高表達ALDH2基因改善血管內(nèi)皮細胞功能的初步研究
發(fā)布時間:2017-09-05 02:48
本文關鍵詞:高表達ALDH2基因改善血管內(nèi)皮細胞功能的初步研究
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【摘要】:目的:探討乙醛脫氫酶2(ALDH2)基因?qū)肴四氺o脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)后對其增殖和抗氧化損傷的影響。方法:將培養(yǎng)的HUVECs分為轉染目的基因組(轉基因組)、轉染空載體組(空質(zhì)粒對照組)和未轉染質(zhì)粒組(陰性對照組),轉基因組采用脂質(zhì)體介導的方法將含人ALDH2基因的真核表達載體導入HUVECs中,采用RT-PCR和Western blot檢測各組ALDH2基因和蛋白的表達;采用不同濃度過氧化氫(H_2O_2)(0、50、75、100和125μmol/L)孵育HUVECs 48 h后,檢測各組細胞增殖水平及氧化損傷程度,檢測各組細胞中血紅素氧合酶(HO-1)、ROS及一氧化氮(NO)含量的變化。結果:轉基因組熒光強度和數(shù)量比陰性對照組顯著提高,提示導入的ALDH2基因在HUVECs細胞得到高表達;與空質(zhì)粒對照組和陰性對照組比較,轉染72 h后,轉基因組細胞ALDH2 mRNA和蛋白表達增加(P0.01);不同濃度H_2O_2孵育48 h后,轉基因組HUVECs存活率明顯升高(P0.05);轉基因組可抑制一定濃度H_2O_2誘導的ROS水平的升高、降低HO-1表達及增加NO的產(chǎn)生,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:ALDH2基因高表達可降低低氧自由基引起的HUVECs細胞的損傷,保護內(nèi)皮細胞的生物學功能。
【作者單位】: 貴州醫(yī)科大學附院血液內(nèi)科;貴州醫(yī)科大學附屬白云醫(yī)院藥劑科;
【關鍵詞】: 乙醛脫氫酶 轉染 氧化損傷 一氧化氮 內(nèi)皮細胞
【基金】:國家自然科學基金資助項目(No.81360501) 貴州省科學技術基金資助項目[黔科合SY字(2012)3138];貴州省科學技術基金資助項目[黔科合LH字(2014)7130] 貴州省省長基金臨床應用課題專項研究資助項目[黔省專合字(2012)97]
【分類號】:R543
【正文快照】: **通信作者E-mail:fq_fangqin@sina.com網(wǎng)絡出版時間:2016-11-15網(wǎng)絡出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1164.R.20161115.1757.019.html骨髓造血微環(huán)境內(nèi)有大量由血管內(nèi)皮細胞(endothelial cells,ECs)構成的血竇存在,它與造血干細胞密切接觸,影響造血細胞的增殖與,
本文編號:795393
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