本文關(guān)鍵詞：小鼠MyoD基因誘導(dǎo)綿羊臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞為成肌細(xì)胞的研究

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【摘要】：為了探討小鼠MyoD基因誘導(dǎo)綿羊臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)為成肌細(xì)胞的可能性,本研究用小鼠MyoD-pcDNA3.1真核表達(dá)載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染綿羊UCMSCs,在觀察細(xì)胞形態(tài)變化的同時(shí),檢測(cè)成肌細(xì)胞標(biāo)記蛋白表達(dá)、表達(dá)成肌細(xì)胞特異蛋白的細(xì)胞比率和成肌細(xì)胞特異基因mRNA相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果顯示,與對(duì)照組(未轉(zhuǎn)染)相比,在轉(zhuǎn)染MyoD-pcDNA3.1質(zhì)粒后第21天,大部分細(xì)胞呈現(xiàn)似成肌細(xì)胞的細(xì)長(zhǎng)管狀;與對(duì)照組未表達(dá)相關(guān)蛋白相比,轉(zhuǎn)染MyoD-pcDNA3.1后第8天,在熒光倒置顯微鏡下觀察到細(xì)胞表達(dá)MyoD和Desmin蛋白熒光,轉(zhuǎn)染后第16天,不僅觀察到細(xì)胞表達(dá)MyoD和Desmin,而且觀察到MyoG蛋白的表達(dá);對(duì)于轉(zhuǎn)染細(xì)胞后22d的細(xì)胞進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示,表達(dá)MyoD、MyoG和Desmin的細(xì)胞比率分別達(dá)93.5%、97.4%和99.5%;此外,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)顯示,轉(zhuǎn)染MyoD-pcDNA3.1后第28天,其細(xì)胞中的MyoD、MyoG和Desmin mRNA相對(duì)表達(dá)量分別提高2.046、2.389和5.489倍。上述結(jié)果表明,利用小鼠MyoD構(gòu)建真核表達(dá)載體具有誘導(dǎo)UCMSCs分化為成肌細(xì)胞的功效。
【作者單位】： 東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 小鼠 MyoD基因 綿羊臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 誘導(dǎo) 成肌細(xì)胞
【基金】：黑龍江省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2016012) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31000990)
【分類(lèi)號(hào)】：Q23
【正文快照】： 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(Umbilical cord mesenchy-mal stem cells,UCMSCs)具有與其他成體干細(xì)胞類(lèi)似的自我更新和多向分化能力。誘導(dǎo)UCMSCs為其他體細(xì)胞的相關(guān)研究在探明細(xì)胞重編程機(jī)制中具有重要意義。目前,已建立包括人在內(nèi)的多種動(dòng)物UCMSCs分離培養(yǎng)及純化流程[1-2],該細(xì)胞分離培

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