發(fā)布時(shí)間：2017-09-07 05:00

  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)天麻抗真菌蛋白基因提高棉花對(duì)黃萎病抗性

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【摘要】：黃萎病是全球植棉業(yè)的主要病害,嚴(yán)重缺乏抗黃萎病資源導(dǎo)致棉花抗黃萎病育種至今未取得顯著進(jìn)展。采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,以下胚軸為受體,將天麻抗真菌蛋白基因轉(zhuǎn)化陸地棉品系蘇研060,通過(guò)愈傷組織誘導(dǎo)、胚性愈傷組織分化和植株再生,獲得大量再生苗。分別以NPT II基因、gafp基因、35S啟動(dòng)子-gafp基因特異引物對(duì)再生苗進(jìn)行PCR檢測(cè),將95個(gè)陽(yáng)性再生苗嫁接到海7124幼苗砧木上,獲得37個(gè)成活植株。RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),31個(gè)植株出現(xiàn)預(yù)期的540 bp擴(kuò)增片段。盆栽花鈴期花粉育性鑒定表明,9個(gè)轉(zhuǎn)基因植株雄性敗育,22個(gè)植株花粉育性正常,通過(guò)人工自交得到T1代種子。通過(guò)轉(zhuǎn)基因作物隔離區(qū)種植、特異引物PCR檢測(cè)、卡那霉素抗性篩選、自交純合與選擇,培育獲得22個(gè)T3代轉(zhuǎn)基因純系。Southern blotting檢測(cè)發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因植株體內(nèi)有2個(gè)gafp基因拷貝。GAFP蛋白免疫印跡表明,16個(gè)轉(zhuǎn)基因純系出現(xiàn)分子量為14 k D的GAFP蛋白,另6個(gè)純系表現(xiàn)出轉(zhuǎn)錄后水平上的基因沉默。黃萎病抗性鑒定結(jié)果證實(shí),獲得3個(gè)抗落葉型黃萎病的棉花株系TG09、TG16和TG23。
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)/作物遺傳改良與種質(zhì)創(chuàng)新國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所;中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 棉花 天麻 抗真菌蛋白 基因 黃萎病 抗性
【基金】：國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)(2014ZX08005) 國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)項(xiàng)目(2012AA101108) 國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013BAD01B03) 江蘇省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(BK20130699) 江蘇省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(BE2013380) 江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金項(xiàng)目[CX(13)2024]資助~~
【分類號(hào)】：S435.621.2
【正文快照】： 黃萎病是棉花生產(chǎn)上的主要病害,暴發(fā)年份嚴(yán)以Ca MV35S啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的gafp基因轉(zhuǎn)化彩色陸地重地影響著棉花的產(chǎn)量和纖維品質(zhì)。該病害自1935棉,通過(guò)病圃篩選和分子檢測(cè),獲得高抗枯斑型黃年伴隨美棉的引進(jìn)傳入我國(guó)后,在國(guó)內(nèi)各產(chǎn)棉區(qū)逐萎病的轉(zhuǎn)gafp基因株系。陳大軍等[13]利用落葉型

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 陳大軍,簡(jiǎn)桂良,李仁敬,張振南,劉豐疆,姚正陪;轉(zhuǎn)天麻抗真菌蛋白基因彩色棉新品系抗枯黃萎病研究[J];分子植物育種;2003年Z1期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王樹(shù)剛;張友秋;栗紅梅;;天麻抗真菌蛋白基因(gafp)轉(zhuǎn)化鑫秋1號(hào)的研究[A];中國(guó)棉花學(xué)會(huì)2014年年會(huì)論文匯編[C];2014年

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本文編號(hào)：807533