發(fā)布時(shí)間：2017-09-05 02:48

  本文關(guān)鍵詞：高表達(dá)ALDH2基因改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的初步研究

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【摘要】：目的:探討乙醛脫氫酶2(ALDH2)基因?qū)肴四氺o脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)后對(duì)其增殖和抗氧化損傷的影響。方法:將培養(yǎng)的HUVECs分為轉(zhuǎn)染目的基因組(轉(zhuǎn)基因組)、轉(zhuǎn)染空載體組(空質(zhì)粒對(duì)照組)和未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒組(陰性對(duì)照組),轉(zhuǎn)基因組采用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法將含人ALDH2基因的真核表達(dá)載體導(dǎo)入HUVECs中,采用RT-PCR和Western blot檢測(cè)各組ALDH2基因和蛋白的表達(dá);采用不同濃度過氧化氫(H_2O_2)(0、50、75、100和125μmol/L)孵育HUVECs 48 h后,檢測(cè)各組細(xì)胞增殖水平及氧化損傷程度,檢測(cè)各組細(xì)胞中血紅素氧合酶(HO-1)、ROS及一氧化氮(NO)含量的變化。結(jié)果:轉(zhuǎn)基因組熒光強(qiáng)度和數(shù)量比陰性對(duì)照組顯著提高,提示導(dǎo)入的ALDH2基因在HUVECs細(xì)胞得到高表達(dá);與空質(zhì)粒對(duì)照組和陰性對(duì)照組比較,轉(zhuǎn)染72 h后,轉(zhuǎn)基因組細(xì)胞ALDH2 mRNA和蛋白表達(dá)增加(P0.01);不同濃度H_2O_2孵育48 h后,轉(zhuǎn)基因組HUVECs存活率明顯升高(P0.05);轉(zhuǎn)基因組可抑制一定濃度H_2O_2誘導(dǎo)的ROS水平的升高、降低HO-1表達(dá)及增加NO的產(chǎn)生,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:ALDH2基因高表達(dá)可降低低氧自由基引起的HUVECs細(xì)胞的損傷,保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的生物學(xué)功能。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)附院血液內(nèi)科;貴州醫(yī)科大學(xué)附屬白云醫(yī)院藥劑科;
【關(guān)鍵詞】： 乙醛脫氫酶 轉(zhuǎn)染 氧化損傷 一氧化氮 內(nèi)皮細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81360501) 貴州省科學(xué)技術(shù)基金資助項(xiàng)目[黔科合SY字(2012)3138];貴州省科學(xué)技術(shù)基金資助項(xiàng)目[黔科合LH字(2014)7130] 貴州省省長基金臨床應(yīng)用課題專項(xiàng)研究資助項(xiàng)目[黔省專合字(2012)97]
【分類號(hào)】：R543
【正文快照】： **通信作者E-mail:fq_fangqin@sina.com網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間:2016-11-15網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1164.R.20161115.1757.019.html骨髓造血微環(huán)境內(nèi)有大量由血管內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cells,ECs)構(gòu)成的血竇存在,它與造血干細(xì)胞密切接觸,影響造血細(xì)胞的增殖與，

本文編號(hào)：795393