本文關鍵詞：利用RNA干擾技術沉默稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因

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【摘要】：稻縱卷葉螟(Cnaphalocrocis medinalis)是一種主要的水稻害蟲,幾丁質(zhì)合成酶是昆蟲體內(nèi)幾丁質(zhì)合成通路中的一個關鍵酶,在昆蟲生長發(fā)育中具有重要作用,是控制害蟲的理想靶標。本文采用RNA干擾(RNAi)技術,以稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因(CmCHSA)為靶標,設計兩個靶位點CmCHSA-I和CmCHSA-II,在體外分別合成其雙鏈RNA(dsRNA),用顯微注射法導入3齡幼蟲體內(nèi),然后通過表型觀察和熒光定量PCR(RT-q PCR)檢測干擾效應。結(jié)果表明,注射兩種dsRNA后縱卷葉螟對水稻的取食明顯下降,生長發(fā)育阻滯,蟲體變小變黑和畸形,有的出現(xiàn)死亡。RT-q PCR表明,注射CmCHSA-I和CmCHSA-II兩種dsRNA在96 h后,CmCHSA的表達量相比對照分別下降了59%和64%。注射CmCHSA-I和CmCHSA-II兩種dsRNA 7 d后,稻縱卷葉螟的死亡率分別為80%和83.33%,與對照組相比,分別增加了66.67%和70%。本研究用注射法RNAi技術成功實現(xiàn)了對稻縱卷葉螟幾丁質(zhì)合成酶A基因的沉默,為利用該技術研究昆蟲基因的功能,以及通過轉(zhuǎn)基因RNAi技術防治稻縱卷葉螟奠定了基礎。
【作者單位】： 貴州大學昆蟲研究所貴州山地農(nóng)業(yè)病蟲害重點實驗實;貴州大學昆蟲資源開發(fā)利用特色重點實驗室;
【關鍵詞】： RNA干擾 稻縱卷葉螟 幾丁質(zhì)合成酶A基因 雙鏈RNA
【基金】：國家自然科學基金項目“利用RNAi技術防治稻縱卷葉螟的研究”(31360443) 貴州省科技創(chuàng)新人才團隊項目“貴州省節(jié)肢動物資源開發(fā)利用科技創(chuàng)新人才團隊”(黔科合人才團隊[2014]4001號)
【分類號】：S435.112.1
【正文快照】： 水稻(Oryza sativa)是人類的一種主要糧食作物,世界上有一半以上的人口以稻米為主食。我國是世界上最大的大米生產(chǎn)國和消費國,有65%以上的人口以大米為主食。因此,水稻高產(chǎn)豐收對我國糧食安全至關重要。然而,蟲害則是造成水稻減產(chǎn)的主要原因之一。稻縱卷葉螟(Cnaphalocrocis m

【相似文獻】

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1 王高峰;馮欣;彭德良;孫建華;;RNA干擾技術在植物線蟲基因功能研究及蟲害防治方面的應用[J];生物技術通報;2008年05期

2 ;[J];;年期

，

本文編號：772225