān)注[3]。魚類中首個TLRs

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：819628