本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)天麻抗真菌蛋白基因提高棉花對黃萎病抗性

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【摘要】：黃萎病是全球植棉業(yè)的主要病害,嚴(yán)重缺乏抗黃萎病資源導(dǎo)致棉花抗黃萎病育種至今未取得顯著進(jìn)展。采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,以下胚軸為受體,將天麻抗真菌蛋白基因轉(zhuǎn)化陸地棉品系蘇研060,通過愈傷組織誘導(dǎo)、胚性愈傷組織分化和植株再生,獲得大量再生苗。分別以NPT II基因、gafp基因、35S啟動子-gafp基因特異引物對再生苗進(jìn)行PCR檢測,將95個陽性再生苗嫁接到海7124幼苗砧木上,獲得37個成活植株。RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn),31個植株出現(xiàn)預(yù)期的540 bp擴(kuò)增片段。盆栽花鈴期花粉育性鑒定表明,9個轉(zhuǎn)基因植株雄性敗育,22個植株花粉育性正常,通過人工自交得到T1代種子。通過轉(zhuǎn)基因作物隔離區(qū)種植、特異引物PCR檢測、卡那霉素抗性篩選、自交純合與選擇,培育獲得22個T3代轉(zhuǎn)基因純系。Southern blotting檢測發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因植株體內(nèi)有2個gafp基因拷貝。GAFP蛋白免疫印跡表明,16個轉(zhuǎn)基因純系出現(xiàn)分子量為14 k D的GAFP蛋白,另6個純系表現(xiàn)出轉(zhuǎn)錄后水平上的基因沉默。黃萎病抗性鑒定結(jié)果證實,獲得3個抗落葉型黃萎病的棉花株系TG09、TG16和TG23。
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)/作物遺傳改良與種質(zhì)創(chuàng)新國家重點實驗室;江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所;中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 棉花 天麻 抗真菌蛋白 基因 黃萎病 抗性
【基金】：國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(2014ZX08005) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)項目(2012AA101108) 國家科技支撐計劃項目(2013BAD01B03) 江蘇省自然科學(xué)基金項目(BK20130699) 江蘇省科技支撐計劃項目(BE2013380) 江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金項目[CX(13)2024]資助~~
【分類號】：S435.621.2
【正文快照】： 黃萎病是棉花生產(chǎn)上的主要病害,暴發(fā)年份嚴(yán)以Ca MV35S啟動子驅(qū)動的gafp基因轉(zhuǎn)化彩色陸地重地影響著棉花的產(chǎn)量和纖維品質(zhì)。該病害自1935棉,通過病圃篩選和分子檢測,獲得高抗枯斑型黃年伴隨美棉的引進(jìn)傳入我國后,在國內(nèi)各產(chǎn)棉區(qū)逐萎病的轉(zhuǎn)gafp基因株系。陳大軍等[13]利用落葉型

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳大軍,簡桂良,李仁敬,張振南,劉豐疆,姚正陪;轉(zhuǎn)天麻抗真菌蛋白基因彩色棉新品系抗枯黃萎病研究[J];分子植物育種;2003年Z1期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王樹剛;張友秋;栗紅梅;;天麻抗真菌蛋白基因(gafp)轉(zhuǎn)化鑫秋1號的研究[A];中國棉花學(xué)會2014年年會論文匯編[C];2014年

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本文編號：807533