本文關(guān)鍵詞：絞股藍(lán)鯊烯合成酶基因GpSS1的克隆、序列與表達(dá)分析及MeJA對(duì)其表達(dá)的影響

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【摘要】：目的克隆絞股藍(lán)Gynostemma pentaphyllum鯊烯合成酶基因(GpSS1),進(jìn)行序列及表達(dá)分析,并研究茉莉酸甲酯(Me JA)對(duì)其調(diào)節(jié)的影響。方法基于Gen Bank提供的Gp SS基因序列設(shè)計(jì)GpSS1引物,利用RT-PCR方法獲取GpSS1基因編碼區(qū)序列;運(yùn)用Protparam及Tmpred軟件預(yù)測(cè)GpSS1蛋白的理化性質(zhì)和跨膜結(jié)構(gòu)域;采用Motif Scan及Bio Edit軟件分析GpSS1酶催化活性保守區(qū)及蛋白多重序列比對(duì);實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析GpSS1基因的表達(dá)模式及Me JA對(duì)其調(diào)節(jié)的影響。結(jié)果 GpSS1(Gen Bank號(hào)為KU363976)編碼區(qū)長(zhǎng)1 254 bp,編碼417個(gè)氨基酸;GpSS1基因具有3個(gè)與該酶催化活性相關(guān)的保守區(qū)、1個(gè)天冬氨酸富含區(qū)和1個(gè)碳端內(nèi)質(zhì)網(wǎng)錨定區(qū)。GpSS1基因在幼葉中表達(dá)最高,其次是老葉,在根狀莖中的表達(dá)較低。不同濃度Me JA噴施絞股藍(lán)植株后均引起了GpSS1基因的表達(dá)上調(diào),其中50μmol/L的Me JA對(duì)GpSS1基因表達(dá)的影響最大。GpSS1基因在幼葉和老葉中的表達(dá)均呈現(xiàn)出先逐漸上升后有所下降的趨勢(shì),但在幼葉中的表達(dá)水平高于老葉。結(jié)論絞股藍(lán)GpSS1基因的克隆及Me JA對(duì)其調(diào)控的分析,為進(jìn)一步研究GpSS1基因的功能和Me JA對(duì)其調(diào)節(jié)的機(jī)制,以及為改善絞股藍(lán)皂苷品質(zhì)或提高其產(chǎn)量提供了科學(xué)理論依據(jù)。
【作者單位】： 北京林業(yè)大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;吉首大學(xué)生物資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院生物系;
【關(guān)鍵詞】： 絞股藍(lán) 三萜皂苷 GpSS 序列分析 基因表達(dá) 茉莉酸甲酯調(diào)節(jié)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31260039)
【分類號(hào)】：S567.237
【正文快照】： 2.吉首大學(xué)生物資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院生物系,湖南吉首416000Makino為葫蘆科絞股藍(lán)屬多年生草質(zhì)藤本植物,廣泛分布于中國(guó)、日本、韓國(guó)和朝鮮等亞洲國(guó)家[1]。絞股藍(lán)因能合成和積累人參皂苷類物質(zhì)而被稱為“南方人參”[2]。絞股藍(lán)皂苷對(duì)炎癥、肝炎、心血管疾病和癌癥等多種疾病具有

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4 王，

本文編號(hào)：701574